發(fā)布時間：2024-01-05 18:09

　　流感病毒是一種重要的人獸共患病病原,對人類和動物健康構(gòu)成重大威脅。禽類是流感病毒的自然宿主,目前從禽類宿主中分離的流感病毒根據(jù)表面蛋白血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)抗原性的不同,分為16種不同的HA亞型和9種不同的NA亞型。其中,H4亞型AIV在世界范圍內(nèi)廣泛存在。已有研究發(fā)現(xiàn)H4亞型AIV可以直接感染哺乳動物并且具備一定的在哺乳動物間水平傳播的能力,對人類健康構(gòu)成潛在威脅。H7N9流感病毒自2013年首次報道感染人以來,已嚴(yán)重危害公共衛(wèi)生安全。而且,隨著流行病學(xué)監(jiān)測和遺傳進化研究的深入,發(fā)現(xiàn)H7N9病毒進化復(fù)雜,出現(xiàn)了與2013年感染人病毒不同進化譜系的新的鴨源H7N9病毒,對人類健康構(gòu)成新的潛在威脅。疫苗免疫是防控流感流行和暴發(fā)的最有效手段。為了應(yīng)對H4以及新出現(xiàn)的鴨源H7N9亞型AIV對人類健康的潛在威脅,我們進行了H4和鴨源H7N9病毒HA蛋白表達純化及其免疫保護效力研究。以A/Duck/Jiangxi/S21055/2012(H4N2)及A/Duck/Fujian/S4170/2014(H7N9)AIV HA基因為模板,將其分別克隆到昆蟲細(xì)胞表達載體pFastBac1中,...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 禽流感病毒簡介
        1.1.1 禽流感病毒的分子生物學(xué)特性
        1.1.2 禽流感病毒的宿主范圍
        1.1.3 禽流感病毒引起的臨床癥狀
        1.1.4 禽流感病毒的傳播與進化
        1.1.5 H4亞型及H7亞型禽流感病毒
    1.2 禽流感疫苗概述
        1.2.1 全病毒滅活疫苗
        1.2.2 重組病毒滅活疫苗
        1.2.3 流感病毒減毒活疫苗
        1.2.4 重組活載體疫苗
        1.2.5 DNA疫苗
        1.2.6 復(fù)制缺陷型病毒疫苗
        1.2.7 亞單位疫苗
    1.3 本研究的目的和意義
第二章 H4及H7亞型禽流感病毒HA蛋白表達與純化
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 實驗方法
        2.1.3 p FBac HA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞以及Bacmid的提取
        2.1.4 H4及H7亞型流感病毒HA蛋白表達與檢測
    2.2 試驗結(jié)果
        2.2.1 H4及H7亞型流感病毒HA基因的PCR擴增
        2.2.2 重組Bacmid-HA的PCR鑒定
        2.2.3 H4及H7亞型流感病毒重組蛋白表達的間接免疫熒光鑒定
        2.2.4 Western blot鑒定H4及H7亞型流感病毒HA蛋白的表達
        2.2.5 H4及H7亞型流感病毒HA蛋白親和層析純化
        2.2.6 H4及H7亞型流感病毒HA蛋白的凝膠過濾純化
    2.3 討論
第三章 H4及H7亞型禽流感病毒HA蛋白的免疫原性研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試驗方法
    3.2 試驗結(jié)果
        3.2.1 不同收獲時間H4及H7亞型流感病毒HA蛋白的血凝活性鑒定
        3.2.2 病毒株雞胚半數(shù)感染量(EID₅₀)的測定結(jié)果
        3.2.3 HI抗體測定
        3.2.4 攻毒保護結(jié)果
    3.3 討論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻
附錄
    附錄 1
    附錄 2
致謝
作者簡歷



本文編號：3877084