為研究細胞自噬現(xiàn)象在綿羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)發(fā)生發(fā)展過程中的作用,本試驗以自然感染OPA的羔羊肺組織為材料,以健康羔羊肺組織為對照組,利用免疫組織化學(IHC)染色、實時熒光定量PCR(qPCR)和Western blot等方法綜合檢測了自噬基因MAP1LC3B、BECN1、SQSTM1及其對應的自噬蛋白LC3、Beclin1、P62的表達情況。結果顯示:在對照組中,LC3、Beclin1、P62主要表達于細支氣管上皮細胞和肺泡上皮細胞中;在OPA肺組織中,LC3、Beclin1、P62主要表達于腫瘤化增生的細支氣管上皮細胞、增生的Ⅱ型肺泡上皮細胞和浸潤的巨噬細胞中。與對照組相比,OPA肺組織中MAP1LC3B基因表達量極顯著升高(P<0.01),BECN1基因表達量顯著升高(P<0.05),而SQSTM1基因表達量則極顯著降低(P<0.01)。在蛋白水平上,OPA肺組織中LC3和Beclin1表達量均顯著高于對照組(P<0.05),而P62表達量則極顯著低于對照組(P<0.01)。結果表明自然感染...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 主要試劑
    1.3 健康及自然感染OPA的羔羊肺組織的鑒定
        1.3.1 JSRV-env目的基因檢測
        1.3.2 組織切片制備
        1.3.3 IHC染色切片制備
    1.4 自噬因子IHC染色切片制備
    1.5 自噬基因qPCR檢測
    1.6 自噬蛋白Western blot檢測
    1.7 統(tǒng)計與分析
2 結果
    2.1 JSRV-env目的基因檢測結果
    2.2 組織切片觀察
    2.3 IHC染色切片觀察
    2.4 自噬因子IHC染色切片觀察
    2.5 自噬基因相對表達量
    2.6 自噬蛋白相對表達量
3 討論



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