血吸蟲需要雌雄蟲配對和合抱以完成其發(fā)育成熟和產(chǎn)卵,并且成熟后血吸蟲所產(chǎn)的產(chǎn)卵是造成宿主病理損傷的主要原因。因此,揭示參與血吸蟲生殖發(fā)育相關(guān)的信號調(diào)控通路對開發(fā)新的防控策略具有重要意義。我們實驗室前期通過磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)Sjp38MAPK在日本血吸蟲信號通路網(wǎng)絡(luò)中是關(guān)鍵節(jié)點之一,為了闡明Sjp38MAPK在日本血吸蟲的寄生和生殖發(fā)育過程中的作用,本研究對日本血吸蟲Sjp38MAPK基因編碼的cDNA進(jìn)行了克隆,并對重組蛋白進(jìn)行了表達(dá)及鑒定。另外,還對Sjp38MAPK在日本血吸蟲不同發(fā)育階段、雌雄蟲的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行了分析。利用RNA干擾技術(shù),抑制了Sjp38MAPK基因的轉(zhuǎn)錄,對Sjp38MAPK在日本血吸蟲的生殖和發(fā)育中的功能進(jìn)行了初步研究。具體包括以下三個內(nèi)容:(一)日本血吸蟲Sjp38MAPK基因編碼cDNA的克隆表達(dá)及生物信息學(xué)分析根據(jù)實驗室前期蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定的Sjp38MAPK,設(shè)計引物,進(jìn)行PCR擴增,序列分析表明該基因序列包含一個1038bp的開放閱讀框,編碼Sjp38MAPK蛋白,預(yù)測分子量為39.58kD。生物信息學(xué)分析表明Sjp38MAPK序列與曼氏血吸蟲的同源...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 血吸蟲及血吸蟲病概況
    1.2 MAPK信號通路的研究進(jìn)展
        1.2.1 MAPK信號通路概述
        1.2.2 MAPK信號通路在血吸蟲生殖細(xì)胞中的研究進(jìn)展
        1.2.3 p38MAPK研究進(jìn)展
    1.3 RNAi技術(shù)在血吸蟲中的應(yīng)用
第二章 日本血吸蟲Sjp38MAPK克隆、重組蛋白表達(dá)及鑒定
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 生物信息學(xué)分析Sjp38MAPK序列
        2.2.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2.3 表達(dá)、純化和鑒定重組蛋白Sjp38MAPK
    2.3 討論
第三章 Sjp38MAPK在日本血吸蟲中的表達(dá)分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 日本血吸蟲Sjp38MAPK在不同生長發(fā)育時期的表達(dá)
        3.2.2 日本血吸蟲Sjp38MAPK在雌雄蟲中的表達(dá)
    3.3 討論
第四章 日本血吸蟲Sjp38MAPK的體外干擾
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 篩選日本血吸蟲Sjp38MAPK的干擾siRNA
        4.2.2 siRNA-977 干擾日本血吸蟲Sjp38MAPK對其卵殼蛋白的影響
        4.2.3 siRNA-977 干擾日本血吸蟲對蟲體活性的影響
    4.3 討論
第五章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介



本文編號：3835887