本研究旨在考察胰高血糖素樣肽-2(Glucagon-like peptide-2, GLP-2)對脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)應(yīng)激的仔豬空腸上皮細(xì)胞系IPEC-J2細(xì)胞緊密連接相關(guān)蛋白基因、蛋白表達(dá)和屏障功能的影響以及GLP-2調(diào)控緊密連接與屏障功能可能的分子機制(PI3K-Akt-mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑),深入探討GLP-2影響腸道屏障功能的基本規(guī)律以及可能的作用機理。研究共包括兩個試驗。試驗一GLP-2對LPS應(yīng)激的IPEC-J2細(xì)胞緊密連接表達(dá)及屏障功能的影響本試驗在研究LPS與GLP-2對IPEC-J2細(xì)胞緊密連接和屏障功能的影響基礎(chǔ)上,進(jìn)一步考察了GLP-2對LPS應(yīng)激的IPEC-J2細(xì)胞緊密連接和屏障功能的影響。試驗一采用單因子設(shè)計,分別考察100μg/ml LPS、100nmol/L GLP-2和100μg/ml LPS+100nmol/L GLP-2處理BPEC-J2細(xì)胞24h,對細(xì)胞形態(tài)、緊密連接基因、蛋白表達(dá)和屏障功能的影響,每個處理4個重復(fù)。通過研究GLP-2對LPS應(yīng)激IPEC-J2細(xì)胞緊密連接和屏障功能相關(guān)指標(biāo)的影響,初步探討GLP-...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
本文縮略詞表
前言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 緊密連接(tight junctions)
        1.1 緊密連接的組成
        1.2 緊密連接的生物學(xué)功能
        1.3 PI3K-Akt-mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及與緊密連接調(diào)節(jié)的關(guān)系
    2 GLP-2的生理功能及其腸營養(yǎng)效應(yīng)發(fā)揮的作用機制
        2.1 GLP-2的合成、分泌與代謝
        2.2 GLP-2的腸營養(yǎng)效應(yīng)
        2.3 GLP-2發(fā)揮生理作用的分子機制研究
    3 斷奶對仔豬腸道的影響與體外LPS處理斷奶仔豬腸細(xì)胞應(yīng)激模型
        3.1 斷奶對仔豬腸道的影響
        3.2 體外LPS處理斷奶仔豬腸細(xì)胞模型
第二部分 試驗研究有待研究的問題及本研究的目的、意義和技術(shù)路線
    1 有待研究的問題
    2 研究的目的和意義
        2.1 研究目的
        2.2 試驗意義
    3 技術(shù)路線
第三部分 試驗研究
    試驗一 GLP-2對LPS應(yīng)激的IPEC-J2細(xì)胞緊密連接表達(dá)及屏障功能的影響
        1 材料與方法
            1.1 試驗材料、主要試劑及儀器
            1.2 主要試劑配制
            1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.4 試驗內(nèi)容
            1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
        2 試驗結(jié)果
            2.1 GLP-2與LPS對IPEC-J2細(xì)胞形態(tài)的影響
            2.2 GLP-2與LPS對緊密連接蛋白mRNA相對表達(dá)量的影響
            2.3 GLP-2與LPS對緊密連接蛋白相對表達(dá)量的影響
            2.4 GLP-2與LPS對IPEC-J2屏障功能的影響
        3 討論
            3.1 LPS免疫應(yīng)激對仔豬腸上皮細(xì)胞緊密連接表達(dá)和屏障功能的影響
            3.2 GLP-2對應(yīng)激仔豬腸上皮緊密連接蛋白表達(dá)和屏障功能的保護(hù)效應(yīng)
        4 小結(jié)
    試驗二 2 GLP-2調(diào)控IPEC-J2細(xì)胞緊密連接表達(dá)及屏障功能的分子機制研究
        1 材料與方法
            1.1 試驗材料、主要試劑及儀器
            1.2 主要試劑配制
            1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.4 試驗內(nèi)容
            1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
        2 試驗結(jié)果
            2.1 GLP-2與抑制劑對Akt、mTOR和緊密連接蛋白mRNA相對表達(dá)量的影響
            2.2 GLP-2與抑制劑對p-Akt、p-mTOR和緊密連接蛋白相對表達(dá)量的影響
            2.3 GLP-2與抑制劑對IPEC-J2屏障功能的影響
        3 討論
            3.1 PI3K-Akt-mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑參與上皮細(xì)胞緊密連接和通透性調(diào)節(jié)
            3.2 GLP-2通過PI3K-Akt-mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞緊密連接和通透性
        4 小結(jié)
全文總體討論
全文結(jié)論
有待進(jìn)一步研究的問題
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3848378