捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)六種酶蛋白體外對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞功能的影響
發(fā)布時(shí)間:2023-05-31 02:24
捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)(Haemonchus contortus)是毛圓科(Trichostrongylidae)血矛屬(Haemonchus)線蟲(chóng),是嚴(yán)重危害牛羊等反芻動(dòng)物的一種重要寄生蟲(chóng),蟲(chóng)體主要寄生于宿主第四胃,偶見(jiàn)于小腸,以吸食宿主血液為營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。目前,捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)病雖然在免疫學(xué)研究上有了重要的進(jìn)展,但至今仍無(wú)商品化的疫苗出現(xiàn),所以發(fā)掘新的抗原、進(jìn)一步研究蟲(chóng)體抗原的特性對(duì)于疫苗的開(kāi)發(fā)尤為重要。本文對(duì)捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase,GDH)、烯醇化酶(enolase,ENO)、磷酸丙糖異構(gòu)酶(triosephosphate isomerase, TPI)及醛縮酶(aldolase, ALD)進(jìn)行了重組表達(dá),進(jìn)而研究這六種重組酶蛋白體外與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合情況;對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞因子表達(dá)和增殖的影響以及對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能和分泌NO的影響。1捻...
【文章頁(yè)數(shù)】:93 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
上篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)及捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)病
1 病原學(xué)
1.1 蟲(chóng)體形態(tài)特征
1.2 生活史
2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)病
2.1 癥狀及病理變化
2.2 流行病學(xué)
2.3 防治措施
參考文獻(xiàn)
第二章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)的免疫機(jī)理及其主要抗原的研究進(jìn)展
1 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)的免疫機(jī)理
1.1 排斥反應(yīng)機(jī)制
1.2 細(xì)胞免疫
1.2.1 肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞
1.2.2 細(xì)胞因子
1.3 體液免疫
1.4 免疫逃避機(jī)制
2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)抗原的研究進(jìn)展
2.1 隱蔽抗原
2.1.1 H11
2.1.2 H45(P1)
2.1.3 H-gal-GP
2.1.4 P 52/46
2.1.5 胱氨酸蛋白酶
2.2 天然抗原
2.2.1 三期幼蟲(chóng)的表面抗原(Hc-sL3)
2.2.2 成蟲(chóng)ES15/24
2.2.3 55kDa secretory glycoprotein(gp55),66 kDa excretory/secretory antigen
參考文獻(xiàn)
第三章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重要酶的研究進(jìn)展
1 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)
2 甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)
3 烯醇化酶(Enolase)
4 磷酸丙糖異構(gòu)酶(Triosephosphate isomerase,TPI)
5 谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase,GDH)
6 醛縮酶(Aldolase,ALD)
參考文獻(xiàn)
下篇試驗(yàn)研究
第四章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH的表達(dá)及其與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組質(zhì)粒和菌種
1.1.3 工具酶與試劑
1.1.4 本試驗(yàn)所配制溶液試劑
1.1.5 主要儀器設(shè)備
1.2 方法
1.2.1 重組蛋白的表達(dá)
1.2.2 重組蛋白與外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
1.2.2.1 抗血清的制備
1.2.2.2 山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離和結(jié)合試驗(yàn)
2 結(jié)果
2.1 重組蛋白的表達(dá)純化
2.2 重組蛋白與外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
第五章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH體外對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)因子表達(dá)的影響
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組蛋白
1.1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配制溶液試劑
1.2 方法
1.2.1 重組蛋白刺激山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞因子的表達(dá)情況
1.2.1.1 山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離
1.2.1.2 細(xì)胞RNA的提取
1.2.1.3 cDNA第一鏈的合成
1.2.1.4 引物的設(shè)計(jì)
1.2.1.5 熒光定量PCR的反應(yīng)體系
2 結(jié)果
2.1 不同重組蛋白刺激后細(xì)胞因子的表達(dá)情況
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
第六章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的增殖作用
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組蛋白
1.1.3 主要試劑與儀器設(shè)備
1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配溶液試劑
1.2 方法
1.2.1 重組蛋白對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的增殖效應(yīng)
2 結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
第七章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH對(duì)山羊巨噬細(xì)胞吞噬和分泌NO功能的影響
