本文主要研究雄激素受體(AR)基因在綿羊各組織中的表達(dá)特性及在睪丸、附睪中的定位。以4月齡杜寒雜種公羊(杜泊×小尾寒羊)為研究對象,研究AR在不同組織中的表達(dá)特性及在睪丸、附睪中的定位；以2月齡、4月齡、6月齡、12月齡杜寒雜種公羊?yàn)樵囼?yàn)對象,研究AR在睪丸及附睪中的表達(dá)特性。應(yīng)用RT-PCR法檢測心臟、肝臟、脾臟、大腦、睪丸、附睪等17個組織中AR mRNA表達(dá)特性,采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對4月齡公羔睪丸和附睪中的AR進(jìn)行定位,Western Blotting技術(shù)對AR蛋白進(jìn)行分析。主要研究結(jié)果如下： 1.克隆了AR的部分序列,使用NCBI GenBank對測序結(jié)果進(jìn)行BLAST分析,結(jié)果顯示試驗(yàn)所得序列與已登陸的綿羊AR基因序列(NC019484)比對,相似性達(dá)100%,表明該序列即為杜寒雜種羊AR基因的部分序列,可進(jìn)行下一步的Real-time PCR分析。 2.AR在4月齡的綿羊各組織中廣泛表達(dá),AR mRNA在雜種綿羊不同組織中表達(dá)量由高到低依次為：睪丸>心>腹肌>附睪體>大腦>小腸>后軀>背最長肌>脾>附睪頭>腎&g...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 雄激素及其受體概述
        1.1 雄激素概述
        1.2 雄激素受體(AR)概述
    2 雄激素受體的研究進(jìn)展
        2.1 AR的作用機(jī)制
        2.2 不同動物組織中AR的表達(dá)
    3 論文的選題意義
第二章 4月齡綿羊不同組織中AR mRNA及AR蛋白的表達(dá)
    1 試驗(yàn)與方法
        1.1 試驗(yàn)動物及組織
        1.2 主要儀器與試劑
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 不同組織中總RNA的提取與檢測
        2.2 cDNA合成
        2.3 引物設(shè)計(jì)合成與檢測
        2.4 克隆與測序
        2.5 相對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.6 Western-blotting檢測
    3 結(jié)果與分析
        3.1 AR測序結(jié)果
        3.2 常規(guī)RT-PCR檢測
        3.3 總RNA提取及定量標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        3.4 不同組織中AR mRNA的表達(dá)
        3.5 不同組織中AR蛋白的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
第三章 不同月齡綿羊睪丸及附睪中AR的表達(dá)及定位
    1 試驗(yàn)材料與方法
        1.1 試驗(yàn)動物及其組織
        1.2 主要儀器與試劑
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 總RNA的提取及cDNA第一鏈的合成
        2.2 引物的設(shè)計(jì)與合成
        2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.4 AR Real-time PCR反應(yīng)
        2.5 睪丸及附睪免疫組織化學(xué)法
        2.6 圖像分析與數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果與分析
        3.1 綿羊睪丸及附睪中AR的表達(dá)
        3.2 4 月齡綿羊睪丸及附睪中AR的表達(dá)定位
    4 討論
        4.1 不同月齡綿羊睪丸及附睪的表達(dá)
        4.2 4 月齡綿羊睪丸及附睪中AR定位分析
    5 結(jié)論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
碩士在讀期間發(fā)表論文
Abstract
致謝



本文編號：3740638