禽白血�。╝vian leukosis, AL）在雞群中引起的病理變化和臨床表現(xiàn)多種多樣，從免疫抑制、生長遲緩、產(chǎn)蛋下降，蛋品質(zhì)下降等，直到明顯的特征性的腫瘤發(fā)生以至于死亡，致死率較低。禽白血病病毒主要經(jīng)種蛋垂直傳播，水平傳播的能力較弱，從祖代、父母代到商品代逐級放大極難凈化徹底。本研究目的在于以ALV感染水平的調(diào)查為基礎(chǔ)，引進(jìn)血液樣品直接PCR檢測的方法作為禽白血病經(jīng)典凈化方法的有力補(bǔ)充。 1.感染狀態(tài)的調(diào)查 為了探究禽白血病在山東某地青腳麻雞核心群中感染狀態(tài)，先后采取多種材料檢測禽白血病病毒的存在，包括采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測泄殖腔棉拭子、卵白、細(xì)胞上清、血清中的P27抗原。調(diào)查過程中共涉及9個(gè)品系，各品系的泄殖腔棉拭子陽性率：A系為24.97%（227/909），B系為5.71%（14/245）C系為16.23%（69/425）,D系20.00%（24/120）,E系10.33%（137/1326），F(xiàn)系為46.67%（14/30）,H系為33.33%（8/24）,S系為0（0/12），X系為75%（9/12）。病毒的細(xì)胞培養(yǎng)，陽性率為14.8%（71/479），A系... 

