發(fā)布時(shí)間：2022-12-07 20:46

　　為研究黃曲霉毒素B1（AFB1）能否誘導(dǎo)細(xì)胞自噬,并初步探討其可能的作用機(jī)制。利用免疫熒光、酶標(biāo)儀檢測(cè)、免疫印跡等技術(shù)檢測(cè)經(jīng)AFB1處理過的細(xì)胞的自噬水平、相關(guān)蛋白的表達(dá)量以及活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的產(chǎn)生情況。結(jié)果表明:AFB1能夠引起RAW264.7細(xì)胞和Hela細(xì)胞的自噬反應(yīng),并且該自噬為完全自噬。AFB1誘導(dǎo)的小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7自噬是依賴細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（Extracellular signal-regulated kinase,ERK）途徑發(fā)生的,并受ROS的調(diào)節(jié)。此外,發(fā)現(xiàn)AFB1誘導(dǎo)ROS產(chǎn)生呈濃度依賴性,而ROS抑制劑同時(shí)抑制了ROS和自噬發(fā)生,但自噬抑制劑并沒有有效地抑制ROS的產(chǎn)生,表明ROS處于AFB1誘導(dǎo)自噬的上游,對(duì)自噬起到調(diào)節(jié)作用。這表明AFB1誘導(dǎo)的自噬現(xiàn)象在細(xì)胞中普遍存在,而自噬作為機(jī)體的免疫機(jī)制,在抵抗AFB1毒力侵染的過程中發(fā)揮重要作用。 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 質(zhì)粒、細(xì)胞與細(xì)胞培養(yǎng)
    1.2 主要試劑
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 熒光顯微鏡觀察
    1.5 免疫印跡分析
    1.6 熒光酶標(biāo)儀對(duì)ROS進(jìn)行檢測(cè)
    1.7 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 AFB1誘導(dǎo)劑量依賴性自噬的發(fā)生
    2.2 AFB1誘導(dǎo)一個(gè)完全自噬過程
    2.3 AFB1誘導(dǎo)的自噬應(yīng)答依賴于MEK/ERK途徑
    2.4 AFB1誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生的自噬受ROS調(diào)節(jié)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三氯生通過誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞非mTOR途徑自噬加強(qiáng)胞內(nèi)菌殺傷[J]. 施曉晨,孫青松,安雅男,張巧麗,郭娜,于錄.  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]活性氧與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[J]. 周映彤,肖洪彬,畢明剛.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2011(05)
[3]細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）與宮頸癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 章麗霞,劉鈞.  川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(05)
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