大腸桿菌是普遍存在自然界中的細菌,一般情況下不致病,但一些血清型、毒力因子等具有致病性,能引起人和動物共同感染,是人畜共患病原菌。由致病性大腸桿菌導(dǎo)致的仔豬黃痢、仔豬白痢、仔豬水腫,發(fā)病率和死亡率高,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。由于抗生素濫用引發(fā)的耐藥性問題,更是使當(dāng)前生豬大腸桿菌病的防控愈發(fā)的困難。2018年2月份-8月份,閩西地區(qū)出現(xiàn)不同規(guī)�；i場發(fā)生不明原因引起的仔豬腹瀉率明顯增高的現(xiàn)象,給養(yǎng)殖戶造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。為確定造成本次疫情的病原菌,本研究采集發(fā)病仔豬的組織樣品進行了大腸桿菌的分離鑒定、種系發(fā)育分析、毒力基因檢測及敏感藥物篩選等研究,以期為該地區(qū)生豬大腸桿菌病的防控提供科學(xué)依據(jù)。具體研究工作如下:1.豬源大腸桿菌的分離鑒定及種系發(fā)育分群:通過細菌培養(yǎng)及染色、生化試驗、16S rRNA序列分析等方法,本研究自采集的62份腹瀉仔豬組織樣品中共分離、鑒定出44株大腸桿菌,分離率為70.97%;種系發(fā)育分群結(jié)果顯示,44株豬源大腸桿菌中有26株為A群、12株為B1群、4株為B2群、2株為D群,表明本研究分離的44株大腸桿菌主要以共生群為主,占總分離菌數(shù)的86.36%(38/4...

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【學(xué)位級別】：碩士

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英文縮略表
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.大腸桿菌的研究進展
        1.1 大腸桿菌的流行病學(xué)
        1.2 大腸桿菌的生物學(xué)特性
            1.2.1 大腸桿菌的培養(yǎng)特點
            1.2.2 大腸桿菌的生化特點
            1.2.3 大腸桿菌的血清型
        1.3 大腸桿菌種系發(fā)育群的研究
        1.4 大腸桿菌毒力因子
            1.4.1 黏附素
            1.4.2 腸毒素
            1.4.3 外膜蛋白
            1.4.4 鐵轉(zhuǎn)運系統(tǒng)
            1.4.5 耶爾森毒力島
    2.豬源大腸桿菌的耐藥性
        2.1 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀
    3.研究目的及意義
第二章 豬源大腸桿菌分離鑒定及種系發(fā)育分群
    1.材料
        1.1 樣品來源
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2.方法
        2.1 豬源大腸桿菌分離培養(yǎng)
        2.2 豬源大腸桿菌DNA的制備
        2.3 豬源大腸桿菌的鑒定
            2.3.1 革蘭氏染色
            2.3.2 生化反應(yīng)鑒定
            2.3.3 16S rRNA PCR擴增與序列測定
            2.3.4 豬源大腸桿菌種系發(fā)育分群
        2.5 菌株的保存
    3.結(jié)果
        3.1 豬源大腸桿菌分離培養(yǎng)結(jié)果
        3.2 豬源大腸桿菌生化鑒定結(jié)果
        3.3 豬源大腸桿菌16S r RNA PCR擴增結(jié)果
        3.4 豬源大腸桿菌種系發(fā)育分群結(jié)果
    4.討論
第三章 豬源大腸桿菌毒力基因的檢測
    1.材料
        1.1 受試菌株
        1.2 主要儀器及試劑
        1.3 引物的合成
    2.方法
        2.2 豬源致病性大腸桿菌毒力基因的檢測
        2.3 禽源致病性大腸桿菌毒力基因的檢測
    3.結(jié)果
        3.1 豬源致病性大腸桿菌毒力基因檢測結(jié)果
        3.2 禽源致病性大腸桿菌毒力基因檢測結(jié)果
    4.討論
第四章 豬源大腸桿菌耐藥性分析
    1.材料
        1.1 菌株
        1.2 抗菌藥物
        1.3 引物的合成
        1.4 主要試劑
        1.5 主要儀器
    2.方法
        2.1 藥敏試驗
            2.1.1 受試藥液的配制及稀釋
            2.1.2 菌液的配制
            2.1.3 MIC的測定
            2.1.4 藥敏結(jié)果判定
        2.2 豬源大腸桿菌耐藥基因的檢測
            2.2.1 氯霉素類藥物相關(guān)耐藥基因floR的檢測
            2.2.2 β-內(nèi)酰胺酶類藥物相關(guān)耐藥基因的檢測
    3.結(jié)果
        3.1 豬源大腸桿菌藥敏試驗結(jié)果
            3.1.1 耐藥率
            3.1.2 多重耐藥情況
        3.2 耐藥基因檢測結(jié)果
            3.2.1 氯霉素類藥物相關(guān)耐藥基因floR檢測結(jié)果
            3.2.2 β-內(nèi)酰胺酶類藥物相關(guān)耐藥基因檢測結(jié)果
            3.2.4 豬源大腸桿菌耐藥表型和耐藥基因相關(guān)性分析
    4.討論
第五章 豬源大腸桿菌致病性初步研究
    1.材料
        1.1 受試菌株
        1.2 主要儀器及試劑
    2.方法
        2.1 小鼠致病性試驗
        2.2 病理組織切片的制作
    3.結(jié)果
        3.1 致病性試驗結(jié)果
            3.1.1 小鼠臨床癥狀與病理剖檢結(jié)果
            3.1.2 組織病理切片顯微鏡觀察結(jié)果
    4.討論
總結(jié)
參考文獻
致謝



本文編號：3874512