本研究的目的是通過對冷凍保護劑、冷凍程序以及評價方法的研究來改進豬精液冷凍保存效果。 手握式采集豬精液,對精液進行預(yù)處理,之后利用兩步法離心稀釋,對精液進行降溫和平衡,分裝冷凍。對凍后豬精子的活力、頂體完整率、質(zhì)膜完整率、質(zhì)膜完整率及核DNA完整率的檢測,從而反饋冷凍保存效果。 單細胞凝膠電泳試驗法和吖啶橙染色法對豬精子DNA完整性結(jié)果進行對比及相關(guān)性分析,顯示兩者存在良好的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)為R=0.992,結(jié)果極顯著(P<0.01)。在不同冷凍速率A.B.C.D.E(61.9℃/min.45.5℃/min.32.2℃/min.24.9℃/min.14.1℃/min)對豬精液冷凍保存效果的研究中,D組冷凍速率,精子平均活力達到了44.63%,但隨著冷凍速率的降低,D組精子凍后活力雖高于E組,但兩者之間差異不顯著(P>0.05)；D組冷凍速率下的豬精子凍后平均質(zhì)膜完整性顯著高于其他四組(P<0.05),達到了55.45%；隨著冷凍速率的降低,頂體完整性逐漸升高,D組顯著高于A、B、C組(P<0.05),但低于E組水平,兩者之間差異不顯著(P>0.05)；D組...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1 豬精液冷凍保存技術(shù)的概述
    2 豬精液冷凍保存效果的影響因素
        2.1 冷凍保護劑
            2.1.1 滲透性冷凍保護劑
            2.1.2 非滲透性冷凍保護劑
        2.2 冷凍方法
            2.2.1 冷凍降溫
            2.2.2 冷凍復(fù)溫
        2.3 凍精解凍后質(zhì)量評價方法
            2.3.1 精子功能檢查
            2.3.2 精子頂體的檢查方法
            2.3.3 精子膜的完整性的檢查
            2.3.4 精子DNA完整性的檢查方法
    3 展望
第二章 冷凍保護劑、冷凍方法及精子DNA檢測方法改進效果觀察
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 主要材料
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 儀器與設(shè)備
            2.1.4 溶液配制
        2.2 方法
        2.3 試驗設(shè)計
        2.4 統(tǒng)計分析
    3 試驗結(jié)果
        3.1 不同DNA完整性檢測方法的相關(guān)性研究
        3.2 不同冷凍速率對于豬精子冷凍保存效果的影響
            3.2.1 不同冷凍速率對甘油為冷凍保護劑時豬凍后精子質(zhì)量的影響
            3.2.2 不同冷凍速率對乙二醇為冷凍保護劑時豬凍后精子質(zhì)量的影響
            3.2.3 不同冷凍速率對DMA為冷凍保護劑時豬凍后精子質(zhì)量的影響
        3.3 不同濃度的乙二醇對豬精液冷凍保存的影響
        3.4 不同滲透性冷凍保護劑對豬精子凍后質(zhì)量的影響
        3.5 不同禽類卵黃對豬精液冷凍保存效果的影響
        3.6 不同濃度海藻糖對豬精子冷凍保存的影響
    4 分析與討論
        4.1 單細胞凝膠電泳法與n丫卩定橙染色法檢測豬精子DNA完整性的比較分析
        4.2 不同冷凍速率對豬精子冷凍保存的影響
        4.3 不同濃度乙二醇對豬精液冷凍保存的影響
        4.4 不同滲透性冷凍保護劑對豬精液冷凍保存的影響
        4.5 不同禽類卵黃對豬精子冷凍保存的影響
        4.6 不同濃度海藻糖對豬精子冷凍保存的影響
    5 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
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本文編號：3807381