草食動物厭氧真菌與共存甲烷菌的分離鑒定及其代謝產(chǎn)物分析
發(fā)布時間:2023-01-06 19:39
草食動物瘤胃內(nèi)棲息的微生物包括厭氧真菌、古菌、原蟲和真細菌。在長期進化過程中,這些微生物間形成了相互依存,相互制約的復雜關系,并通過代謝等方面的協(xié)同作用在提高瘤胃粗纖維降解能力中發(fā)揮了重要作用。瘤胃內(nèi)厭氧真菌由于其強大的粗纖維降解能力,在提高反芻動物粗飼料利用價值中扮演著尤為重要的角色。甲烷作為瘤胃代謝的終產(chǎn)物之一,它的產(chǎn)生既是動物能量的浪費,同時,也對溫室效應有一定影響,因此瘤胃甲烷菌及甲烷形成機制的研究受到廣泛關注。甲烷菌作為瘤胃中主要的氫利用菌,可利用厭氧真菌的代謝產(chǎn)物如H2、CO2、甲酸和乙酸等產(chǎn)生甲烷。因此,瘤胃內(nèi)厭氧真菌與甲烷菌在瘤胃粗纖維降解產(chǎn)生甲烷過程中存在較為密切的關系。目前有關于厭氧真菌與甲烷菌代謝關系的研究主要集中在單獨厭氧真菌與某些已知甲烷菌的簡單混合培養(yǎng),有關于自然條件下共生的厭氧真菌與甲烷菌的相互代謝機制則鮮有報道。因此本研究擬通過厭氧滾管技術獲得厭氧真菌與甲烷菌自然條件下的簡單共培養(yǎng)物,并對其中厭氧真菌與甲烷菌進行鑒定以及動態(tài)發(fā)酵研究,探討瘤胃內(nèi)厭氧真菌與甲烷菌間的共存關系,為進一步揭示瘤胃內(nèi)微生物間代謝關系奠定基礎。第一部分:瘤胃降解粗纖維產(chǎn)甲烷的厭氧真...
【文章頁數(shù)】:92 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文對照表
引言
文獻綜述
1 厭氧真菌
1.1 厭氧真菌的發(fā)現(xiàn)與分類
1.2 厭氧真菌多樣性
1.3 厭氧真菌的代謝
1.4 厭氧真菌分子學研究手段
2 瘤胃甲烷菌
2.1 甲烷菌的簡介與分類
2.2 甲烷菌的分布
2.3 SGMT簇與RO簇甲烷短桿菌
3 厭氧真菌與甲烷菌的相互關系
3.1 厭氧真菌與甲烷菌體外共培養(yǎng)特性的研究
3.2 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)體系的建立
3.3 厭氧真菌與甲烷菌的自然共生關系的研究
3.4 共培養(yǎng)物中甲烷菌的鑒定方法
4 代謝組學
4.1 代謝組學在微生物學的研究進展
4.2 微生物代謝組學的分析方法
4.3 小結(jié)
5 本文研究的目的和意義
參考文獻
第一章 瘤胃降解粗纖維產(chǎn)甲烷的厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物的分離鑒定
摘要
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 主要試劑和儀器
2 結(jié)果
2.1 共培養(yǎng)中厭氧真菌的鑒定
2.2 共培養(yǎng)物中甲烷菌的鑒定
2.3 共培養(yǎng)中厭氧真菌與甲烷菌相互關系
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
第二章 GC-MS比較研究厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物及厭氧真菌純培養(yǎng)物代謝差異
摘要
1 材料和方法
1.1 培養(yǎng)基成分及其配制
1.2 菌種來源
1.3 微生物培養(yǎng)
1.4 代謝組學樣品收集
1.5 GC-MS樣品配制
1.6 GC/MS分析與數(shù)據(jù)采集
1.7 化合物鑒定與數(shù)據(jù)處理
1.8 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
第三章 厭氧真菌代謝產(chǎn)物中有機酸的高效液相色譜檢測方法的建立
摘要
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 高效液相色譜法的建立
1.3 發(fā)酵液中乙醇濃度測定
1.4 數(shù)據(jù)處理
1.5 儀器與試劑
2 結(jié)果與分析
2.1 檢測波長的選擇
2.2 流動相的選擇
2.3 色譜柱的選擇
2.4 保留時間
2.5 標準曲線及檢測限
2.6 精密度和回收率測定
2.7 厭氧真菌純培養(yǎng)與甲烷菌共培養(yǎng)中上清液及細胞內(nèi)容物中的代謝產(chǎn)物定量分析
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
第四章 厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物及厭氧真菌純培養(yǎng)物發(fā)酵動態(tài)的比較研究
摘要
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 主要試劑和儀器
1.4 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果分析
2.1 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)組及厭氧真菌純培養(yǎng)組發(fā)酵96h的pH動態(tài)變化
2.2 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)組及厭氧真菌純培養(yǎng)組發(fā)酵96h累積產(chǎn)氣量動態(tài)變化
2.3 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)組及厭氧真菌純培養(yǎng)組發(fā)酵96h甲烷產(chǎn)量的動態(tài)變化
2.4 共培養(yǎng)組與純培養(yǎng)組發(fā)酵96h過程中有機酸的發(fā)酵變化規(guī)律
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
全文結(jié)論
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文
【參考文獻】:
期刊論文
[1]反相高效液相色譜法測定厭氧菌有機酸代謝產(chǎn)物[J]. 王忠永,鄭佳音,周鐵麗,黃小俠,劉佳明. 中國微生態(tài)學雜志. 2007(06)
[2]瘤胃體外發(fā)酵產(chǎn)物中的甲烷和有機酸含量的快速測定[J]. 胡偉蓮,王佳堃,呂建敏,郭嫣秋,劉建新. 浙江大學學報(農(nóng)業(yè)與生命科學版). 2006(02)
