不同月齡烏珠穆沁羊骨骼肌中Myostatin表達(dá)量變化規(guī)律分析
發(fā)布時(shí)間:2023-04-02 09:43
肌肉生長(zhǎng)抑制素(Myostatin,簡(jiǎn)稱(chēng)MSTN)是動(dòng)物肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的主要負(fù)調(diào)控因子,在脊椎動(dòng)物中有較高的同源性。MSTN是通過(guò)抑制成肌細(xì)胞生長(zhǎng)分化周期而影響肌肉生長(zhǎng),它的功能缺失因加速成肌細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化而導(dǎo)致骨骼肌異常發(fā)達(dá)。MSTN在同一個(gè)體不同部位骨骼肌中的表達(dá)量不完全相同,是一種差異表達(dá)基因。 本研究以自然放牧條件下飼養(yǎng)的不同月齡烏珠穆沁羊?yàn)檠芯繉?duì)象,分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和酶聯(lián)免疫分析技術(shù)測(cè)定1、3、6、9、12和18月齡烏珠穆沁羊股二頭肌和背最長(zhǎng)肌MSTN基因相對(duì)表達(dá)水平和蛋白表達(dá)量。 股二頭肌MSTN基因相對(duì)表達(dá)水平為6月齡>3月齡>9月齡>1月齡>12月齡>18月齡,6月齡的基因表達(dá)量最高,與其他月齡之間相比有顯著差異(P<0.05)。1、3、9和12月齡之間基因表達(dá)量無(wú)顯著差異(P>0.05)。背最長(zhǎng)肌MSTN基因相對(duì)表達(dá)水平為6月齡>1月齡>12月齡>3月齡>18月齡>9月齡,6月齡時(shí)最高,9月齡時(shí)最低。6月齡與1和12月齡之間差異顯著(P<0.05),1月齡和12月齡與9月齡之間...
【文章頁(yè)數(shù)】:37 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 引言
1.1 肌肉生長(zhǎng)抑制素的概述
1.2 MSTN 研究進(jìn)展
1.3 MSTN 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及同源性
1.3.1 基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
1.3.2 MSTN 同源性
1.4 MSTN 信號(hào)通路
1.5 MSTN 作用機(jī)制
1.6 MSTN 的表達(dá)及調(diào)控
1.6.1 組織表達(dá)
1.6.2 表達(dá)量變化
1.6.3 MSTN 正向調(diào)控
1.6.4 MSTN 負(fù)向調(diào)控
1.7 MSTN 對(duì)其它組織的影響
1.7.1 MSTN 對(duì)骨骼生長(zhǎng)的影響
1.7.2 MSTN 對(duì)肌腱的影響
1.7.3 MSTN 對(duì)脂肪組織的影響
1.7.4 MSTN 對(duì)糖代謝的影響
1.8 外界條件對(duì) MSTN 表達(dá)量的影響
1.9 對(duì) MSTN 的抑制
1.10 烏珠穆沁羊簡(jiǎn)介
1.11 MSTN 的研究意義
1.12 研究?jī)?nèi)容和立題的意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要試劑與儀器
2.1.3 主要溶液
2.1.4 器皿處理
2.2 MSTN 基因表達(dá)量測(cè)定方法
2.2.1 烏珠穆沁羊骨骼肌總 RNA 提取及第一鏈 CDNA 合成
2.2.2 引物設(shè)計(jì)及合成
2.2.3 PCR 條件優(yōu)化
2.2.4 內(nèi)參基因的驗(yàn)證
2.2.5 數(shù)據(jù)分析
2.3 MSTN 蛋白表達(dá)量測(cè)定方法
2.3.1 樣品預(yù)處理
2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
3 結(jié)果與分析
3.1 MSTN 基因 MRNA 表達(dá)水平試驗(yàn)結(jié)果與分析
3.1.1 總 RNA 濃度和純度及質(zhì)量檢測(cè)
3.1.2 RNA 的質(zhì)量評(píng)定
3.1.3 驗(yàn)證 PCR 產(chǎn)物
3.1.4 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
3.1.5 不同月齡骨骼肌中 MSTN 基因 MRNA 表達(dá)水平
3.2 MSTN 蛋白表達(dá)量差異分析結(jié)果
3.2.1 用酶標(biāo)儀檢測(cè)各組樣品吸光值
3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線分析
