霉菌毒素是由各種霉菌在特定環(huán)境下產(chǎn)生的一類天然致癌物質(zhì),廣泛存在于農(nóng)產(chǎn)品和飼料中,對人類和動物的健康造成了嚴(yán)重威脅。其中,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)和黃曲霉毒素B₁(AFB₁)是飼料及其原料中污染率和污染水平最高的兩種霉菌毒素。近年來,動物因攝入霉菌毒素污染飼料而造成中毒的現(xiàn)象時有發(fā)生,嚴(yán)重影響了畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。霉菌毒素及其聯(lián)合毒性研究已成為各國學(xué)者研究的熱點(diǎn)。但目前罕見DON與AFB₁兩者聯(lián)合染毒對小鼠腸道損傷的報道。為此,本試驗選擇DON與AFB₁兩種毒素,通過比較兩種毒素單一與聯(lián)合作用對小鼠腸道功能的影響,旨在為DON與AFB₁聯(lián)合毒性研究提供試驗依據(jù)。選擇18日齡昆明系雄性小鼠96只,隨機(jī)分為4組,分別為(1)對照組,每天灌服生理鹽水;(2)DON組,每天灌服500μg·kg^-1 DON;(3)AFB₁組,每天灌服200μg·kg^-1AFB₁;(4)DON+AFB₁

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
ABSTRACT
縮寫和符號清單
文獻(xiàn)綜述
引言
1 材料與方法
    1.1 試驗動物
    1.2 試驗材料與儀器
    1.3 試驗溶液的配制
    1.4 試驗動物的分組及飼養(yǎng)管理
        1.4.1 試驗動物分組
        1.4.2 試驗動物飼養(yǎng)管理
    1.5 樣品的采集與處理
    1.6 血清和十二指腸中蛋白含量的測定
    1.7 十二指腸中氧化與抗氧化指標(biāo)的測定
    1.8 十二指腸中通透性相關(guān)指標(biāo)的測定
    1.9 回腸緊密連接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表達(dá)量的測定
        1.9.1 RNA的抽提(操作均在4℃進(jìn)行)
        1.9.2 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        1.9.3 實時定量PCR
    1.10 腸道菌群多樣性變化檢測
        1.10.1 樣品檢測
        1.10.2 文庫構(gòu)建
        1.10.3 生物信息分析
        1.10.4 統(tǒng)計分析
    1.11 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 血清和十二指腸中蛋白含量的變化
        2.1.1 血清中TP和ALB含量的變化
        2.1.2 十二指腸中TP和ALB含量的變化
    2.2 十二指腸中氧化與抗氧化指標(biāo)的變化
    2.3 十二指腸中通透性相關(guān)指標(biāo)的變化
    2.4 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對緊密連接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表達(dá)量的影響
    2.5 腸道菌群多樣性變化
        2.5.1 小鼠腸道菌群物種豐度及多樣性
        2.5.2 小鼠糞便樣本物種累計曲線圖分析
        2.5.3 OTUVenn圖分析
        2.5.4 物種Alpha多樣性分析
        2.5.5 小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)
3 討論
    3.1 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠血清和腸道蛋白含量的影響
    3.2 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠腸道氧化與抗氧化功能的影響
    3.3 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠腸道通透性的影響
        3.3.1 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠腸道中DAO活性的影響
        3.3.2 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠腸道中IL-4水平的影響
        3.3.3 DON與AFB₁單一及其聯(lián)合染毒對小鼠腸道中補(bǔ)體C₃和補(bǔ)體C₄的影響
    3.4 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠腸道緊密連接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表達(dá)量的影響
    3.5 DON與AFB₁單一及聯(lián)合染毒對小鼠腸道菌群多樣性的影響
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 A
附錄 B
作者簡介



本文編號：3877248