為研究細(xì)胞自噬現(xiàn)象在綿羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用,本試驗(yàn)以自然感染OPA的羔羊肺組織為材料,以健康羔羊肺組織為對(duì)照組,利用免疫組織化學(xué)(IHC)染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)和Western blot等方法綜合檢測(cè)了自噬基因MAP1LC3B、BECN1、SQSTM1及其對(duì)應(yīng)的自噬蛋白LC3、Beclin1、P62的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:在對(duì)照組中,LC3、Beclin1、P62主要表達(dá)于細(xì)支氣管上皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞中;在OPA肺組織中,LC3、Beclin1、P62主要表達(dá)于腫瘤化增生的細(xì)支氣管上皮細(xì)胞、增生的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞和浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞中。與對(duì)照組相比,OPA肺組織中MAP1LC3B基因表達(dá)量極顯著升高(P<0.01),BECN1基因表達(dá)量顯著升高(P<0.05),而SQSTM1基因表達(dá)量則極顯著降低(P<0.01)。在蛋白水平上,OPA肺組織中LC3和Beclin1表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而P62表達(dá)量則極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。結(jié)果表明自然感染...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 主要試劑
    1.3 健康及自然感染OPA的羔羊肺組織的鑒定
        1.3.1 JSRV-env目的基因檢測(cè)
        1.3.2 組織切片制備
        1.3.3 IHC染色切片制備
    1.4 自噬因子IHC染色切片制備
    1.5 自噬基因qPCR檢測(cè)
    1.6 自噬蛋白Western blot檢測(cè)
    1.7 統(tǒng)計(jì)與分析
2 結(jié)果
    2.1 JSRV-env目的基因檢測(cè)結(jié)果
    2.2 組織切片觀察
    2.3 IHC染色切片觀察
    2.4 自噬因子IHC染色切片觀察
    2.5 自噬基因相對(duì)表達(dá)量
    2.6 自噬蛋白相對(duì)表達(dá)量
3 討論



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