牛星狀病毒及牛環(huán)曲病毒雙重RT-PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2024-01-20 12:07
為建立能同時(shí)快速檢測牛星狀病毒(bovine astrovirus,BAstV)和牛環(huán)曲病毒(bovine torovirus,BToV)的方法,本研究根據(jù)BAstV的ORF1a和BToV的S基因的保守區(qū)域分別設(shè)計(jì)了2對特異性引物,通過優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了能夠同時(shí)檢測BAstV和BToV的雙重RT-PCR方法。特異性結(jié)果顯示,該方法與牛輪狀病毒(bovine rotavirus,BRo V)、牛諾如病毒(bovine norovirus,BNoV)、牛冠狀病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹瀉病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛嵴病毒(bovine kobuvirus,BKoV)無交叉反應(yīng);敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示,該方法對BAstV和BToV質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的最低檢出下限分別為1.12×104copies/μL和1.0×103copies/μL。應(yīng)用該方法和各病原RT-PCR方法同時(shí)對221份河南省犢牛腹瀉糞便樣品進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示BAstV的陽性率為18.1%,BToV的陽性率為1...
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本文編號:3880813
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