結核病一直以來對人類健康構成嚴重的威脅。二芳基喹啉類化合物在結核病治療和研究方面具有可觀的前景,因此探究該類化合物對結核分枝桿菌的敏感性、耐藥基因及其安全性,可為抗結核藥物的研發(fā)和后期耐藥結核分枝桿菌的研究奠定基礎。本實驗采用2倍稀釋法測定貝達喹啉對結核分枝桿菌的最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC),通過測序檢測其耐藥基因,應用全基因組測序來預測耐藥基因和耐藥途徑;采用比例法測定二芳基喹啉類化合物對結核分枝桿菌的MIC和最小殺菌濃度(minimum bactericidal concentration,MBC),來驗證貝達喹啉有效基團,通過體內(nèi)毒性試驗來探究該類化合物的安全性。其結果如下:1、本區(qū)域結核病總耐藥率和耐多藥率分別為39.04%和19.99%。耐多藥除71-80年齡階段比其它耐藥類型都要高,且在41-50年齡階段最高為28.74%。結核分枝桿菌全基因組大小為4406812bp,G/C含量占65.62%,包含4113個ORF,總蛋白長度主要在600Aa以下;基因主要涉及能源生產(chǎn)和轉換、氨基酸轉運與代謝、碳水化合物運輸和代謝、...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
SUMMARY
縮略詞表
第一章 文獻綜述
    1.1 結核病及結核分枝桿菌研究進展
        1.1.1 結核病概述及其影響
        1.1.2 結核病疫苗研發(fā)
        1.1.3 耐藥結核分枝桿菌的發(fā)生
        1.1.4 耐藥結核病的影響
    1.2 結核病耐藥機制的研究
        1.2.1 一線抗結核藥物的耐藥性
        1.2.2 二線抗結核藥物的耐藥性
        1.2.3 耐藥機制研究方法
    1.3 結核病相關研究
        1.3.1 藥物敏感性檢測的應用
        1.3.2 結核病研究的新方法
        1.3.3 全基因組測序在結核病研究方面的應用
    1.4 抗結核新藥的研究進展
        1.4.1 貝達喹啉抗結核機制
        1.4.2 BDQ耐藥機制
        1.4.3 BDQ作用機制研究
        1.4.4 BDQ在非結核分枝桿菌方面的研究
        1.4.5 其他抗結核藥物的研究
    1.5 研究目的及意義
第二章 地域性結核病的耐藥情況
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗試劑
        2.1.3 試驗儀器
        2.1.4 方法
            2.1.4.1 菌株收錄
            2.1.4.2 菌液制備
            2.1.4.3 菌液稀釋及接種
            2.1.4.4 耐藥性的檢測
    2.2 結果
        2.2.1 臨床分離結核菌的年齡分布
        2.2.2 臨床分離耐藥結核菌的年齡分布
        2.2.3 臨床分離結核菌的耐藥情況
    2.3 討論
第三章 結核分枝桿菌的全基因組分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試驗儀器
        3.1.3 方法
            3.1.3.1 樣品準備
            3.1.3.2 基因組組分分析
            3.1.3.3 基因組功能注釋
    3.2 結果
        3.2.1 基因組組分分析
        3.2.2 基因組功能注釋
    3.3 討論
第四章 結核分枝桿菌對BDQ敏感性及其耐藥基因檢測
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試驗試劑
        4.1.3 主要試劑配置
        4.1.4 試驗儀器
        4.1.5 方法
            4.1.5.1 BDQ對結核分枝桿菌臨床菌株抑菌濃度的測定
            4.1.5.2 BDQ耐藥基因的檢測
    4.2 結果
        4.2.1 結核分枝桿菌臨床菌株對BDQ耐藥范圍的測定
        4.2.2 檢測BDQ耐藥基因
    4.3 討論
第五章 二芳基喹啉類化合物抗結核效果及安全性
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 試驗試劑
        5.1.3 主要試劑配置
        5.1.4 試驗儀器
        5.1.5 方法
            5.1.5.1 培養(yǎng)基制備
            5.1.5.2 菌懸液制備
            5.1.5.3 抗結核化合物活性的篩選
            5.1.5.4 比例法測定化合物H2的MIC和 MBC
            5.1.5.5 測定LD50試驗
            5.1.5.6 毒性試驗
    5.2 結果
        5.2.1 抗結核化合物活性篩選
        5.2.2 化合物H2對結核分枝桿菌抑菌效果
        5.2.3 化合物H2體內(nèi)毒性研究
            5.2.3.1 體征變化
            5.2.3.2 半數(shù)致死量及其置信區(qū)間
            5.2.3.3 化合物H2對小鼠體質(zhì)量的影響
            5.2.3.4 化合物H2對小鼠外周血的影響
            5.2.3.5 化合物H2對小鼠臟器系數(shù)的影響
            5.2.3.6 病理組織學觀察
    5.3 討論
全文結論
參考文獻
致謝
作者簡介
在讀期間發(fā)表論文和研究成果
導師簡介1
導師簡介2



本文編號：3865948