豬繁殖與呼吸障礙綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)由豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起,以母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎和仔豬呼吸道癥狀為主要特征,對(duì)我國(guó)及世界范圍內(nèi)的養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失。中國(guó)大陸自1996年首次分離到PRRSV后,不斷有新型PRRSV的報(bào)道,經(jīng)過20多年的演化,PRRSV基因多樣性變得十分復(fù)雜。2017年,我國(guó)首次報(bào)道NADC34-like PRRSV,該類毒株在美國(guó)是主要的PRRSV流行毒株,對(duì)美國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的打擊。推測(cè)我國(guó)該類毒株是從美國(guó)輸入的。這將進(jìn)一步增加我國(guó)PRRSV的復(fù)雜性,并對(duì)國(guó)內(nèi)現(xiàn)有PRRSV的防控提出挑戰(zhàn)。為了解我國(guó)NADC34-like PRRSV的流行情況和演化特點(diǎn),本研究在2018～2019年從全國(guó)16個(gè)省、市和自治區(qū)的發(fā)病豬場(chǎng)采集疑似PRRSV陽性樣品650份,共檢測(cè)到6株NADC34-like PRRSV,其中HLJZD22-1812、HLJDZD32...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 PRRSV病原學(xué)
        1.1.1 PRRSV分類
        1.1.2 PRRSV病毒粒子的形態(tài)結(jié)構(gòu)
        1.1.3 PRRSV的理化特性
        1.1.4 PRRSV的基因組結(jié)構(gòu)及編碼的蛋白
        1.1.5 PRRSV基因組的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制
    1.2 PRRSV的流行病學(xué)
        1.2.1 Ⅰ型PRRSV的流行病學(xué)
        1.2.2 Ⅱ型PRRSV的流行病學(xué)
        1.2.3 中國(guó)Ⅱ型PRRSV的流行病學(xué)及致病性
    1.3 PRRSV的重組
    1.4 研究的目的和意義
第二章 NADC34-like PRRSV的流行病學(xué)調(diào)查
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料樣本
        2.1.2 主要試劑、儀器和菌株
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 樣品的處理
        2.2.2 引物的設(shè)計(jì)和合成
        2.2.3 病毒RNA的提取和cDNA的合成
        2.2.4 PCR擴(kuò)增
        2.2.5 PCR產(chǎn)物回收
        2.2.6 目的片段的連接、轉(zhuǎn)化、克隆
        2.2.7 序列分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 2018²019年NADC34-like PRRSV的監(jiān)測(cè)結(jié)果
        2.3.2 全基因組及各基因同源性分析
        2.3.3 遺傳演化分析
        2.3.4 氨基酸推導(dǎo)序列分析
        2.3.5 重組分析
        2.3.6 我國(guó)NADC34-like PRRSV與 NADC30-like PRRSV的相似性分析
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 NADC34-like PRRSV的分離及致病性研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 主要試劑和儀器
        3.1.2 細(xì)胞及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 病毒分離
        3.1.4 間接免疫熒光檢測(cè)
        3.1.5 病毒滴度測(cè)定
        3.1.6 NADC34-like PRRSV HLJDZD32-1901 動(dòng)物試驗(yàn)
        3.1.7 熒光定量PCR
        3.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 間接免疫熒光檢測(cè)結(jié)果
        3.2.2 HLJDZD32-1901 攻毒實(shí)驗(yàn)體溫、抗體水平及平均體重增長(zhǎng)變化分析
        3.2.3 HLJDZD32-1901 攻毒實(shí)驗(yàn)病毒血癥及各組織病毒載量分析
        3.2.4 HLJDZD32-1901 攻毒實(shí)驗(yàn)病理變化分析和免疫組化分析
        3.2.5 HLJDZD32-1901 株與IA/2014/NADC34 株關(guān)鍵區(qū)域氨基酸對(duì)比分析
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3831722