仔豬早期斷奶應激誘導自噬發(fā)生規(guī)律的研究
發(fā)布時間:2022-12-17 11:04
在現(xiàn)代畜牧生產(chǎn)中,仔豬早期斷奶已經(jīng)被廣泛的采用,由于生產(chǎn)需要以及飼養(yǎng)條件和營養(yǎng)水平的不斷改進,仔豬斷奶的時間被不斷提前,但是仔豬在斷奶時易受到環(huán)境和營養(yǎng)等多方面的刺激,從而造成一系列的仔豬早期斷奶應激綜合癥。自噬是一種溶酶體依賴性的降解途徑,它廣泛的存在于真核生物中,在細胞的生長發(fā)育以及蛋白質(zhì)的代謝中發(fā)揮著非常重要的作用。我們實驗室已有的研究證實在斷奶后1~2天,自噬能夠被迅速的激活,但是在斷奶后的短時間內(nèi),自噬的變化規(guī)律還有待進一步的研究,同時由于仔豬在斷奶時營養(yǎng)物質(zhì)和能量攝入受限,隨著斷奶時間的延長,體內(nèi)調(diào)控營養(yǎng)和能量代謝的通路可能也會發(fā)生變化。 本試驗內(nèi)容包括五部分:1.在斷奶過程中,仔豬血液中常規(guī)生理生化指標的變化規(guī)律;2.在斷奶過程中,仔豬血液中相關(guān)激素的變化規(guī)律;3.斷奶應激對仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響;4.斷奶應激對仔豬肝臟中AMPK表達量的影響;5.斷奶應激對仔豬肝臟中mTOR表達量的影響。6.基于實驗室已有的研究結(jié)果,探究隨著斷奶時間的延長,自噬的變化規(guī)律。研究結(jié)果如下: (1)通過對仔豬血液中常規(guī)生理生化指標的測定發(fā)現(xiàn),與對照組相比,在斷奶后1-7天,白細胞呈現(xiàn)...
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
1 文獻綜述
1.1 仔豬早期斷奶的必要性分析
1.1.1 縮短母豬的繁殖周期,增加母豬的年產(chǎn)仔數(shù)
1.1.2 提高仔豬的成活率
1.1.3 提高分娩舍的利用率
1.1.4 提高飼料利用率,減少飼料消耗
1.1.5 母豬體重損失少,節(jié)省飼料
1.2 早期斷奶仔豬的消化生理特點
1.2.1 早期斷奶應激對仔豬腸道結(jié)構(gòu)變化的影響
1.2.2 早期斷奶應激對仔豬消化酶以及胃酸分泌的影響
1.2.3 早期斷奶應激對仔豬消化道微生物區(qū)系的影響
1.3 早期斷奶應激對仔豬抗病能力的影響
1.4 細胞自噬的簡介及其作用機理
1.4.1 自噬的分類及其形成過程
1.4.1.1 大自噬
1.4.1.2 小自噬
1.4.1.3 分子伴侶介導的自噬
1.4.2 自噬的生物學作用和意義
1.5 雷帕霉素靶蛋白(The target protein of rapamycin,TOR)信號通路
1.6 AMPK(AMP-activated protein kinase,AMPK)信號通路
1.7 早期斷奶應激對自噬的影響
1.8 AMPK、mTOR和自噬三者之間的聯(lián)系
1.9 研究目的與意義
2 材料與方法
2.1 試驗材料選擇
2.1.1 試驗動物
2.1.2 主要藥品及試劑
2.1.3 試驗緩沖液及其配制
2.1.3.1 蛋白酶抑制劑配方
2.1.3.2 SDS-PAGE緩沖液
2.1.3.3 其他緩沖液
2.1.3.4 細胞裂解液配方
2.1.3.5 Schiff液的配制
2.2 試驗方法及處理
2.2.1 試驗設計
2.2.2 動物樣品的采集
2.2.3 血液指標的測定
2.2.3.1 血液中生理生化指標測定
2.2.3.2 血液中氨基酸的測定
2.2.3.3 血液中葡萄糖的測定
2.2.3.4 血液中相關(guān)激素的測定
2.2.4 蘇木素—伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,H&E染色)
2.2.4.1 組織切片制作流程
2.2.4.2 H&E染色流程
2.2.5 糖原染色(periodic acid-Schiff staining,PAS染色)
2.2.6 透射電鏡
2.2.7 SDS-PAGE/Western-Blot
2.2.7.1 蛋白樣品的制備
2.2.7.2 SDS-PAGE/Western Blot
2.3 圖像處理及數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 早期斷奶應激對仔豬血液指標的影響
3.1.1 早期斷奶應激對仔豬血液中常規(guī)生理指標的影響
3.1.2 早期斷奶應激對仔豬血液中相關(guān)激素指標的影響
