豬Myf5基因編碼區(qū)克隆及時空表達(dá)研究
發(fā)布時間:2024-01-29 22:37
Myf5是生肌調(diào)節(jié)因子家族成員,在胚胎期生肌過程中,決定成肌細(xì)胞的特化和成肌的起始;在動物出生后個體發(fā)育過程中,參與肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖活化。本研究旨在克隆馬身豬myf5基因CDS區(qū)并分析豬Myf5基因的組織表達(dá)分布和發(fā)育性表達(dá)規(guī)律。 通過PCR擴(kuò)增測序獲得了馬身豬Myf5基因CDS區(qū),長768bp,在CDS區(qū)發(fā)現(xiàn)兩個變異位點(diǎn),分別是C205A(以起始密碼子第一個堿基為1)、G735C,并對推測的Myf5蛋白進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,預(yù)測結(jié)果顯示,豬Myf5蛋白偏酸性,穩(wěn)定性較差,預(yù)測到14個糖基化位點(diǎn)和31個潛在的磷酸化位點(diǎn),空間構(gòu)象呈現(xiàn)螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)。 采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)和western-blot技術(shù)檢測了馬身豬和大白豬不同組織(心、肝、脾、肺、腎、胃、腸、胰腺、腦、背最長肌、腰大肌和股二頭肌)中Myf5基因相對表達(dá)豐度,發(fā)現(xiàn)Myf5基因主要在骨骼肌(本試驗(yàn)中涉及到背最長肌,腰大肌和股二頭肌)中表達(dá),馬身豬Myf5基因的表達(dá)要顯著高于大白豬。 進(jìn)一步檢測馬身豬和大白豬從初生到180日齡7個階段(Id、30d、60d、90d、120d、150d和180d)背最長肌中Myf5基因m...
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
本文編號:3888973
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圖1-1生肌決定因子的結(jié)構(gòu)丨32l
圖1-2肌纖維細(xì)胞核Myf5激活信號途徑模式圖l48】Fig.1-2ModelofthepathwayscontrollingmyonuclearMyf5activation'"^'
圖2-1PCR產(chǎn)物電泳圖
圖2-2PCR產(chǎn)物電泳圖
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