奶牛乳房炎是奶牛中最常見(jiàn)也是造成養(yǎng)殖損失最為嚴(yán)重的一種疾病,其中鏈球菌是導(dǎo)致奶牛乳房炎比較常見(jiàn)的一種病原菌,它包括乳房鏈球菌、停乳鏈球菌、無(wú)乳鏈球菌、獸疫鏈球菌和化膿性鏈球菌等在內(nèi)的多種鏈球菌,它們不僅感染乳房腺體,還會(huì)造成奶牛乳腺組織的損傷或破壞,長(zhǎng)期減少產(chǎn)奶量,甚至?xí)斐扇閰^(qū)泌乳功能的喪失,使奶牛提前淘汰,給奶牛養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究為了了解廣西部分地區(qū)奶牛場(chǎng)乳房炎鏈球菌的流行情況,尋找對(duì)鏈球菌敏感的藥物,同時(shí)制備抗鏈球菌多克隆抗體,以期為指導(dǎo)臨床用藥和快速診斷試劑盒及試紙條的研制提供參考而設(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)。 本實(shí)驗(yàn)從廣西6個(gè)規(guī)�；膛�(chǎng)共采集患乳房炎的奶樣75份,通過(guò)傳統(tǒng)的病原微生物學(xué)、革蘭氏染色與鏡檢、PCR以及生化實(shí)驗(yàn)等方法對(duì)乳房炎奶樣中鏈球菌進(jìn)行分離鑒定,并對(duì)感染鏈球菌的乳房炎的發(fā)生情況作了初步統(tǒng)計(jì)分析。隨機(jī)抽取臨床鑒定的鏈球菌菌株14株進(jìn)行小白鼠攻毒實(shí)驗(yàn),以不同濃度鏈球菌分3組分別攻毒14只昆明系小白鼠,另選6只小白鼠注射生理鹽水為對(duì)照組,飼喂3d觀察小白鼠的發(fā)病情況,并進(jìn)行鏈球菌致病力的分析。用大黃、黃連、黃岑、五味子、金銀花等11種中藥進(jìn)行單味藥的藥敏實(shí)驗(yàn),同時(shí)...

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 乳房炎的發(fā)病原因及規(guī)律
        1.2.1 奶牛自身因素
        1.2.3 飼養(yǎng)管理不當(dāng)
        1.2.4 季節(jié)差異
        1.2.5 病原微生物的感染
    1.3 鏈球菌性乳房炎
        1.3.1 環(huán)境鏈球菌性乳房炎
        1.3.2 無(wú)乳鏈球菌性乳房炎
        1.3.3 鏈球菌的流行病學(xué)
        1.3.4 鏈球菌的致病機(jī)理
        1.3.5 鏈球菌性乳房炎的臨床癥狀
    1.4 鏈球菌性乳房炎的治療進(jìn)展
    1.5 鏈球菌多克隆抗體的基本原理
    1.6 本研究的內(nèi)容、目的及意義
第二章 廣西地區(qū)部分奶牛場(chǎng)乳房炎鏈球菌的分離鑒定
    2.1 材料
        2.1.1 乳樣的來(lái)源與采集
        2.1.2 主要培養(yǎng)基與試劑
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 鏈球菌的分離純化
        2.2.2 鏈球菌的生化鑒定
        2.2.3 分子生物學(xué)鑒定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 鏈球菌分離結(jié)果
        2.3.2 鏈球菌的形態(tài)觀察
        2.3.3 鏈球菌在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征
        2.3.4 鏈球菌的生化鑒定結(jié)果
        2.3.5 PCR鑒定結(jié)果
    2.4 討論
        2.4.1 鏈球菌的檢出和感染情況探討
        2.4.2 鏈球菌分離鑒定
    2.5 小結(jié)
第三章 奶牛乳房炎鏈球菌的毒力性及敏感性實(shí)驗(yàn)
    3.1 材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 培養(yǎng)基、藥品及主要試劑
        3.1.4 主要儀器設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 鏈球菌的毒力性實(shí)驗(yàn)
        3.2.2 體外抑菌實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 鏈球菌毒力性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果
        3.3.2 16種奶牛場(chǎng)治療乳房炎藥物的體外抑菌活性測(cè)定結(jié)果
        3.3.3 11種中草藥提取物的MIC/MBC
    3.4 討論
        3.4.1 鏈球菌的毒力與致病力對(duì)動(dòng)物的影響
        3.4.2 鏈球菌的耐藥性與藥敏實(shí)驗(yàn)分析
    3.5 小結(jié)
第四章 乳房炎鏈球菌多克隆抗體的制備
    4.1 材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.3 主要試劑及配制
        4.1.4 主要儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 鏈球菌的抗原制備
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫程序
        4.2.3 間接ELISA檢測(cè)大白兔/大鼠血清中的抗體水平
        4.2.4 靈敏性實(shí)驗(yàn)
        4.2.5 交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 血清抗體的純化
        4.2.7 清抗體蛋白濃度的測(cè)定
        4.2.8 清抗體蛋白的SDS-PAGE電泳
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 鏈球菌抗原的制備結(jié)果
        4.3.2 血清抗體效價(jià)的ELISA檢測(cè)條件優(yōu)化結(jié)果
        4.3.3 大白兔與大鼠間血清的抗體效價(jià)
        4.3.4 鏈球菌多克隆抗體敏感性與交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.5 純化后血清抗體蛋白濃度的測(cè)定結(jié)果
        4.3.6 抗血清SDS-PAGE電泳分析
    4.4 討論
        4.4.1 制備高純度鏈球菌多克隆抗體的主要因素
        4.4.2 抗血清間接ELISA優(yōu)化條件的探討
        4.4.3 多克隆抗體純化的選擇
    4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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附錄



本文編號(hào)：3835138