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家犬嗅覺受體基因的空間表達差異及進化分析

發(fā)布時間:2023-02-10 16:27
  1991年,Linda和Richard首次在褐家鼠中發(fā)現(xiàn)了嗅覺受體(olfactory receptor)超基因家族,并因此獲得了2004年的諾貝爾生理學(xué)獎。在近20多年的時間里,科學(xué)家們在其他動物中也發(fā)現(xiàn)了大量的OR基因并對嗅覺系統(tǒng)的反應(yīng)機制做了詳細的闡述。家犬在15000前由狼馴化而來,家犬因其敏銳的嗅覺被用于追尋獵物、尋找毒品爆炸物等眾多領(lǐng)域。作為人類的伙伴,家犬的OR基因得到了大家的廣泛研究。到目前為止,已發(fā)現(xiàn)1400多個家犬OR基因分為17個家族,其中Class I有4個家族,其余的13個家族都屬于ClassⅡ。家犬的OR基因家族中假基因占OR基因總數(shù)的20%左右,與鼠類的假基因率相近,但遠低于人類等嗅覺差的哺乳動物?茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)One-ONS,One-OR的表達模式是嗅覺受體細胞所特有的,并且發(fā)現(xiàn)OR基因在主要嗅覺粘膜(MOE)上呈帶狀分布。本實驗對Family1不同亞家族的8個基因(cOR1A3、cOR1P2、cOR1X2、cOR1R4、OR1L6、OR1E1、OR1K1、OR1I1)進行了基因和氨基酸序列的分析并構(gòu)建了它們與不同哺乳動物間的進化樹,通過同源建模預(yù)測了氨基酸...

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1.嗅覺的研究進展
    1.1 家犬的嗅覺及其生理結(jié)構(gòu)特點
        1.1.1 家犬的嗅覺
        1.1.2 家犬嗅覺系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 嗅覺信號傳導(dǎo)通路
    1.2 嗅覺受體
        1.2.1 嗅覺受體的發(fā)現(xiàn)及其結(jié)構(gòu)特點
        1.2.2 嗅覺受體基因(OR)家族
        1.2.3 嗅覺受體假基因
    1.3 嗅覺受體(OR)基因表達
        1.3.1 嗅覺受體基因表達的分布
        1.3.2 嗅覺受體基因的時空表達
        1.3.3 嗅覺受體基因的異位表達
        1.3.4 嗅覺受體的氣味識別
    1.4 嗅覺受體基因的進化分析
    1.5 雙側(cè)鼻腔的嗅覺差異
2.材料方法
    2.1 實驗動物
    2.2 家犬 OR 基因的選取
    2.3 主要實驗藥品和試劑
    2.4 主要實驗儀器
    2.5 實驗方法
        2.5.1 嗅覺粘膜總 RNA 的提取
        2.5.2 RNA 的檢測
        2.5.3 RNA 的純化
        2.5.4 cDNA 第一條鏈的合成
        2.5.5 引物設(shè)計及合成
        2.5.6 8個OR基因目的序列的克隆
        2.5.7 家犬OR基因的相對定量表達
3.實驗結(jié)果與分析
    3.1 組織樣品總 RNA 提取結(jié)果電泳圖
    3.2 目的條帶的 RT-PCR 結(jié)果
    3.3 家犬 OR 基因序列測定結(jié)果及序列分析
    3.4 實時熒光定量 PCR 的結(jié)果分析
        3.4.1 實時熒光定量 PCR 的溶解曲線和標準曲線
        3.4.2 相對定量的結(jié)果與分析
4.討論
    4.1 OR 的基因序列分析
    4.2 OR 的氨基酸序列分析
    4.3 OR 基因的進化分析
    4.4 8 個 OR 基因表達的相對定量分析
        4.4.1 OR 基因在 MOE 不同部位的表達差異
        4.4.2 OR 基因在個體間的表達差異
        4.4.3 家犬 8 個 OR 基因的相關(guān)性
5.結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
附錄



本文編號:3739511

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