3.2 早期斷奶應激對仔豬腸道和肝臟形態(tài)變化的影響
3.3 早期斷奶應激對仔豬能量代謝的影響
3.3.1 早期斷奶應激對仔豬肝臟中糖原分布的影響
3.3.2 早期斷奶應激對仔豬血液中葡萄糖濃度的影響
3.3.3 早期斷奶應激對仔豬肝臟中AMPK的影響
3.4 早期斷奶應激對仔豬肝臟中自噬的影響
3.4.1 早期斷奶應激對仔豬肝臟中LC3的影響
3.4.2 早期斷奶應激對仔豬肝臟中p62的影響
3.4.3 早期斷奶應激對仔豬肝臟組織中自噬泡數(shù)量的影響
3.5 早期斷奶應激對仔豬氨基酸代謝的影響
3.5.1 早期斷奶應激對仔豬血液中氨基酸的影響
3.5.2 早期斷奶應激對仔豬肝臟組織中mTOR的影響
4 討論與小結(jié)
4.1 早期斷奶應激對仔豬血液中常規(guī)生理指標的影響
4.2 早期斷奶應激對仔豬血液中相關(guān)激素指標的影響
4.3 早期斷奶應激對仔豬腸道形態(tài)的影響
4.4 早期斷奶應激對仔豬能量代謝的影響
4.5 早期斷奶應激對仔豬自噬的影響
4.6 早期斷奶應激對仔豬氨基酸代謝的影響
4.7 結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]小自噬的研究進展[J]. 陳艾,童煜,毛萌. 中國病理生理雜志. 2012(05)
[2]運動對生長激素的影響[J]. 張穎,李濤. 咸寧學院學報. 2011(06)
[3]斷奶仔豬的生理特點及乳酸桿菌在斷奶仔豬中應用的研究進展[J]. 石英軍,黃興國. 廣東飼料. 2011(04)
[4]仔豬免疫系統(tǒng)的建立及早期斷奶對仔豬免疫功能的影響研究[J]. 陳靜,劉顯軍,邊連全,樸鐘云. 吉林農(nóng)業(yè)科學. 2011(01)
[5]冷束縛應激對變應性鼻炎大鼠鼻黏膜中嗜酸粒細胞及白細胞介素2和6表達的影響[J]. 王長青,趙長青,索利敏. 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2009 (12)
[6]仔豬消化道微生物區(qū)系變化影響因素研究[J]. 楊玲,楊衛(wèi)景,馬先進,洪杰. 中獸醫(yī)學雜志. 2009(05)
[7]早期斷奶應激對仔豬血清皮質(zhì)醇含量和腸形態(tài)及腸屏障通透性的影響[J]. 錢仲倉,劉海萍,徐勇,胡彩虹. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2009(10)
[8]豬胎及仔豬消化道發(fā)育的研究進展[J]. 趙元,秦貴信,鮑男,王濤,張兵. 中國畜牧雜志. 2008(09)
[9]合生素對斷奶仔豬生產(chǎn)性能及血液生理生化指標的影響[J]. 王龍昌,周巖民,羅有文,康峰,王恬. 畜牧與獸醫(yī). 2008(04)
[10]幾種酸化劑對斷奶仔豬胃酸分泌、胃腸道消化酶活性和微生物菌群的影響[J]. 朱曉萍,張德福. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(03)
本文編號:3719816
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
1 文獻綜述
1.1 仔豬早期斷奶的必要性分析
1.1.1 縮短母豬的繁殖周期,增加母豬的年產(chǎn)仔數(shù)
1.1.2 提高仔豬的成活率
1.1.3 提高分娩舍的利用率
1.1.4 提高飼料利用率,減少飼料消耗
1.1.5 母豬體重損失少,節(jié)省飼料
1.2 早期斷奶仔豬的消化生理特點
1.2.1 早期斷奶應激對仔豬腸道結(jié)構(gòu)變化的影響
1.2.2 早期斷奶應激對仔豬消化酶以及胃酸分泌的影響
1.2.3 早期斷奶應激對仔豬消化道微生物區(qū)系的影響
1.3 早期斷奶應激對仔豬抗病能力的影響
1.4 細胞自噬的簡介及其作用機理
1.4.1 自噬的分類及其形成過程
1.4.1.1 大自噬
1.4.1.2 小自噬
1.4.1.3 分子伴侶介導的自噬
1.4.2 自噬的生物學作用和意義
1.5 雷帕霉素靶蛋白(The target protein of rapamycin,TOR)信號通路
1.6 AMPK(AMP-activated protein kinase,AMPK)信號通路
1.7 早期斷奶應激對自噬的影響
1.8 AMPK、mTOR和自噬三者之間的聯(lián)系
1.9 研究目的與意義
2 材料與方法
2.1 試驗材料選擇
2.1.1 試驗動物
2.1.2 主要藥品及試劑
2.1.3 試驗緩沖液及其配制
