1.PCR檢測(cè)小鵝瘟病毒方-法的建立 小鵝瘟是由鵝細(xì)小病毒（Goose Parvovirus, GPV）引起的雛鵝或雛番鴨的可傳播的敗血性疾病。隨著水禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,小鵝瘟對(duì)養(yǎng)鵝業(yè)造成了嚴(yán)重威脅和損失。本研究根據(jù)GeneBank上發(fā)布的鵝細(xì)小病毒（GPV）標(biāo)準(zhǔn)株B株的全基因組序列,針對(duì)GPV的保守基因片段VP3設(shè)計(jì)了一對(duì)引物,建立一種用于檢測(cè)小鵝瘟病毒的PCR方法。研究結(jié)果表明,該方法能夠特異地?cái)U(kuò)增出預(yù)期大小約為776bp的片段。通過(guò)特異性實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明,該方法僅能從鵝細(xì)小病毒（GPV）中擴(kuò)增出特異性片段,不能擴(kuò)增禽白血病病毒（ALV）、禽流感病毒（AIV）、鴨坦布蘇病毒（DTMUV）、產(chǎn)蛋下降綜合癥病毒（EDS76）、鵝致病性大腸桿菌、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒（REV）、馬立克氏病毒（MDV）等病毒核酸。靈敏性實(shí)驗(yàn)證明,該方法最小核酸檢出量為4.7ng （50μL體系）。應(yīng)用所建立的特異性PCR方法于臨床病料檢測(cè),結(jié)果顯示41份疑似樣品檢出率100%,而病毒常規(guī)分離法分離到GPV32份,陽(yáng)性率為78.0%。同時(shí)應(yīng)用雙夾心ELISA方法檢測(cè)其中的13份樣品,陽(yáng)性率為100%。本研... 

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號(hào)說(shuō)明
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
研究?jī)?nèi)容一 PCR檢測(cè)小鵝瘟病毒方法的建立
    1. 材料
    2. 方法
    3. 結(jié)果
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
研究?jī)?nèi)容二 江淮地區(qū)小鵝瘟病毒的分子遺傳進(jìn)化分析
    1. 材料
    2. 方法
    3. 結(jié)果
    4. 討論
    參考文獻(xiàn)
研究?jī)?nèi)容三 小鵝瘟病毒全基因序列的測(cè)定及遺傳進(jìn)化分析
    1. 材料
    2. 方法
    3. 結(jié)果
    4. 討論
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]抗鵝細(xì)小病毒單克隆抗體的制備及其免疫熒光檢測(cè)方法的建立[J]. 郭卉,涂飛,呂亞楠,史榮華,金文杰,邵紅霞,錢琨,秦愛(ài)建.  中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2013(04)
[2]2株鵝細(xì)小病毒全基因組特征分析[J]. 王浩,田先舉,張爍,周秀紅,劉紅梅,潘玲,祁克宗.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(04)
[3]番鴨源小鵝瘟病毒PT株VP基因的克隆與序列分析[J]. 王劭,朱小麗,林鋒強(qiáng),程曉霞,陳仕龍,李兆龍,陳少鶯.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2012(01)
[4]鵝細(xì)小病毒PCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 邵洪澤,李琳,毛文智,辛英,姚新華.  吉林畜牧獸醫(yī). 2009(05)
[5]雛番鴨細(xì)小病毒病的研究進(jìn)展[J]. 阮二壘,陳芳艷,陳瑞愛(ài),王林川.  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2009(05)
[6]小鵝瘟病毒常州株的鑒定及其致弱研究[J]. 金文杰,李清,劉岳龍,秦愛(ài)建,劉學(xué)賢,王建,邵紅霞,施祖灝,蔣小剛,周衛(wèi)東.  中國(guó)家禽. 2008(23)
[7]鵝細(xì)小病毒非結(jié)構(gòu)蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)及B細(xì)胞抗原表位預(yù)測(cè)[J]. 于天飛,馬波,邢明偉,靳淼,劉海暇,李俚,王君偉.  中國(guó)家禽. 2007(07)
[8]應(yīng)用GPV VP3基因重組原核表達(dá)產(chǎn)物建立檢測(cè)抗體的ELISA方法研究[J]. 布日額,李寶臣,馬波,王君偉,Ulrich Neumann.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(02)
[9]一例鵝病毒病的病原鑒定初步報(bào)告[J]. 何月英,符芳,曾德年,寧玲忠,崔尚金.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(04)
[10]鵝細(xì)小病毒分離株HG5/82的分子特征分析[J]. 孔憲剛,李桂霞,劉勝旺,冉多良.  中國(guó)病毒學(xué). 2005(01)

博士論文
[1]串聯(lián)不同分子佐劑的小鵝瘟病毒VP3基因疫苗的構(gòu)建及其免疫原性研究[D]. 韓新鋒.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[2]GPV VP及NS基因克隆及其原核表達(dá)產(chǎn)物的研究和應(yīng)用[D]. 布日額.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[3]奶牛γ-干擾素基因的表達(dá)及其在乳房炎防治中的初步應(yīng)用[D]. 許金俊.揚(yáng)州大學(xué) 2004

碩士論文
[1]小鵝瘟病毒VP3基因的克隆表達(dá)及抗小鵝瘟病毒單克隆抗體的研制[D]. 鹿鐘文.揚(yáng)州大學(xué) 2012
[2]小鵝瘟細(xì)胞適應(yīng)毒的培育及其特性的研究[D]. 劉兵.揚(yáng)州大學(xué) 2012
[3]鵝細(xì)小病毒常州株NS1和VP1基因序列分析及NS1基因的表達(dá)[D]. 陳希.揚(yáng)州大學(xué) 2007
[4]小鵝瘟病毒強(qiáng)毒株細(xì)胞適應(yīng)毒的培育及其VP3基因的表達(dá)[D]. 李清.揚(yáng)州大學(xué) 2007
[5]鵝細(xì)小病毒VP3基因克隆及真核表達(dá)載體的構(gòu)建[D]. 張?chǎng)?吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[6]傳染性法氏囊病毒VP2基因的表達(dá)及其特異性單克隆抗體的研制[D]. 李迎曉.揚(yáng)州大學(xué) 2005
[7]鵝細(xì)小病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS2基因的克隆及原核表達(dá)[D]. 邢明偉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號(hào)：3731040