為建立能同時(shí)快速檢測(cè)牛星狀病毒(bovine astrovirus,BAstV)和牛環(huán)曲病毒(bovine torovirus,BToV)的方法,本研究根據(jù)BAstV的ORF1a和BToV的S基因的保守區(qū)域分別設(shè)計(jì)了2對(duì)特異性引物,通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了能夠同時(shí)檢測(cè)BAstV和BToV的雙重RT-PCR方法。特異性結(jié)果顯示,該方法與牛輪狀病毒(bovine rotavirus,BRo V)、牛諾如病毒(bovine norovirus,BNoV)、牛冠狀病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹瀉病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛嵴病毒(bovine kobuvirus,BKoV)無(wú)交叉反應(yīng);敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示,該方法對(duì)BAstV和BToV質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的最低檢出下限分別為1.12×10⁴copies/μL和1.0×10³copies/μL。應(yīng)用該方法和各病原RT-PCR方法同時(shí)對(duì)221份河南省犢牛腹瀉糞便樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示BAstV的陽(yáng)性率為18.1%,BToV的陽(yáng)性率為1...

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本文編號(hào)：3880813