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 概述
    1.2 病原學(xué)
        1.2.1 病毒的分類地位
        1.2.2 病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)
        1.2.3 化學(xué)組成
            1.2.3.1 核心結(jié)構(gòu)蛋白
            1.2.3.2 酶蛋白
            1.2.3.3 脂質(zhì)
            1.2.3.4 病毒的核酸
        1.2.4 病毒的抵抗力
        1.2.5 核酸基因組的結(jié)構(gòu)和功能
        1.2.6 病毒的復(fù)制
        1.2.7 致腫瘤機(jī)制和致病性
            1.2.7.1 致腫瘤機(jī)制
            1.2.7.2 致病性
    1.3 傳播方式和流行特點(diǎn)
    1.4 臨床癥狀和病理變化
        1.4.1 淋巴細(xì)胞性白血�。↙L）
        1.4.2 成紅細(xì)胞性白血病
        1.4.3 成髓細(xì)胞性白血病
        1.4.4 髓細(xì)胞樣性白血病
        1.4.5 骨型白血病（OP）
    1.5 我國雞白血病的流行現(xiàn)狀
    1.6 公共衛(wèi)生學(xué)和經(jīng)濟(jì)學(xué)意義
        1.6.1 公共衛(wèi)生學(xué)意義
        1.6.2 經(jīng)濟(jì)學(xué)意義
    1.7 診斷和檢測
        1.7.1 臨床診斷
        1.7.2 常用實(shí)驗(yàn)室診斷方法
            1.7.2.1 病毒的分離和鑒定
            1.7.2.2 血清學(xué)檢測
                1.7.2.2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）
                1.7.2.2.2 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（COFAL）
                1.7.2.2.3 間接免疫熒光反應(yīng)（IFA）
            1.7.2.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)
            1.7.2.4 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)
    1.8 禽白血病的防制
    1.9 研究目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 儀器設(shè)備
        2.1.2 成品試劑
        2.1.3 ELISA 檢測試劑盒
        2.1.4 SPF 雞胚
        2.1.5 DF1 細(xì)胞
        2.1.6 相關(guān)試劑的制備
        2.1.7 檢測樣品背景和來源
            2.1.7.1 感染狀態(tài)調(diào)查的檢測樣品來源
            2.1.7.2 檢測方法優(yōu)化研究的樣品來源
            2.1.7.3 初步凈化的研究
    2.2 方法
        2.2.1 青腳麻雞各個(gè)品系核心集群的 ALV 感染狀態(tài)的抽樣調(diào)查
            2.2.1.1 泄殖腔棉拭子、卵白和血清樣品中 ALV P27 抗原的檢測
            2.2.1.2 ALV 的細(xì)胞培養(yǎng)與檢測
                2.2.1.2.1 雞胚成纖維細(xì)胞（CEF）的制備
                2.2.1.2.2 青腳麻雞細(xì)胞上清中 ALV P27 抗原的檢測
        2.2.2 青腳麻雞檢測方法優(yōu)化研究
            2.2.2.1 泄殖腔棉拭子和卵白抗原陽性率的比較
            2.2.2.2 禽白血病多種檢測方法的比較研究
                2.2.2.2.1 血清抗原和泄殖腔棉拭子抗原的檢測
                2.2.2.2.2 ALV-J 抗體的檢測
                2.2.2.2.3 ALV 細(xì)胞培養(yǎng)與檢測
                2.2.2.2.4 直接 PCR 方法檢測
        2.2.3 核心雞群建立過程中 ALV 的初步凈化
            2.2.3.1 青腳麻雞感染率極高核心群的凈化及純潔品系的建立
            2.2.3.2 青腳麻雞感染率較輕的核心群的凈化
                2.2.3.2.1 選取帶有目的性狀雞只組成第 1 世代進(jìn)行 ALV 的凈化
                2.2.3.2.2 第二世代的追蹤檢測
                2.2.3.2.3 第三世代的追蹤檢測
3 結(jié)果與分析
    3.1 青腳麻雞全群的 ALV 感染狀態(tài)調(diào)查
        3.1.1 泄殖腔棉拭子、卵白和血清中帶毒率檢測結(jié)果
        3.1.2 ALV 的細(xì)胞分離鑒定
    3.2 青腳麻雞 ALV 檢測方法優(yōu)化研究
        3.2.1 泄殖腔棉拭子和卵白中抗原檢測一一對應(yīng)的比較結(jié)果
        3.2.2 禽多種檢測方法的比較研究
            3.2.2.1 血液和泄殖腔棉拭子樣品 P27 抗原的檢測結(jié)果
            3.2.2.2 血清中 ALV-J 抗體的檢測結(jié)果
            3.2.2.3 血液樣品的 ALV 細(xì)胞培養(yǎng)后檢測結(jié)果
            3.2.2.4 血液樣品 ALV-J 的直接 PCR 方法的檢測結(jié)果
            3.2.2.5 不同檢測方法對疑似 ALV 陽性樣品的驗(yàn)證結(jié)果
    3.3 ALV 感染核心群初步凈化的研究
        3.3.1 青腳麻雞新建核心群的凈化成果
            3.3.1.1 第 1 世代全部個(gè)體的 ALV 分離鑒定結(jié)果
            3.3.1.2 第 2 世代方式對多種 ALV 追蹤檢測
        3.3.2 青腳麻雞感染率較輕的核心群的凈化
            3.3.2.1 第 1 世代進(jìn)行 ALV 的凈化
            3.3.2.2 第二世代的追蹤檢測
            3.3.2.3 第三世代的追蹤檢測
4 討論
5 結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡介
攻讀碩士期間論文發(fā)表情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同地區(qū)海蘭褐蛋雞中J亞群-禽白血病病毒株gp85基因的分子演化分析[J]. 代陽,楊其峰,王波,劉紹瓊,王秀臻,柴家前,崔治中,孫淑紅.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(05)
[2]雞白血病檢測技術(shù)研究[J]. 秦愛建.  中國家禽. 2010(07)
[3]J亞群禽白血病病毒分子流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]. 柴家前,王貴強(qiáng),孫淑紅,郭慧君,崔治中.  山東畜牧獸醫(yī). 2009(01)
[4]蛋雞J亞群白血病病毒的分離鑒定及序列分析[J]. 王輝,崔治中.  病毒學(xué)報(bào). 2008(05)
[5]我國1999-2003年間ALV-J野毒株gp85基因變異趨勢[J]. 王增福,崔治中,張志,吳永平.  中國病毒學(xué). 2005(04)
[6]中國麻雞中發(fā)現(xiàn)禽J亞群白血病[J]. 成子強(qiáng),張利,劉思當(dāng),張玲娟,崔治中.  微生物學(xué)報(bào). 2005(04)
[7]用ALV-Jgp85單克隆抗體證明蛋雞存在J亞群禽白血病[J]. 徐鑌蕊,董衛(wèi)星,余春明,馮小宇,李寧,Lucy F.Lee,Maoxiang Li.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(03)
[8]從J亞群禽白血病腫瘤中檢測出禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒[J]. 張志,崔治中,姜世金.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(01)
[9]我國肉用型雞群中J亞群白血病流行現(xiàn)狀的調(diào)查[J]. 崔治中,張志,杜巖.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2002(04)
[10]應(yīng)用ELISA方法調(diào)查雞骨髓細(xì)胞瘤病[J]. 成子強(qiáng),趙心力,郝永清,郭金貴,高娃,顧玉芳,楊玉瑩,張二芹,趙振華.  中國家禽. 2002(06)

博士論文
[1]禽白血病病毒J亞群囊膜糖蛋白基因的生物學(xué)和生物化學(xué)特性[D]. 秦愛建.揚(yáng)州大學(xué) 1999



本文編號：3704348