本試驗旨在進一步全面研究綿羊肺腺瘤病毒（JSRV）囊膜蛋白ENV的功能。使用本試驗室已構(gòu)建好的真核表達質(zhì)粒pcDNA3.1（+）/exJSRV-env轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞,并將此NIH3T3細胞接種到裸鼠體內(nèi);重組質(zhì)粒經(jīng)尾靜脈注射到幼齡BALB/c小鼠體內(nèi)。結(jié)果顯示,真核表達質(zhì)粒pcDNA3.1（+）/exJSRV-env引起NIH3T3細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)染細胞接觸抑制性消失,并形成大量的轉(zhuǎn)化灶;pcDNA3.1（+）/exJSRV-env轉(zhuǎn)染的NIH3T3細胞接種裸鼠使裸鼠致瘤,即引起NIH3T3細胞發(fā)生癌變。JSRVenv基因在小鼠體內(nèi)表達,肝臟細胞出現(xiàn)大面積彌散性壞死,脾臟白髓嚴重壞死,心肌細胞明顯顆粒樣變性,肺間質(zhì)細胞增生,腎小管上皮細胞輕度顆粒樣變性。結(jié)果表明,綿羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白可以引起鼠NIH3T3細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化和癌變,使小鼠各臟器出現(xiàn)不同程度的病變。本試驗為進一步探索JSRV ENV的致瘤機制奠定基礎(chǔ)。 

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物及處理
        1.1.2主要試劑
    1.2 真核表達質(zhì)粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env的鑒定
    1.3 細胞轉(zhuǎn)化和鑒定
    1.4裸鼠致瘤實驗
    1.5 pcDNA3.1(+)/exJSRV-env在小鼠體內(nèi)表達
    1.6 RT-PCR檢測env基因mRNA的表達
    1.7 病理組織學H.E染色
2 結(jié)果
    2.1 真核表達質(zhì)粒pcDNA3.1(+)/JSRV-env的鑒定
    2.2 pcDNA3.1(+)/exJSRV-env轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞
        2.2.1 pcDNA3.1(+)/exJSRV-env轉(zhuǎn)染NIH-3T3細胞后目的基因的檢測
        2.2.2 JSRV-env基因引起NIH3T3細胞惡性轉(zhuǎn)化
    2.3 JSRV-env基因引起NIH3T3細胞發(fā)生癌變
    2.4 JSRV-ENV蛋白在小鼠體內(nèi)不同臟器中的mRNA的表達檢測
    2.5 JSRV-ENV蛋白引起小鼠體內(nèi)不同臟器發(fā)生變化的檢測
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3711791