3.2.3 不同月齡骨骼肌中 MSTN 蛋白表達(dá)量檢測(cè)結(jié)果與分析
4 討論
4.1 隨著月齡的增長(zhǎng) MSTN 基因表達(dá)水平變化規(guī)律分析
4.2 隨著月齡的增長(zhǎng) MSTN 蛋白表達(dá)量變化規(guī)律分析
4.3 MSTN 蛋白表達(dá)量與運(yùn)動(dòng)
5 結(jié)論
5.1 總體結(jié)論
5.1.1 不同月齡烏珠穆沁羊骨骼肌中 MSTN 基因 MRNA 表達(dá)水平變化規(guī)律
5.1.2 不同月齡烏珠穆沁羊骨骼肌中 MSTN 蛋白表達(dá)量變化規(guī)律
5.1.3 相同月齡烏珠穆沁羊的不同部位骨骼肌中 MSTN 蛋白含量比較
5.2 本論文創(chuàng)新之處
6 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3779001
【文章頁(yè)數(shù)】:37 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 引言
1.1 肌肉生長(zhǎng)抑制素的概述
1.2 MSTN 研究進(jìn)展
1.3 MSTN 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及同源性
1.3.1 基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
1.3.2 MSTN 同源性
1.4 MSTN 信號(hào)通路
1.5 MSTN 作用機(jī)制
1.6 MSTN 的表達(dá)及調(diào)控
1.6.1 組織表達(dá)
1.6.2 表達(dá)量變化
1.6.3 MSTN 正向調(diào)控
1.6.4 MSTN 負(fù)向調(diào)控
1.7 MSTN 對(duì)其它組織的影響
1.7.1 MSTN 對(duì)骨骼生長(zhǎng)的影響
1.7.2 MSTN 對(duì)肌腱的影響
1.7.3 MSTN 對(duì)脂肪組織的影響
1.7.4 MSTN 對(duì)糖代謝的影響
1.8 外界條件對(duì) MSTN 表達(dá)量的影響
1.9 對(duì) MSTN 的抑制
1.10 烏珠穆沁羊簡(jiǎn)介
1.11 MSTN 的研究意義
1.12 研究?jī)?nèi)容和立題的意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要試劑與儀器
2.1.3 主要溶液
2.1.4 器皿處理
2.2 MSTN 基因表達(dá)量測(cè)定方法
2.2.1 烏珠穆沁羊骨骼肌總 RNA 提取及第一鏈 CDNA 合成
2.2.2 引物設(shè)計(jì)及合成
2.2.3 PCR 條件優(yōu)化
2.2.4 內(nèi)參基因的驗(yàn)證
2.2.5 數(shù)據(jù)分析
2.3 MSTN 蛋白表達(dá)量測(cè)定方法
2.3.1 樣品預(yù)處理
2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
3 結(jié)果與分析
3.1 MSTN 基因 MRNA 表達(dá)水平試驗(yàn)結(jié)果與分析
3.1.1 總 RNA 濃度和純度及質(zhì)量檢測(cè)
3.1.2 RNA 的質(zhì)量評(píng)定
3.1.3 驗(yàn)證 PCR 產(chǎn)物
3.1.4 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
3.1.5 不同月齡骨骼肌中 MSTN 基因 MRNA 表達(dá)水平
3.2 MSTN 蛋白表達(dá)量差異分析結(jié)果
3.2.1 用酶標(biāo)儀檢測(cè)各組樣品吸光值
3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線分析
3.2.3 不同月齡骨骼肌中 MSTN 蛋白表達(dá)量檢測(cè)結(jié)果與分析
4 討論
4.1 隨著月齡的增長(zhǎng) MSTN 基因表達(dá)水平變化規(guī)律分析
4.2 隨著月齡的增長(zhǎng) MSTN 蛋白表達(dá)量變化規(guī)律分析
4.3 MSTN 蛋白表達(dá)量與運(yùn)動(dòng)
5 結(jié)論
5.1 總體結(jié)論
5.1.1 不同月齡烏珠穆沁羊骨骼肌中 MSTN 基因 MRNA 表達(dá)水平變化規(guī)律
5.1.2 不同月齡烏珠穆沁羊骨骼肌中 MSTN 蛋白表達(dá)量變化規(guī)律
5.1.3 相同月齡烏珠穆沁羊的不同部位骨骼肌中 MSTN 蛋白含量比較
5.2 本論文創(chuàng)新之處
6 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3779001
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