沙門氏菌是常見的食源性人畜共患病病原菌之一,能夠引起人類和禽畜產(chǎn)生腹瀉等炎癥反應(yīng),嚴(yán)重感染會(huì)導(dǎo)致敗血癥甚至危及生命。此種危害,給人類安全和養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)都帶來了嚴(yán)重威脅。腸道是機(jī)體重要的水鹽代謝器官之一。研究表明,AQPs在腸道異常表達(dá)會(huì)使腸道對(duì)水分的吸收產(chǎn)生不同程度的影響。因此水通道蛋白的表達(dá)變化對(duì)腸道水轉(zhuǎn)運(yùn)影響一直是研究重點(diǎn),但是目前報(bào)道主要集中在人類、大鼠和小鼠這類哺乳動(dòng)物中,對(duì)于沙門氏菌侵襲后,雛雞腸道內(nèi)水通道蛋白表達(dá)的研究還是盲點(diǎn)。本研究首先通過沙門氏菌PCR鑒定、生化鑒定、血清型檢測(cè)及毒力基因檢測(cè)等方法對(duì)吉林省內(nèi)部分地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)沙門氏菌進(jìn)行了分離鑒定。而后通過口服攻毒實(shí)驗(yàn)、觀察臨床變化、及HE染色等方法,驗(yàn)證分離出的沙門氏菌分離株及沙門氏菌標(biāo)準(zhǔn)株對(duì)雛雞致病性的影響。最后對(duì)雛雞腸道存在的水通道蛋白基因進(jìn)行檢測(cè),口服攻毒1日、3日、5日、7日后,用熒光定量PCR方法對(duì)雛雞腸道水通道蛋白基因水平變化進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1、成功分離出7株沙門氏菌,健康雞、病死雞分離率分別為7%、4%;符合沙門氏菌生化特征;血清型鑒定顯示,7株分離菌屬于沙門氏菌D群;7株沙門氏菌SPI-2缺失。2、...

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 沙門氏菌研究進(jìn)展
        1.1 沙門氏菌的概述
        1.2 沙門氏菌的分類
        1.3 沙門氏菌的抗原特征
        1.4 沙門氏菌的毒力研究
        1.5 沙門氏菌的流行病學(xué)及感染癥狀
        1.6 沙門氏菌的致病機(jī)制
        1.7 沙門氏菌的預(yù)防
    第二章 雞水通道蛋白研究進(jìn)展
        2.1 水通道蛋白概述
        2.2 雞不同部位的AQPs研究進(jìn)展
            2.2.1 雞泌尿系統(tǒng)的AQPs及其功能
            2.2.2 雞消化系統(tǒng)的AQPs及其功能
            2.2.3 生殖系統(tǒng)的AQPs及其功能
            2.2.4 其他部位的AQPs及其功能
        2.3 展望
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 沙門氏菌分離鑒定及毒力基因檢測(cè)
        1.1 材料(菌株、儀器、試劑、試劑配制)
            1.1.1 菌株及病料
            1.1.2 儀器
            1.1.3 試劑
            1.1.4 試劑配方
        1.2 方法
            1.2.1 樣本采集
            1.2.2 沙門氏菌的分離純化
            1.2.3 沙門氏菌PCR鑒定
            1.2.4 沙門氏菌生化鑒定
            1.2.5 沙門氏菌血清型鑒定
            1.2.6 沙門氏菌毒力基因鑒定
        1.3 結(jié)果與分析
            1.3.1 沙門氏菌分離結(jié)果
            1.3.2 沙門氏菌生化鑒定結(jié)果
            1.3.3 沙門氏菌血清型鑒定結(jié)果
            1.3.4 毒力基因檢測(cè)結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 沙門氏菌對(duì)雛雞致病性研究
        2.1 材料
            2.1.1 菌株及雛雞
            2.1.2 儀器
            2.1.3 試劑
            2.1.4 試劑配方
        2.2 方法
            2.2.1 菌種培養(yǎng)細(xì)菌平板計(jì)數(shù)
            2.2.2 腹腔及口服接種
            2.2.3 沙門氏菌致死率統(tǒng)計(jì)
            2.2.4 沙門氏菌對(duì)雛雞體重的影響
            2.2.5 臨床癥狀及剖檢變化觀察
            2.2.6 HE染色及顯微鏡觀察
        2.3 結(jié)果與分析
            2.3.1 平板計(jì)數(shù)結(jié)果
            2.3.2 腹腔接種致死率結(jié)果
            2.3.3 體重增長(zhǎng)曲線
            2.3.4 臨床癥狀及剖檢變化結(jié)果
            2.3.5 HE染色結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 水通道蛋白在雛雞腸道中的表達(dá)檢測(cè)
        3.1 材料(菌株、儀器、試劑、試劑配制)
            3.1.1 內(nèi)臟樣本
            3.1.2 儀器
        3.2 方法
            3.2.1 RNA提取
            3.2.2 RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
            3.2.3 熒光定量PCR檢測(cè)雛雞水通道蛋白基因的表達(dá)
            3.2.4 沙門氏菌感染后雛雞腸道水通道蛋白變化
        3.3 結(jié)果與分析
            3.3.1 RNA濃度及純度結(jié)果
            3.3.2 雛雞十二指腸AQPs基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
            3.3.3 沙門氏菌感染后雛雞十二指腸AQPs基因變化結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3882183