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組蛋白
1.1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配制溶液試劑
1.2 方法
1.2.1 山羊巨噬細(xì)胞的分離
1.2.2 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定
1.2.3 巨噬細(xì)胞分泌NO的測(cè)定
2 結(jié)果
2.1 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定
2.2 巨噬細(xì)胞分泌NO的測(cè)定
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
全文總結(jié)
致謝
本文編號(hào):3825501
【文章頁(yè)數(shù)】:93 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
上篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)及捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)病
1 病原學(xué)
1.1 蟲(chóng)體形態(tài)特征
1.2 生活史
2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)病
2.1 癥狀及病理變化
2.2 流行病學(xué)
2.3 防治措施
參考文獻(xiàn)
第二章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)的免疫機(jī)理及其主要抗原的研究進(jìn)展
1 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)的免疫機(jī)理
1.1 排斥反應(yīng)機(jī)制
1.2 細(xì)胞免疫
1.2.1 肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞
1.2.2 細(xì)胞因子
1.3 體液免疫
1.4 免疫逃避機(jī)制
2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)抗原的研究進(jìn)展
2.1 隱蔽抗原
2.1.1 H11
2.1.2 H45(P1)
2.1.3 H-gal-GP
2.1.4 P 52/46
2.1.5 胱氨酸蛋白酶
2.2 天然抗原
2.2.1 三期幼蟲(chóng)的表面抗原(Hc-sL3)
2.2.2 成蟲(chóng)ES15/24
2.2.3 55kDa secretory glycoprotein(gp55),66 kDa excretory/secretory antigen
參考文獻(xiàn)
第三章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重要酶的研究進(jìn)展
1 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)
2 甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)
3 烯醇化酶(Enolase)
4 磷酸丙糖異構(gòu)酶(Triosephosphate isomerase,TPI)
5 谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase,GDH)
6 醛縮酶(Aldolase,ALD)
參考文獻(xiàn)
下篇試驗(yàn)研究
第四章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH的表達(dá)及其與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組質(zhì)粒和菌種
1.1.3 工具酶與試劑
1.1.4 本試驗(yàn)所配制溶液試劑
1.1.5 主要儀器設(shè)備
1.2 方法
1.2.1 重組蛋白的表達(dá)
1.2.2 重組蛋白與外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
1.2.2.1 抗血清的制備
1.2.2.2 山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離和結(jié)合試驗(yàn)
2 結(jié)果
2.1 重組蛋白的表達(dá)純化
2.2 重組蛋白與外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
第五章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH體外對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)因子表達(dá)的影響
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組蛋白
1.1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配制溶液試劑
1.2 方法
1.2.1 重組蛋白刺激山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞因子的表達(dá)情況
1.2.1.1 山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離
1.2.1.2 細(xì)胞RNA的提取
1.2.1.3 cDNA第一鏈的合成
1.2.1.4 引物的設(shè)計(jì)
1.2.1.5 熒光定量PCR的反應(yīng)體系
2 結(jié)果
2.1 不同重組蛋白刺激后細(xì)胞因子的表達(dá)情況
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
第六章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的增殖作用
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組蛋白
1.1.3 主要試劑與儀器設(shè)備
1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配溶液試劑
1.2 方法
1.2.1 重組蛋白對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的增殖效應(yīng)
2 結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT
第七章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH對(duì)山羊巨噬細(xì)胞吞噬和分泌NO功能的影響
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 重組蛋白
1.1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配制溶液試劑
1.2 方法
1.2.1 山羊巨噬細(xì)胞的分離
1.2.2 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定
1.2.3 巨噬細(xì)胞分泌NO的測(cè)定
2 結(jié)果
2.1 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定
2.2 巨噬細(xì)胞分泌NO的測(cè)定
3 討論
參考文獻(xiàn)
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全文總結(jié)
致謝
本文編號(hào):3825501
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