發(fā)布時(shí)間：2024-03-12 00:52

　　體細(xì)胞核移植（somatic cell nuclear transfer，SCNT）可以快速大量復(fù)制具有優(yōu)良數(shù)量、質(zhì)量性狀家畜個體，是一項(xiàng)有著廣泛應(yīng)用前景重要胚胎工程技術(shù)。本實(shí)驗(yàn)以提高豬SCNT效率為中心，從三個方面對豬SCNT重編程、胚胎發(fā)育影響因素及其分子細(xì)胞機(jī)制進(jìn)行研究：（1）分析豬SCNT影響因素；（2）優(yōu)化豬SCNT胚胎培養(yǎng)體系并研究胚胎發(fā)育相關(guān)機(jī)制；（3）制備嵌合體豬。 對作者所在課題組2008年至2012年豬胚胎移植數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)：春季進(jìn)行胚胎移植成功率遠(yuǎn)高于冬季（33.6%vs.18.6%，p=0.006）；胚胎移植時(shí)未排卵代孕母豬懷孕成功率高于已排卵受體母豬（32.0%vs.17.5%，p=0.004）；流產(chǎn)主要集中出現(xiàn)在胚胎移植后第27天到34天之間；根據(jù)生存分析結(jié)果，可以推測正常受精母豬和代孕母豬分別在117天和125天前產(chǎn)仔完畢；代孕母豬懷孕周期與產(chǎn)仔數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。 為了提高克隆效率，使用維生素C、丙戊酸鈉（valproic acid，VPA）和Scriptaid對豬SCNT胚胎進(jìn)行處理，并對相應(yīng)分子細(xì)胞機(jī)制進(jìn)行探索。50μg/ml維生素C處理豬SCNT胚胎...

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.1不同月份懷孕情況

。然而，同一時(shí)間在世界不同地區(qū)的氣候存在很大差異。因而，在研究中，依據(jù)候溫法進(jìn)行季節(jié)推定（表1.1）。如表1.5所示，春季、季和冬季PR率并不存在顯著差異，而春季中FTP率顯著高于夏季冬季。這些結(jié)果說明春季和秋季均為進(jìn)行SCNT的合適季節(jié)。另一實(shí)驗(yàn)室報(bào)道了相似的....

圖1.2線性回歸和生存分析

FTP數(shù)目和總體受體母豬數(shù)目之間關(guān)系密切（p=0.001）。如圖1.2A所示，F(xiàn)TP數(shù)目（y）和總受體母豬數(shù)目（x）可以用線性回歸方程表示：y=0.386x-7.387。該線性回歸方程不僅說明我們的SCNT系統(tǒng)穩(wěn)定，而且暗示隨著胚胎移植次數(shù)增多將有獲得更多懷孕到期受體....

圖2.1胎兒成纖維細(xì)胞和囊胚中的acH4K5免疫染色Figure2.1Acetylationlevelsofhistone4lysine5infetalfibroblast

成纖維細(xì)胞在含有維生素C培養(yǎng)液中培養(yǎng)15小時(shí)并不影響其H4K5乙�；剑▓D2.1）。用維生素C對SCNT胚胎在激活后進(jìn)行15小時(shí)處理，分別在原核/假原核時(shí)期、二細(xì)胞、四細(xì)胞和囊胚階段檢測胚胎acH4K5乙酰化水平。結(jié)果顯示，維生素C處理對原核/假....

圖2.2經(jīng)過VPA處理或者未處理的SCNT胚胎和胎兒成纖維細(xì)胞相對乙酰化水平

圖2.2經(jīng)過VPA處理或者未處理的SCNT胚胎和胎兒成纖維細(xì)胞相對乙�；紽igure2.2RelativelevelofacH3K14andacH4K5infetalfibroblastcellsorSCNTembryoswithout....

本文編號：3926286