為了建立動物血清中的小反芻獸疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗體化學發(fā)光免疫分析檢測方法,采用PPRV N融合蛋白與相應單克隆抗體對化學發(fā)光抗體檢測方法進行了研究。結果顯示:建立的檢測方法能夠特異性地定量檢測羊血清中的PPRV N蛋白抗體,敏感性高,特異性強,對其他相關的動物病原無交叉反應,組內(nèi)與組間變異系數(shù)分別低于10%和15%,具有良好的重復性;對該方法的特異性指標、敏感性指標進行了驗證,與法國IDVET公司的PPRV抗體檢測試劑盒進行比較,陽性樣品符合率為95.02%,陰性樣品符合率為82.08%,總符合率為90.33%。結果表明:建立的PPRV抗體化學發(fā)光免疫分析檢測方法,特異性高、敏感性強,操作簡單、快速,具有較高的應用推廣價值。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 PPRV單克隆抗體的制備及純化
        1.2.1 雜交瘤細胞繁殖
        1.2.2 小鼠腹水制備
        1.2.3 單克隆抗體的純化
        1.2.4 單克隆抗體HRP標記
        1.2.5 酶結合物的制備
    1.3 樣本采集及處理
    1.4 化學發(fā)光檢測步驟
    1.5 試驗成立條件與結果判定
    1.6 質(zhì)控血清的檢測
    1.7 交叉試驗
    1.8 最低檢出量試驗
    1.9 重復性試驗
    1.10 符合性試驗
    1.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
2 結果與分析
    2.1 PPRV單克隆抗體的制備與純化分析
    2.2 質(zhì)控血清檢測
    2.3 交叉試驗
    2.4 最低檢出量試驗
    2.5 重復性試驗
    2.6 符合性試驗
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