FAdV-4和FAdV-8b分離株感染致病性比較病理學研究
發(fā)布時間:2024-02-14 01:54
禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)是一種無囊膜的雙股DNA病毒,屬于腺病毒科(Adenoviridae)禽腺病毒屬(Aviadenovirus),根據(jù)抗原性的差異,被分為3個群(FAdV-ⅠⅢ),其中Ⅰ群禽腺病毒FAdV-A又分為5個亞群(AE)、12個血清型(FAdV-1至11,其中FAdV-8分為a和b兩型),FAdV-Ⅰ可引起雞的心包積液綜合征(Hydropericardium syndrome,HPS)和包涵體肝炎(Inclusion body hepatitis,IBH)。HPS由血清4型禽腺病毒(FAdV-4)感染所致,IBH可由FAdV-8b、FAdV-7和FAdV-11多種血清型FAdV引起。HPS與IBH患病雞的肝臟均表現(xiàn)出血性壞死和核內(nèi)包涵體形成,兩者肝臟病變性質(zhì)相同,但只有HPS發(fā)生雞心包積液病變并造成發(fā)病雞急性死亡。2015年HPS在中國突然大面積爆發(fā)流行,發(fā)病雞群表現(xiàn)20%70%的死亡率,給養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。為了探究HPS和IBH致病性的異同,本研究擬對本實驗室分離的...
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
1 引言
1.1 病原學
1.1.1 FAdV分類
1.1.2 FAdV的形態(tài)結(jié)構(gòu)和理化特性
1.1.3 FAdV的復制
1.2 FAdV流行病學
1.3 FAdV-Ⅰ感染雞的臨床表現(xiàn)、病理變化
1.3.1 臨床表現(xiàn)
1.3.2 病理變化
1.4 FAdV感染與免疫反應
1.5 FAdV感染與炎性反應
1.6 禽腺病毒病防控措施
1.7 研究目的及意義
2 材料與方法
2.1 儀器與試劑
2.2 試劑配制
2.3 試驗方法與步驟
2.3.1 FAdV-4和FAdV-8b的純化
2.3.2 病毒TCID50的測定
2.4 動物試驗
2.4.1 免疫器官指數(shù)測定
2.4.2 干濕重檢測
2.4.3 常規(guī)石蠟切片方法
2.4.4 免疫組織化學方法
2.4.5 病毒DNA的提取
2.4.6 熒光定量標準曲線的建立
2.4.7 RNA提取
2.4.8 RNA反轉(zhuǎn)錄及熒光定量檢測
2.5 體外感染試驗
2.5.1 LMH細胞復蘇
2.5.2 LMH細胞計數(shù)
2.5.3 LMH細胞傳代
2.5.4 LMH細胞凍存
2.5.5 CM、CF的分離培養(yǎng)及鑒定
2.5.6 病毒在LMH、CM和 CF中感染增殖
2.6 感染雞肝臟和心臟組織的炎癥因子檢測
2.7 病毒感染LMH和 CM的炎癥因子檢測
2.8 炎癥因子含量檢測
2.9 統(tǒng)計分析
3 試驗結(jié)果
3.1 FAdV-4和FAdV-8b對 SPF雛雞致病性比較研究
3.1.1 兩病毒感染雛雞的臨床癥狀
3.1.2 感染雞均表現(xiàn)典型的剖檢病變
3.1.3 感染雞的肝臟和心臟組織病理學變化
3.1.4 其他器官的組織病理學變化
3.1.5 器官水腫病變檢測
3.1.6 免疫器官指數(shù)檢測
3.2 兩病毒感染致病性研究
3.2.1 兩病毒在感染雞肝臟和LMH細胞內(nèi)增殖情況
3.2.2 兩病毒在感染雞的心臟、CM和 CF中增殖表現(xiàn)
3.2.3 兩病毒感染雛雞的肝臟和心臟炎癥反應
3.3.3.1 兩病毒引起的肝臟炎癥反應
3.3.3.2 兩病毒引起的心臟炎癥反應
3.3.3.3 兩病毒感染致細胞因子含量檢測
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表論文情況
本文編號:3897555
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1 引言
1.1 病原學
1.1.1 FAdV分類
1.1.2 FAdV的形態(tài)結(jié)構(gòu)和理化特性
1.1.3 FAdV的復制
1.2 FAdV流行病學
1.3 FAdV-Ⅰ感染雞的臨床表現(xiàn)、病理變化
1.3.1 臨床表現(xiàn)
1.3.2 病理變化
1.4 FAdV感染與免疫反應
1.5 FAdV感染與炎性反應
1.6 禽腺病毒病防控措施
1.7 研究目的及意義
2 材料與方法
2.1 儀器與試劑
2.2 試劑配制
2.3 試驗方法與步驟
2.3.1 FAdV-4和FAdV-8b的純化
2.3.2 病毒TCID50的測定
2.4 動物試驗
2.4.1 免疫器官指數(shù)測定
2.4.2 干濕重檢測
2.4.3 常規(guī)石蠟切片方法
2.4.4 免疫組織化學方法
2.4.5 病毒DNA的提取
2.4.6 熒光定量標準曲線的建立
2.4.7 RNA提取
2.4.8 RNA反轉(zhuǎn)錄及熒光定量檢測
2.5 體外感染試驗
2.5.1 LMH細胞復蘇
2.5.2 LMH細胞計數(shù)
2.5.3 LMH細胞傳代
2.5.4 LMH細胞凍存
2.5.5 CM、CF的分離培養(yǎng)及鑒定
2.5.6 病毒在LMH、CM和 CF中感染增殖
2.6 感染雞肝臟和心臟組織的炎癥因子檢測
2.7 病毒感染LMH和 CM的炎癥因子檢測
2.8 炎癥因子含量檢測
2.9 統(tǒng)計分析
3 試驗結(jié)果
3.1 FAdV-4和FAdV-8b對 SPF雛雞致病性比較研究
3.1.1 兩病毒感染雛雞的臨床癥狀
3.1.2 感染雞均表現(xiàn)典型的剖檢病變
3.1.3 感染雞的肝臟和心臟組織病理學變化
3.1.4 其他器官的組織病理學變化
3.1.5 器官水腫病變檢測
3.1.6 免疫器官指數(shù)檢測
3.2 兩病毒感染致病性研究
3.2.1 兩病毒在感染雞肝臟和LMH細胞內(nèi)增殖情況
3.2.2 兩病毒在感染雞的心臟、CM和 CF中增殖表現(xiàn)
3.2.3 兩病毒感染雛雞的肝臟和心臟炎癥反應
3.3.3.1 兩病毒引起的肝臟炎癥反應
3.3.3.2 兩病毒引起的心臟炎癥反應
3.3.3.3 兩病毒感染致細胞因子含量檢測
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