膠體金免疫層析法快速定量檢測動物組織中喹乙醇的研究
發(fā)布時間:2022-11-06 19:06
喹乙醇(Olaquindox)是化學合成的喹噁啉類廣譜抗茵藥物,作為飼料添加劑可顯著促進動物生長,并可預(yù)防和治療細菌感染性疾病。但研究發(fā)現(xiàn),喹乙醇具有中等以上的蓄積毒性,使用不當會導(dǎo)致動物畸變,癌變甚至死亡,且殘留在動物組織中的喹乙醇對人體健康也有很大的威脅。目前,動物組織中喹乙醇殘留檢測方法主要是色譜法和酶聯(lián)免疫法(ELISA),但這些方法對操作人員要求較高,耗費時間較長,不易普及。隨著膠體金免疫層析技術(shù)(gold immune chromatographic assay,GICA)快速診斷試紙條(簡稱膠體金試紙條)的發(fā)展,其因具有檢測簡便快捷、無需檢測儀器,且成本低、無污染等優(yōu)點,已逐漸被應(yīng)用于食品農(nóng)獸藥殘留的監(jiān)測中。本試驗旨在應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)建立動物組織中喹乙醇殘留的快速定量檢測方法。1.喹乙醇多克隆抗體的制備和鑒定。為制備喹乙醇多克隆抗體,采用琥珀酸酐法合成半抗原喹乙醇半琥珀酸酯(OLA-HS),通過活化酯法將半抗原與載體蛋白(BSA和OVA)偶聯(lián)制備喹乙醇免疫原(OLA-HS-BSA)和包被原(OLA-HS-OVA),利用紫外分光光度法測定其濃度并掃描鑒定;利用制備的免...
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞中英文對照
前言
上篇 文獻綜述
1 喹乙醇的藥理學研究概況及生產(chǎn)應(yīng)用
1.1 喹乙醇的理化性質(zhì)
1.2 喹乙醇的作用與生產(chǎn)用途
1.3 喹乙醇的吸收代謝和毒性
1.4 喹乙醇的使用規(guī)范和分布殘留
2 喹乙醇殘留檢測的研究進展
2.1 理化分析方法
2.2 免疫學分析方法
3 膠體金免疫層析技術(shù)
3.1 膠體金免疫層析技術(shù)的使用概況
3.2 膠體金免疫層析原理及試紙條結(jié)構(gòu)
3.3 膠體金的制備和鑒定
3.4 膠體金標記的抗體
3.5 膠體金免疫層析技術(shù)的優(yōu)點
3.6 膠體金免疫層析技術(shù)在動物源食品檢測方面的應(yīng)用
3.7 膠體金免疫技術(shù)發(fā)展方向
4 研究目的和意義
參考文獻
下篇 試驗研究
第一章 喹乙醇多克隆抗體的制備與鑒定
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 試驗方法
2 結(jié)果與分析
2.1 紫外掃描OLA-BSA,OLA-OVA的圖譜并計算分子結(jié)合比
2.2 包被抗原與抗血清最佳工作濃度的確定
2.3 五次免疫后小鼠血清效價的趨勢
2.4 抗血清純化后抗體效價的測定
2.5 抗體敏感性測定
2.6 抗體特異性測定
3 討論
3.1 載體蛋白的選擇
3.2 分子偶聯(lián)比對抗原的影響
3.3 喹乙醇多抗血清的制備
4 小結(jié)
參考文獻
第二章 膠體金試紙條的制備與初步應(yīng)用
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 試驗方法
1.3 試紙條的質(zhì)量性能檢測
2 結(jié)果與分析
2.1 膠體金的紫外掃描圖譜
2.2 膠體金標記蛋白K_2CO_3最佳含量的確定結(jié)果
2.3 膠體金標記抗體蛋白含量的確定
2.4 二抗、包被濃度的確定
2.5 紙條質(zhì)量性能檢測
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻
第三章 膠體金試紙條的定量檢測與市場調(diào)查
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 試驗方法
2 結(jié)果與分析
2.1 樣品的前處理結(jié)果
2.2 試紙條定量檢測
2.3 試紙條的檢測應(yīng)用與比較
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻
全文結(jié)論
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況
本文編號:3704055
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ABSTRACT
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前言
上篇 文獻綜述
1 喹乙醇的藥理學研究概況及生產(chǎn)應(yīng)用
1.1 喹乙醇的理化性質(zhì)
1.2 喹乙醇的作用與生產(chǎn)用途
1.3 喹乙醇的吸收代謝和毒性
1.4 喹乙醇的使用規(guī)范和分布殘留
2 喹乙醇殘留檢測的研究進展
2.1 理化分析方法
2.2 免疫學分析方法
3 膠體金免疫層析技術(shù)
3.1 膠體金免疫層析技術(shù)的使用概況
3.2 膠體金免疫層析原理及試紙條結(jié)構(gòu)
3.3 膠體金的制備和鑒定
3.4 膠體金標記的抗體
3.5 膠體金免疫層析技術(shù)的優(yōu)點
3.6 膠體金免疫層析技術(shù)在動物源食品檢測方面的應(yīng)用
3.7 膠體金免疫技術(shù)發(fā)展方向
4 研究目的和意義
參考文獻
下篇 試驗研究
第一章 喹乙醇多克隆抗體的制備與鑒定
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 試驗方法
2 結(jié)果與分析
2.1 紫外掃描OLA-BSA,OLA-OVA的圖譜并計算分子結(jié)合比
2.2 包被抗原與抗血清最佳工作濃度的確定
2.3 五次免疫后小鼠血清效價的趨勢
2.4 抗血清純化后抗體效價的測定
2.5 抗體敏感性測定
2.6 抗體特異性測定
3 討論
3.1 載體蛋白的選擇
3.2 分子偶聯(lián)比對抗原的影響
3.3 喹乙醇多抗血清的制備
4 小結(jié)
參考文獻
第二章 膠體金試紙條的制備與初步應(yīng)用
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 試驗方法
1.3 試紙條的質(zhì)量性能檢測
2 結(jié)果與分析
2.1 膠體金的紫外掃描圖譜
2.2 膠體金標記蛋白K_2CO_3最佳含量的確定結(jié)果
2.3 膠體金標記抗體蛋白含量的確定
2.4 二抗、包被濃度的確定
2.5 紙條質(zhì)量性能檢測
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻
第三章 膠體金試紙條的定量檢測與市場調(diào)查
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 試驗方法
2 結(jié)果與分析
2.1 樣品的前處理結(jié)果
2.2 試紙條定量檢測
2.3 試紙條的檢測應(yīng)用與比較
3 討論
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攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況
本文編號:3704055
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