博士論文
[1]延胡索酸二鈉對山羊瘤胃甲烷生成的調(diào)控研究及相關瘤胃微生物菌群分析[D]. 楊承劍.南京農(nóng)業(yè)大學 2011
[2]厭氧真菌與產(chǎn)甲烷菌共培養(yǎng)系統(tǒng)的建立及其代謝與菌群變化的研究[D]. 成艷芬.南京農(nóng)業(yè)大學 2008
碩士論文
[1]茶葉中6種主要兒茶素的高效液相色譜方法建立及應用[D]. 劉麗霞.南京理工大學 2013
[2]自然結(jié)合的厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物體外代謝特性及產(chǎn)乳酸潛力的初步研究[D]. 劉軍花.南京農(nóng)業(yè)大學 2009
本文編號:3728236
【文章頁數(shù)】:92 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文對照表
引言
文獻綜述
1 厭氧真菌
1.1 厭氧真菌的發(fā)現(xiàn)與分類
1.2 厭氧真菌多樣性
1.3 厭氧真菌的代謝
1.4 厭氧真菌分子學研究手段
2 瘤胃甲烷菌
2.1 甲烷菌的簡介與分類
2.2 甲烷菌的分布
2.3 SGMT簇與RO簇甲烷短桿菌
3 厭氧真菌與甲烷菌的相互關系
3.1 厭氧真菌與甲烷菌體外共培養(yǎng)特性的研究
3.2 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)體系的建立
3.3 厭氧真菌與甲烷菌的自然共生關系的研究
3.4 共培養(yǎng)物中甲烷菌的鑒定方法
4 代謝組學
4.1 代謝組學在微生物學的研究進展
4.2 微生物代謝組學的分析方法
4.3 小結(jié)
5 本文研究的目的和意義
參考文獻
第一章 瘤胃降解粗纖維產(chǎn)甲烷的厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物的分離鑒定
摘要
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 主要試劑和儀器
2 結(jié)果
2.1 共培養(yǎng)中厭氧真菌的鑒定
2.2 共培養(yǎng)物中甲烷菌的鑒定
2.3 共培養(yǎng)中厭氧真菌與甲烷菌相互關系
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
第二章 GC-MS比較研究厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物及厭氧真菌純培養(yǎng)物代謝差異
摘要
1 材料和方法
1.1 培養(yǎng)基成分及其配制
1.2 菌種來源
1.3 微生物培養(yǎng)
1.4 代謝組學樣品收集
1.5 GC-MS樣品配制
1.6 GC/MS分析與數(shù)據(jù)采集
1.7 化合物鑒定與數(shù)據(jù)處理
1.8 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
第三章 厭氧真菌代謝產(chǎn)物中有機酸的高效液相色譜檢測方法的建立
摘要
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 高效液相色譜法的建立
1.3 發(fā)酵液中乙醇濃度測定
1.4 數(shù)據(jù)處理
1.5 儀器與試劑
2 結(jié)果與分析
2.1 檢測波長的選擇
2.2 流動相的選擇
2.3 色譜柱的選擇
2.4 保留時間
2.5 標準曲線及檢測限
2.6 精密度和回收率測定
2.7 厭氧真菌純培養(yǎng)與甲烷菌共培養(yǎng)中上清液及細胞內(nèi)容物中的代謝產(chǎn)物定量分析
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
第四章 厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物及厭氧真菌純培養(yǎng)物發(fā)酵動態(tài)的比較研究
摘要
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 主要試劑和儀器
1.4 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果分析
2.1 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)組及厭氧真菌純培養(yǎng)組發(fā)酵96h的pH動態(tài)變化
2.2 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)組及厭氧真菌純培養(yǎng)組發(fā)酵96h累積產(chǎn)氣量動態(tài)變化
2.3 厭氧真菌與甲烷菌的共培養(yǎng)組及厭氧真菌純培養(yǎng)組發(fā)酵96h甲烷產(chǎn)量的動態(tài)變化
2.4 共培養(yǎng)組與純培養(yǎng)組發(fā)酵96h過程中有機酸的發(fā)酵變化規(guī)律
3 討論
參考文獻
ABSTRACT
全文結(jié)論
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文
【參考文獻】:
期刊論文
[1]反相高效液相色譜法測定厭氧菌有機酸代謝產(chǎn)物[J]. 王忠永,鄭佳音,周鐵麗,黃小俠,劉佳明. 中國微生態(tài)學雜志. 2007(06)
[2]瘤胃體外發(fā)酵產(chǎn)物中的甲烷和有機酸含量的快速測定[J]. 胡偉蓮,王佳堃,呂建敏,郭嫣秋,劉建新. 浙江大學學報(農(nóng)業(yè)與生命科學版). 2006(02)
博士論文
[1]延胡索酸二鈉對山羊瘤胃甲烷生成的調(diào)控研究及相關瘤胃微生物菌群分析[D]. 楊承劍.南京農(nóng)業(yè)大學 2011
[2]厭氧真菌與產(chǎn)甲烷菌共培養(yǎng)系統(tǒng)的建立及其代謝與菌群變化的研究[D]. 成艷芬.南京農(nóng)業(yè)大學 2008
碩士論文
[1]茶葉中6種主要兒茶素的高效液相色譜方法建立及應用[D]. 劉麗霞.南京理工大學 2013
[2]自然結(jié)合的厭氧真菌與甲烷菌共培養(yǎng)物體外代謝特性及產(chǎn)乳酸潛力的初步研究[D]. 劉軍花.南京農(nóng)業(yè)大學 2009
本文編號:3728236
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