棉酚是棉葵科植物及熱帶桐棉中含有的一種黃色化合物，分子式為1,1′,6,6′,7,7′-六羥基-5,5′-二異丙基-3,3′-二甲基-2,2′-聯(lián)二萘-8,8′二羥基醛，其中棉花籽實(shí)加工形成的棉籽餅粨中也含有大量的棉酚，因其具有抗生育活性，在飼料加工過程中需進(jìn)行脫毒處理，棉酚生物活性的深入研究也成為了一個(gè)熱點(diǎn)。除抗生育活性之外，已證實(shí)棉酚還具有抗腫瘤、抗病毒、抗寄生蟲等活性。本文利用LPS刺激建立小鼠急性肺損傷模型（ALI）及RAW264.7細(xì)胞炎性反應(yīng)模型，分別在體內(nèi)和體外觀察和驗(yàn)證棉酚的抗炎活性，并對(duì)TLR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路NF-κB、ERK、JNK、p38等關(guān)鍵接頭蛋白進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)其抗炎作用機(jī)制進(jìn)行初步探索，旨在為棉酚生物學(xué)活性的研究補(bǔ)充和提供抗炎活性相關(guān)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和資料。 本實(shí)驗(yàn)用LPS刺激小鼠呼吸道，構(gòu)建ALI模型，并分別使用2.5、5、10、20、40mg/kg等濃度的棉酚對(duì)該模型進(jìn)行處理。首先檢測(cè)小鼠肺臟干濕比值（W/D）的變化，并對(duì)其病理組織學(xué)進(jìn)行觀察；測(cè)定肺組織MPO活性；其次對(duì)肺泡灌洗液（BALF）中總細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，ELISA測(cè)定BALF中TNF-α...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮寫表
引言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 棉酚生物活性研究進(jìn)展
        1 棉酚概述
        2 棉酚的理化性質(zhì)
        3 棉酚的生物活性
            3.1 抗生育活性
            3.2 抗腫瘤活性
            3.3 抗病毒和抗寄生蟲活性
            3.4 抗氧化活性
            3.5 抗炎活性
    第二章 LPS 致炎機(jī)制研究進(jìn)展
        1 炎癥概述
        2 炎癥的免疫學(xué)研究
            2.1 免疫炎癥反應(yīng)
            2.2 LPS 誘導(dǎo)的免疫炎癥反應(yīng)中主要的細(xì)胞因子
        3 LPS 誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
            3.1 NF-kB 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
            3.2 MAPKs 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
        4 抗炎藥物的研發(fā)
            4.1 細(xì)胞因子抑制劑
            4.2 趨化因子及受體抑制劑
            4.3 MAPKs 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑
            4.4 轉(zhuǎn)錄因子抑制劑
第二篇 實(shí)驗(yàn)部分
    第一章 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠的保護(hù)作用
        1 材料
            1.1 動(dòng)物
            1.2 儀器和設(shè)備
            1.3 藥品和試劑
            1.4 試驗(yàn)所需試劑的配制
        2 方法
            2.1 小鼠急性肺損傷模型的構(gòu)建及藥物處理
            2.2 血常規(guī)分析
            2.3 小鼠肺組織濕干重比值（W/D）的測(cè)定
            2.4 小鼠肺組織的病理學(xué)評(píng)估
            2.5 小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）細(xì)胞計(jì)數(shù)
            2.6 小鼠髓過氧化物酶（MPO）活性的測(cè)定
            2.7 小鼠支氣管肺泡灌洗液 TNF-α, IL-1 及 IL-6 細(xì)胞因子的測(cè)定
            2.8 小鼠肺組織蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)
            2.9 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)
        3 結(jié)果
            3.1 棉酚對(duì)循環(huán)系統(tǒng)白細(xì)胞的影響
            3.2 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠肺組織的濕干重比值（W/D）的影響
            3.3 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠肺組織病理學(xué)變化的影響
            3.4 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠 BALF 中總細(xì)胞、中性白細(xì)胞及巨噬細(xì)胞數(shù)目的影響
            3.5 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠 MPO 活性的影響
            3.6 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠 BALF 中 TNF-α，IL-1β和 IL-6 產(chǎn)生的影響
            3.7 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠 NF-κB 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
            3.8 棉酚對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠 MAPKs 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
        4 討論
        5 小結(jié)
    第二章 棉酚對(duì) LPS 刺激的 RAW264.7 細(xì)胞的保護(hù)作用
        1 材料
            1.1 細(xì)胞
            1.2 儀器設(shè)備
            1.3 藥品和試劑
            1.4 試驗(yàn)所需試劑的配制
        2 方法
            2.1 MTT 法檢測(cè)棉酚對(duì) RAW264.7 細(xì)胞的毒性作用
            2.2 qRT-PCR 測(cè)定 RAW264.7 細(xì)胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 的基因表達(dá)水平
            2.3 ELISA 檢測(cè) RAW264.7 細(xì)胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 的蛋白表達(dá)水平
            2.4 免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western blot）
            2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
        3 結(jié)果
            3.1 棉酚對(duì) RAW264.7 細(xì)胞活性的影響
            3.2 棉酚對(duì) LPS 刺激的 RAW264.7 細(xì)胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 基因表達(dá)的影響
            3.3 棉酚對(duì) LPS 刺激的 RAW264.7 細(xì)胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 蛋白表達(dá)的影響
            3.4 棉酚對(duì) LPS 刺激的 RAW264.7 細(xì)胞 NF-κB 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
            3.5 棉酚對(duì) LPS 刺激的 RAW264.7 細(xì)胞 MAPKs 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
        4 討論
        5 小結(jié)
    第三章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間所取得的研究成果
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3845074