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家犬嗅覺受體基因的空間表達(dá)差異及進(jìn)化分析

發(fā)布時(shí)間:2023-02-10 16:27
  1991年,Linda和Richard首次在褐家鼠中發(fā)現(xiàn)了嗅覺受體(olfactory receptor)超基因家族,并因此獲得了2004年的諾貝爾生理學(xué)獎(jiǎng)。在近20多年的時(shí)間里,科學(xué)家們?cè)谄渌麆?dòng)物中也發(fā)現(xiàn)了大量的OR基因并對(duì)嗅覺系統(tǒng)的反應(yīng)機(jī)制做了詳細(xì)的闡述。家犬在15000前由狼馴化而來(lái),家犬因其敏銳的嗅覺被用于追尋獵物、尋找毒品爆炸物等眾多領(lǐng)域。作為人類的伙伴,家犬的OR基因得到了大家的廣泛研究。到目前為止,已發(fā)現(xiàn)1400多個(gè)家犬OR基因分為17個(gè)家族,其中Class I有4個(gè)家族,其余的13個(gè)家族都屬于ClassⅡ。家犬的OR基因家族中假基因占OR基因總數(shù)的20%左右,與鼠類的假基因率相近,但遠(yuǎn)低于人類等嗅覺差的哺乳動(dòng)物。科學(xué)家發(fā)現(xiàn)One-ONS,One-OR的表達(dá)模式是嗅覺受體細(xì)胞所特有的,并且發(fā)現(xiàn)OR基因在主要嗅覺粘膜(MOE)上呈帶狀分布。本實(shí)驗(yàn)對(duì)Family1不同亞家族的8個(gè)基因(cOR1A3、cOR1P2、cOR1X2、cOR1R4、OR1L6、OR1E1、OR1K1、OR1I1)進(jìn)行了基因和氨基酸序列的分析并構(gòu)建了它們與不同哺乳動(dòng)物間的進(jìn)化樹,通過同源建模預(yù)測(cè)了氨基酸...

【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1.嗅覺的研究進(jìn)展
    1.1 家犬的嗅覺及其生理結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
        1.1.1 家犬的嗅覺
        1.1.2 家犬嗅覺系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 嗅覺信號(hào)傳導(dǎo)通路
    1.2 嗅覺受體
        1.2.1 嗅覺受體的發(fā)現(xiàn)及其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
        1.2.2 嗅覺受體基因(OR)家族
        1.2.3 嗅覺受體假基因
    1.3 嗅覺受體(OR)基因表達(dá)
        1.3.1 嗅覺受體基因表達(dá)的分布
        1.3.2 嗅覺受體基因的時(shí)空表達(dá)
        1.3.3 嗅覺受體基因的異位表達(dá)
        1.3.4 嗅覺受體的氣味識(shí)別
    1.4 嗅覺受體基因的進(jìn)化分析
    1.5 雙側(cè)鼻腔的嗅覺差異
2.材料方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 家犬 OR 基因的選取
    2.3 主要實(shí)驗(yàn)藥品和試劑
    2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.5.1 嗅覺粘膜總 RNA 的提取
        2.5.2 RNA 的檢測(cè)
        2.5.3 RNA 的純化
        2.5.4 cDNA 第一條鏈的合成
        2.5.5 引物設(shè)計(jì)及合成
        2.5.6 8個(gè)OR基因目的序列的克隆
        2.5.7 家犬OR基因的相對(duì)定量表達(dá)
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 組織樣品總 RNA 提取結(jié)果電泳圖
    3.2 目的條帶的 RT-PCR 結(jié)果
    3.3 家犬 OR 基因序列測(cè)定結(jié)果及序列分析
    3.4 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的結(jié)果分析
        3.4.1 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的溶解曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.2 相對(duì)定量的結(jié)果與分析
4.討論
    4.1 OR 的基因序列分析
    4.2 OR 的氨基酸序列分析
    4.3 OR 基因的進(jìn)化分析
    4.4 8 個(gè) OR 基因表達(dá)的相對(duì)定量分析
        4.4.1 OR 基因在 MOE 不同部位的表達(dá)差異
        4.4.2 OR 基因在個(gè)體間的表達(dá)差異
        4.4.3 家犬 8 個(gè) OR 基因的相關(guān)性
5.結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號(hào):3739511

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