抗菌肽由于其廣譜抗菌活性,不易產(chǎn)生耐藥性等特性而倍受關注,開發(fā)為新型飼料添加劑,已應用于豬、禽等動物,但在反芻動物的應用研究還鮮有報道。本研究運用高通量測序技術與實時熒光定量PCR技術比較分析復合抗菌肽“態(tài)康利保”對山羊瘤胃纖毛蟲群落結構及常見纖毛蟲數(shù)量的影響及其與精料量的關系,為復合抗菌肽“態(tài)康利�！弊鳛轱暳咸砑觿⿷糜诜雌c動物提供理論依據(jù)。試驗選取24只4月齡體重相近(16.17±0.72)kg臨床健康雄性川中黑山羊,隨機分為4組,每組6只。Ⅰ組(正常精料組)飼喂正常量精料300 g·d^-1·goat^-1,Ⅱ組(正常量精料+抗菌肽組)飼喂正常量精料+態(tài)康利保3 g·d^-1·goat^-1,Ⅲ組(雙倍精料組)飼喂精料600 g·d^-1·goat^-1;Ⅳ組(雙倍精料+抗菌肽組)飼喂雙倍精料+態(tài)康利保3g·d^-1·goat^-1,連續(xù)飼喂60 d。于試驗第0 d,20 d和60 d每組隨機選取3只山羊采集瘤胃液樣品50...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
第一章 文獻綜述
    1.1 抗菌肽研究進展
        1.1.1 抗菌肽簡介
        1.1.2 抗菌肽廣譜抗微生物作用
        1.1.3 抗菌肽作為飼料添加劑的研究現(xiàn)狀
        1.1.4 抗菌肽作為飼料添加劑對腸道菌群的影響
    1.2 瘤胃纖毛蟲研究進展
        1.2.1 瘤胃纖毛蟲簡介
        1.2.2 瘤胃纖毛蟲生物學意義
        1.2.3 瘤胃纖毛蟲種群結構研究進展
        1.2.4 分子生物學手段在瘤胃微生物研究中的應用
    1.3 研究目的及意義
第二章 復合抗菌肽對山羊瘤胃纖毛蟲種群結構的影響
    2.1 試驗材料與動物
        2.1.1 試驗藥品
        2.1.2 試驗儀器與試劑
        2.1.3 試驗動物
    2.2 試驗方法
        2.2.1 試驗動物的飼養(yǎng)管理
        2.2.2 試驗動物的分組及處理
        2.2.3 瘤胃液的采集和基因組DNA的提取
        2.2.4 18S rDNA的擴增及MiSeq測序
        2.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2.3 結果
        2.3.1 瘤胃細菌總DNA提取結果
        2.3.2 樣品測序深度
        2.3.3 Alpha多樣性分析
        2.3.4 Beta多樣性分析
        2.3.5 纖毛蟲種群結構分析
    2.4 討論
        2.4.1 多樣性分析
        2.4.2 復合抗菌肽對纖毛蟲種群結構的影響
    2.5 小結
第三章 復合抗菌肽對山羊瘤胃內(nèi)常見纖毛蟲數(shù)量的影響
    3.1 試驗材料與動物
        3.1.1 試驗藥品
        3.1.2 試驗儀器與試劑
        3.1.3 試驗動物
    3.2 試驗方法
        3.2.1 試驗動物的飼養(yǎng)管理
        3.2.2 試驗動物的分組及處理
        3.2.3 瘤胃液的采集和細菌基因組DNA的提取
        3.2.4 測定指標
        3.2.5 引物設計
        3.2.6 目的基因的擴增、鑒定及回收
        3.2.7 標準品的制備
        3.2.8 標準曲線的建立及Real-timePCR擴增
        3.2.9 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結果
        3.3.1 纖毛蟲總數(shù)
        3.3.2 目的基因片段克隆鑒定
        3.3.3 陽性克隆測序結果及相似性分析
        3.3.4 標準曲線的建立
        3.3.5 熒光定量PCR擴増與熔解曲線
        3.3.6 熒光定量結果
    3.4 討論
    3.5 小結
結論
參考文獻
致謝
附錄
    附錄Ⅰ瘤胃液基因組DNA的提取
    附錄Ⅱ PCR產(chǎn)物與載體的連接轉化
作者簡歷



本文編號：3826651