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禽源念珠菌分子分型及其致病性研究

發(fā)布時(shí)間:2023-04-02 23:12
  本研究從冀南地區(qū)臨床癥狀疑似念珠菌病的禽體采集樣本235份,按常規(guī)方法進(jìn)行病原分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)學(xué)觀察及菌體光鏡檢查等分離出153個(gè)疑似菌株,結(jié)合rDNA-ITS間隔序列分析鑒定得到念珠菌125株,其中白色念珠菌72株,光滑念珠菌43株,熱帶念珠菌10株,其余28株為非念珠菌酵母狀真菌。通過引物設(shè)計(jì)和對不同念珠菌分離株培養(yǎng)物的檢測,成功篩選出針對白色念珠菌、光滑念珠菌和熱帶念珠菌的種特異引物和它們的共用引物,建立了可用于目標(biāo)念珠菌種快速檢測和診斷的熒光定量PCR技術(shù),敏感性高于常規(guī)PCR技術(shù)100倍以上。為深入調(diào)查和分析致病性念珠菌的流行特征,本研究采用多位點(diǎn)序列分型(MLST)和ABC分型方法對白色念珠菌分離菌株進(jìn)行分子分型。結(jié)果顯示,72個(gè)白色念珠菌分離菌株經(jīng)MLST分為48個(gè)新序列型,構(gòu)成5個(gè)獨(dú)立的groups和10個(gè)singletons;經(jīng)ABC分型得到A型菌株34個(gè),B型菌株15個(gè),C型菌株23個(gè);經(jīng)卡方獨(dú)立性檢驗(yàn),分離菌株的MLST和ABC分型之間及其與菌株的地區(qū)來源和宿主種類來源都具有顯著相關(guān)性。為了探究不同來源和序列型的白色念珠菌菌株對雞的致病性和毒力的差異,本研究以禽...

【文章頁數(shù)】:110 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 綜述
    1.1 前言
    1.2 禽類念珠菌病概述
    1.3 念珠菌分子分型
    1.4 念珠菌致病機(jī)制
    1.5 本研究的目的意義
第二章 禽源念珠菌的分離與鑒定
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 定量PCR快速鑒別念珠菌種方法的建立
    3.1 前言
    3.2 材料
    3.3 方法
    3.4 結(jié)果與分析
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第四章 禽源白色念珠菌多位點(diǎn)序列分型與分析
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
    4.3 結(jié)果與分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 禽源白色念珠菌不同序列型菌株對雞的致病性試驗(yàn)
    5.1 前言
    5.2 材料
    5.3 方法
    5.4 結(jié)果與分析
    5.5 討論
    5.6 小結(jié)
第六章 禽源白色念珠菌Sap和PL活性和對小鼠致病性試驗(yàn)
    6.1 前言
    6.2 材料
    6.3 方法
    6.4 結(jié)果與分析
    6.5 討論
    6.6 小結(jié)
第七章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    7.1 結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號:3780156

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