發(fā)布時(shí)間：2023-06-10 15:46

　　腸球菌是一類球形或卵圓形,呈對(duì)或短鏈存在,廣泛存在于水、土壤等環(huán)境中,是人和動(dòng)物體胃腸道正常菌群之一。腸球菌對(duì)人和動(dòng)物致病主要通過黏附,侵襲以及組織損傷實(shí)現(xiàn)。通過黏附和腸黏膜的上皮細(xì)胞以及胞外基質(zhì)結(jié)合起來,占位定植,進(jìn)而侵入到機(jī)體內(nèi)部,對(duì)宿主發(fā)揮生物屏障功能,最終引發(fā)組織損傷。而在腸球菌的眾多毒力因子中,腸球菌膠原蛋白黏附素ace是腸球菌分泌于菌體表面的一種黏附素,在菌體生物膜形成過程中起重要作用,有良好的黏附活性。本研究通過對(duì)毒力因子Ace的研究,希望能對(duì)腸球菌的致病機(jī)理以及臨床防治糞腸球菌的感染提供理論依據(jù)。根據(jù)GenBank中發(fā)表的腸球菌毒力因子Ace的基因序列,設(shè)計(jì)出一對(duì)ace基因的特異性引物,以糞腸球菌的DNA為模板,PCR擴(kuò)增出1358bp的目的片段,經(jīng)膠回收純化后和載體pTG19-T相連接,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌DH5α中,經(jīng)PCR擴(kuò)增,酶切鑒定,證明成功構(gòu)建出重組載體。對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的從河南省各大豬場(chǎng)分離的43株分離菌以及3株標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行ace基因PCR擴(kuò)增,以檢測(cè)菌株中ace基因的攜帶率及其保守性,結(jié)果顯示,共有30株菌株擴(kuò)出ace基因,攜帶率為71.7%,同時(shí)對(duì)這46株菌進(jìn)行...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
常用縮略詞
文獻(xiàn)綜述
    1. 腸球菌生物學(xué)特性
    2. 腸球菌毒力因子及研究進(jìn)展
    3. 基因敲除技術(shù)及其應(yīng)用
引言
試驗(yàn)一豬源糞腸球菌ace的基因克隆與序列比對(duì)
    1. 材料
    2. 方法
    3. 結(jié)果與分析
    4. 討論
試驗(yàn)二豬源糞腸球菌ace基因缺失突變株的構(gòu)建
    1. 材料
    2. 方法
    3. 結(jié)果與分析
    4. 討論
試驗(yàn)三豬源糞腸球菌ace基因缺失株對(duì)細(xì)菌黏附與生物被膜形成的影響
    1. 材料
    2 方法
    3. 結(jié)果與分析
    4. 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
Abstract
發(fā)表論文



本文編號(hào)：3833142