2.1.3.1 蛋白酶抑制劑配方
2.1.3.2 SDS-PAGE緩沖液
2.1.3.3 其他緩沖液
2.1.3.4 細胞裂解液配方
2.1.3.5 Schiff液的配制
2.2 試驗方法及處理
2.2.1 試驗設計
2.2.2 動物樣品的采集
2.2.3 血液指標的測定
2.2.3.1 血液中生理生化指標測定
2.2.3.2 血液中氨基酸的測定
2.2.3.3 血液中葡萄糖的測定
2.2.3.4 血液中相關(guān)激素的測定
2.2.4 蘇木素—伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,H&E染色)
2.2.4.1 組織切片制作流程
2.2.4.2 H&E染色流程
2.2.5 糖原染色(periodic acid-Schiff staining,PAS染色)
2.2.6 透射電鏡
2.2.7 SDS-PAGE/Western-Blot
2.2.7.1 蛋白樣品的制備
2.2.7.2 SDS-PAGE/Western Blot
2.3 圖像處理及數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 早期斷奶應激對仔豬血液指標的影響
3.1.1 早期斷奶應激對仔豬血液中常規(guī)生理指標的影響
3.1.2 早期斷奶應激對仔豬血液中相關(guān)激素指標的影響
3.2 早期斷奶應激對仔豬腸道和肝臟形態(tài)變化的影響
3.3 早期斷奶應激對仔豬能量代謝的影響
3.3.1 早期斷奶應激對仔豬肝臟中糖原分布的影響
3.3.2 早期斷奶應激對仔豬血液中葡萄糖濃度的影響
3.3.3 早期斷奶應激對仔豬肝臟中AMPK的影響
3.4 早期斷奶應激對仔豬肝臟中自噬的影響
3.4.1 早期斷奶應激對仔豬肝臟中LC3的影響
3.4.2 早期斷奶應激對仔豬肝臟中p62的影響
3.4.3 早期斷奶應激對仔豬肝臟組織中自噬泡數(shù)量的影響
3.5 早期斷奶應激對仔豬氨基酸代謝的影響
3.5.1 早期斷奶應激對仔豬血液中氨基酸的影響
3.5.2 早期斷奶應激對仔豬肝臟組織中mTOR的影響
4 討論與小結(jié)
4.1 早期斷奶應激對仔豬血液中常規(guī)生理指標的影響
4.2 早期斷奶應激對仔豬血液中相關(guān)激素指標的影響
4.3 早期斷奶應激對仔豬腸道形態(tài)的影響
4.4 早期斷奶應激對仔豬能量代謝的影響
4.5 早期斷奶應激對仔豬自噬的影響
4.6 早期斷奶應激對仔豬氨基酸代謝的影響
4.7 結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]小自噬的研究進展[J]. 陳艾,童煜,毛萌. 中國病理生理雜志. 2012(05)
[2]運動對生長激素的影響[J]. 張穎,李濤. 咸寧學院學報. 2011(06)
[3]斷奶仔豬的生理特點及乳酸桿菌在斷奶仔豬中應用的研究進展[J]. 石英軍,黃興國. 廣東飼料. 2011(04)
[4]仔豬免疫系統(tǒng)的建立及早期斷奶對仔豬免疫功能的影響研究[J]. 陳靜,劉顯軍,邊連全,樸鐘云. 吉林農(nóng)業(yè)科學. 2011(01)
[5]冷束縛應激對變應性鼻炎大鼠鼻黏膜中嗜酸粒細胞及白細胞介素2和6表達的影響[J]. 王長青,趙長青,索利敏. 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2009 (12)
[6]仔豬消化道微生物區(qū)系變化影響因素研究[J]. 楊玲,楊衛(wèi)景,馬先進,洪杰. 中獸醫(yī)學雜志. 2009(05)
[7]早期斷奶應激對仔豬血清皮質(zhì)醇含量和腸形態(tài)及腸屏障通透性的影響[J]. 錢仲倉,劉海萍,徐勇,胡彩虹. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2009(10)
[8]豬胎及仔豬消化道發(fā)育的研究進展[J]. 趙元,秦貴信,鮑男,王濤,張兵. 中國畜牧雜志. 2008(09)
[9]合生素對斷奶仔豬生產(chǎn)性能及血液生理生化指標的影響[J]. 王龍昌,周巖民,羅有文,康峰,王恬. 畜牧與獸醫(yī). 2008(04)
[10]幾種酸化劑對斷奶仔豬胃酸分泌、胃腸道消化酶活性和微生物菌群的影響[J]. 朱曉萍,張德福. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(03)
本文編號:3719816
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