本研究建立了可以同時檢測和鑒別通用型口蹄疫病毒（FMDV）、新澤西型水泡性口炎病毒（VSVNJ）和印第安納型水泡性口炎病毒（VSV-IND）的多重?zé)晒釸T-PCR方法,并進(jìn)行了驗證和應(yīng)用。結(jié)果顯示,建立的多重和單一熒光RT-PCR擴(kuò)增效率E值約100%,R2＞0.999,擴(kuò)增效果良好,最低檢測限可達(dá)到約10 copies/μL,方法特異性為100%。FMDV、VSV-NJ和VSV-IND單一熒光RT-PCR與多重?zé)晒釸T-PCR之間的相關(guān)性系數(shù)分別為0.999 5、0.999 8和0.999 4,與單一熒光RT-PCR相比,多重混合對特異性和敏感性均未產(chǎn)生明顯干擾。用已知的FMDV和VSV-NJ及VSV-IND陽性核酸19份驗證,符合率為100%。經(jīng)國家口蹄疫參考實驗室分別對62份陽性、50份陰性FMDV樣品進(jìn)行驗證,結(jié)果一致。從100份臨床樣品中篩查到10份FMDV陽性,未見混合感染,與單一熒光RT-PCR結(jié)果相符。本研究建立的多重?zé)晒釸T-PCR方法實現(xiàn)了一次檢測同時鑒別多重病毒的目的,適用于混合感染水泡性疫病的臨床快速篩查。 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3716223