威爾姆氏瘤基因1（Wilms tumour gene1, WT1）是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)與威爾姆氏瘤相關(guān)的功能失活的基因，并且在腎臟發(fā)育中起著十分重要的作用。WT1基因敲除小鼠無腎臟、生殖腺缺失以及視網(wǎng)膜畸形，因此，在發(fā)育過程中，WT1基因與腎臟及生殖腺細(xì)胞的存活及分化密切相關(guān)。目前對(duì)于WT1基因的研究大多數(shù)是關(guān)于人的各種腫瘤疾病以及小鼠的腎臟及睪丸發(fā)育方面的研究，而WT1基因在豬體內(nèi)表達(dá)及功能研究的相關(guān)報(bào)道較少。豬是我國(guó)最重要的肉用家畜，同時(shí)在解剖、生理和代謝等方面與人類十分接近，藥物代謝、器官大小和功能也基本相似，是人類異種器官移植的重要目標(biāo)動(dòng)物和理想的人類疾病模型動(dòng)物。 因此本實(shí)驗(yàn)旨在分離培養(yǎng)原代豬胎兒成纖維細(xì)胞（PFF）以及豬腎成纖維細(xì)胞（PKF），檢測(cè)三種豬細(xì)胞中PFF、PKF及睪丸細(xì)胞（ST）中WT1基因的表達(dá)，以及WT1蛋白在這三種細(xì)胞中的分布情況，為WT1基因在腎臟和生殖腺中表達(dá)及功能的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果包括：（1）原代培養(yǎng)豬胎兒成纖維細(xì)胞（PFF）及豬腎成纖維細(xì)胞（PKF）；經(jīng)RT-PCR及熒光定量PCR檢測(cè)到WT1基因分別在PFF、PKF及ST細(xì)胞中表達(dá)；... 

【文章頁(yè)數(shù)】：126 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
內(nèi)容提要
中文摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 威爾姆氏瘤基因1（Wilms tumor gene 1, WT1）概述
        1.1 WT1 基因概況
        1.2 WT1 基因與腫瘤形成
        1.3 小結(jié)
    第2章 WT1 基因在腎臟和性腺發(fā)育中的作用
        2.1 WT1 基因與腎臟發(fā)育
        2.2 WT1 基因與性腺發(fā)育
        2.3 與泌尿生殖相關(guān)的發(fā)育基因
        2.4 小結(jié)
第二篇 實(shí)驗(yàn)研究
    第1章 威爾姆氏瘤基因1（WT1）在PFF、PKF及ST細(xì)胞中的表達(dá)情況分析
        1.1 材料與試劑
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第2章 pLV3-WT1 shRNA 慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建及其對(duì)PKF細(xì)胞中WT1 基因下調(diào)表達(dá)的影響
        2.1 材料與試劑
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第3章 pLV3-WT1 shRNA 慢病毒表達(dá)載體對(duì) ST 細(xì)胞中 WT1 基因下調(diào)表達(dá)的影響
        3.1 材料與試劑
        3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第4章 pIRES2-WT1-EGFP表達(dá)載體的構(gòu)建及其在ST 細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá)
        4.1 材料與試劑
        4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3 結(jié)果
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第5章 pLV3-WT1 shRNA慢病毒表達(dá)載體對(duì) PFF細(xì)胞中WT1基因下調(diào)表達(dá)的影響
        5.1 材料與試劑
        5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
攻讀博士期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào)：3720656