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低氧/低硒對(duì)肉雞肺臟內(nèi)皮素-1和其受體基因表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2023-02-13 20:06
  肺動(dòng)脈高壓(Pulmonary hypertension, PH)及伴隨而來的肺血管重構(gòu)(Pulmonary vascular remolding, PVR)和腹水(Ascites, As)是商品化肉雞生產(chǎn)中常見的營(yíng)養(yǎng)代謝病。目前認(rèn)為缺氧性PH是肉雞As病理機(jī)制的中心環(huán)節(jié)。各種導(dǎo)致機(jī)體缺氧的因素使機(jī)體處于氧饑餓狀態(tài),促使心臟輸出量上升,心臟和肺臟功能隨之增強(qiáng),肺動(dòng)脈壓升高。肺動(dòng)脈壓升高首先引起右心功能出現(xiàn)機(jī)能性代償,持續(xù)的PH引起心肺系統(tǒng)機(jī)能代償和結(jié)構(gòu)代償并存,進(jìn)一步發(fā)展導(dǎo)致兩種代償相繼失調(diào),出現(xiàn)右心肥大衰竭和以肺小動(dòng)脈平滑肌中膜增厚、管腔變窄及非肌型動(dòng)脈肌化為特征的PVR,致使肺動(dòng)脈痙攣、肺循環(huán)壓力升高、肺血管的順應(yīng)性降低,最終導(dǎo)致As的發(fā)生。 內(nèi)皮素-1(Endothelin-1, ET-1)是一種具有多種生物活性的多肽,為目前已知的動(dòng)物機(jī)體內(nèi)生物學(xué)活性最強(qiáng)、作用時(shí)間最長(zhǎng)的血管收縮物質(zhì),其擁有強(qiáng)大的收縮血管及誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞分裂增殖的活性,在心血管和呼呼系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中起到重要作用。ET-1生物學(xué)功能的發(fā)揮是通過與其受體A (ETA)和受體B (ETB)結(jié)合來實(shí)現(xiàn)的。在肺...

【文章頁(yè)數(shù)】:155 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
目錄
摘要
Abstract
縮略詞表(Abbreviation)
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 內(nèi)皮素-1和其受體概述
        引言
        1 ET化學(xué)結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)分類
            1.1 ET化學(xué)組成及分類
            1.2 ET晶體結(jié)構(gòu)特征
            1.3 ET在機(jī)體內(nèi)的分布
            1.4 ET的生物合成及釋放
                1.4.1 ET生物合成
                1.4.2 ET生物合成后的釋放
                1.4.3 影響ET生物合成及釋放的因素
            1.5 ET在機(jī)體內(nèi)的代謝
            1.6 ET的生理學(xué)作用
                1.6.1 ET對(duì)心血管系統(tǒng)的調(diào)節(jié)
                1.6.2 ET對(duì)腎臟功能的影響
                1.6.3 ET對(duì)細(xì)胞有絲分裂的作用
                1.6.4 ET對(duì)神經(jīng)調(diào)節(jié)和內(nèi)分泌的影響
            1.7 ET的病理學(xué)意義
                1.7.1 ET與心血管疾病的聯(lián)系
                1.7.2 ET與高血壓的聯(lián)系
                1.7.3 ET與高血糖、高血脂的聯(lián)系
                1.7.4 ET與腫瘤的聯(lián)系
            1.8 ET轉(zhuǎn)換酶和其抑制劑
        2 ET受體和其生物學(xué)作用
            2.1 ET受體(ETR)分布
            2.2 ETR類別
            2.3 ETR生物學(xué)功能
            2.4 ETR與ET結(jié)合后生物學(xué)作用機(jī)理
            2.5 影響ETR表達(dá)變化的因素
            2.6 ETR在機(jī)體內(nèi)的生物調(diào)控和反饋機(jī)制
            2.7 ETR拮抗劑及其治療作用
    第二章 肉雞肺動(dòng)脈高壓病理學(xué)綜述
        引言
        1 低氧性PH病因?qū)W
            1.1 PVR
            1.2 心輸出量增加
            1.3 心臟、肺臟器質(zhì)性或功能性缺損
            1.4 低氧性外周阻力血管舒張
        2 ET-1與肉雞低氧性PH、右心肥大衰竭的病理聯(lián)系
            2.1 ET-1與肉雞低氧性PH的病理聯(lián)系
            2.2 ET與肉雞右心肥大衰竭的病理聯(lián)系
第二部分 試驗(yàn)研究
    第三章 高原低氧對(duì)肉雞PH及其肺臟ET-1、ETA和ETB表達(dá)的影響
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料與方法
            2.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組處理
            2.2 主要試劑與儀器設(shè)備
                2.2.1 試劑
                2.2.2 儀器設(shè)備
            2.3 試驗(yàn)方法
                2.3.1 肉雞生長(zhǎng)性能的觀察
                2.3.2 肉雞心臟指數(shù)的測(cè)定及As的判定
                2.3.3 肉雞肺臟的取材與保存
                2.3.4 肺組織總RNA提取及cDNA合成
                2.3.5 肺臟ET-1、ETA和ETB基因表達(dá)水平實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)分析
                2.3.6 肺臟ET-1、ETA和ETB蛋白表達(dá)水平Western Blot分析
            2.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.1 高原低氧對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能及As發(fā)病率的影響
            3.2 肉雞As病理觀察
            3.3 肉雞As肺臟病理切片觀察
            3.4 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ET-1、ETA和ETB mRNA表達(dá)水平的影響
                3.4.1 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ET-1 mRNA表達(dá)水平的影響
                3.4.2 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ETA mRNA表達(dá)水平的影響
                3.4.3 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ETB mRNA表達(dá)水平的影響
            3.5 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ET-1、ETA和ETB蛋白表達(dá)水平的影響
                3.5.1 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ET-1蛋白表達(dá)水平的影響
                3.5.2 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ETA蛋白表達(dá)水平的影響
                3.5.3 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ETB蛋白表達(dá)水平的影響
        4 討論
            4.1 高原低氧環(huán)境下肉雞生長(zhǎng)性能及As發(fā)病率觀察
            4.2 高原低氧對(duì)肉雞肺臟ET-1、ETA和ETB基因表達(dá)水平的影響
    第四章 肉雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料與方法
            2.1 生物材料
            2.2 試劑藥品
            2.3 主要儀器與設(shè)備
            2.4 PASMCs原代細(xì)胞分離培養(yǎng)
            2.5 α-SMA免疫組化鑒定
        3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.1 培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
            3.2 培養(yǎng)細(xì)胞α-SMA免疫組化鑒定
        4 討論
    第五章 肉雞肺臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料與方法
            2.1 生物材料
            2.2 試劑藥品
            2.3 主要儀器與設(shè)備
            2.4 PMVECs原代細(xì)胞分離培養(yǎng)
                2.4.1 培養(yǎng)板的準(zhǔn)備
                2.4.2 內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)
                2.4.3 培養(yǎng)細(xì)胞的鑒定
        3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.1 培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
            3.2 培養(yǎng)細(xì)胞HE染色觀察
            3.3 FITC-BSI反應(yīng)
            3.4 CD31免疫熒光染色
            3.5 Ⅷ因子相關(guān)抗原反應(yīng)結(jié)果
        4 討論
    第六章 低氧處理對(duì)肉雞PASMCs ET-1、ETA和ETB基因表達(dá)的影響
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料與方法
            2.1 生物材料
            2.2 試劑藥品
            2.3 主要儀器與設(shè)備
            2.4 試驗(yàn)方法
                2.4.1 PASMCs原代細(xì)胞分離培養(yǎng)及低氧處理
                2.4.2 低氧處理PASMCs總RNA的提取及cDNA的合成
                2.4.3 低氧處理PASMCs ET-1、ETA和ETB mRNA表達(dá)水平qRT-PCR分析
                2.4.4 低氧處理PASMCs ET-1、ETA和ETB蛋白表達(dá)水平Western Blot分析
            2.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.1 低氧處理對(duì)肉雞PASMCs ET-1基因表達(dá)的影響
            3.2 低氧處理對(duì)肉雞PASMCs ETA基因表達(dá)的影響
            3.3 低氧處理對(duì)肉雞PASMCs ETB基因表達(dá)的影響
        4 討論
    第七章 紅景天苷對(duì)低氧處理的肉雞PASMCs ET-1、ETA和ETB基因表達(dá)的影響
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料與方法
            2.1 生物材料
            2.2 試劑藥品
            2.3 主要儀器與設(shè)備
            2.4 試驗(yàn)方法
                2.4.1 PASMCs原代細(xì)胞分離培養(yǎng)及低氧和(或)SDS處理
                2.4.2 肉雞PASMCs總RNA的提取及cDNA的合成
                2.4.3 SDS對(duì)低氧處理PASMCs ET-1、ETA和ETB mRNA表達(dá)水平的影響
                2.4.4 SDS對(duì)低氧處理PASMCs ET-1、ETA和ETB蛋白表達(dá)水平的影響
            2.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.1 SDS對(duì)低氧處理的肉雞PASMCs ET-1基因表達(dá)的影響
            3.2 SDS對(duì)低氧處理的肉雞PASMCs ETA基因表達(dá)的影響
            3.3 SDS對(duì)低氧處理的肉雞PASMCs ETB基因表達(dá)的影響
        4 討論
        小結(jié)
    第八章 硒處理對(duì)肉雞PMVECs ET-1、ETA和ETB基因表達(dá)的影響
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料與方法
            2.1 生物材料
            2.2 試劑藥品
            2.3 主要儀器與設(shè)備
            2.4 試驗(yàn)方法
                2.4.1 硒添加和硒缺乏PMVECs模型的準(zhǔn)備
                2.4.2 硒處理PMVECs總RNA的提取及cDNA的合成
                2.4.3 硒處理PMVECs ET-1、ETA和ETB mRNA表達(dá)水平qRT-PCR分析
            2.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.1 硒處理對(duì)肉雞PMVECs ET-1 mRNA表達(dá)的影響
            3.2 硒處理對(duì)肉雞PMVECs ETA mRNA表達(dá)的影響
            3.3 硒處理對(duì)肉雞PMVECs ETB mRNA表達(dá)的影響
        4 討論
        小結(jié)
    第九章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號(hào):3742222

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