狂犬病毒基因位點突變與細胞適應(yīng)相關(guān)性研究
發(fā)布時間:2022-11-03 19:29
狂犬病是一種100%致死的嚴(yán)重危害公眾健康和生命安全的人畜共患病?袢《荆≧abies virus,RABV)屬于彈狀病毒科彈狀病毒屬,是一種不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒,其基因組大小約為12 kb,可編碼核蛋白、磷酸蛋白、基質(zhì)蛋白、糖蛋白及大轉(zhuǎn)錄蛋白這5個結(jié)構(gòu)蛋白?袢⊥ㄟ^患病的蝙蝠、狗、老鼠和臭鼬等哺乳動物抓傷咬傷人類的途徑進行傳播。與其它傳染病不同的是,狂犬病可通過暴露前和暴露后的疫苗免疫接種途徑進行預(yù)防。據(jù)統(tǒng)計,每年約有59000人死于狂犬病,其中95%的患者來自亞洲、非洲等發(fā)展中國家。造成這一嚴(yán)重狀況的主要原因,是較高的疫苗成本和患病動物難以控制等所致。近幾十年來,現(xiàn)代細胞培養(yǎng)技術(shù)使得疫苗純度、效率、安全、產(chǎn)量和經(jīng)濟成本得以改善,所以通過尋找病毒的關(guān)鍵基因功能位點,來提高狂犬病疫苗的細胞適應(yīng)性和穩(wěn)定性,是未來狂犬病疫苗研究亟待解決的核心問題。本研究從7頭患病牛中分離獲得兩株狂犬病毒,分別命名為CNIM1701和CNIM1702,并對其進行全基因組測序,提交NCBI,基因編號為KY649620和MF172976。通過進化樹分析表明,本試驗所用的兩株毒株與蒙古毒株和俄羅斯毒株...
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
縮略詞表 Abbreviations
第一章 文獻綜述 狂犬病疫苗的研究進展
1 狂犬病毒的結(jié)構(gòu)
1.1 狂犬病毒基因組結(jié)構(gòu)及蛋白功能
1.2 狂犬病毒糖蛋白對免疫的影響
1.3 狂犬病毒的分型
1.4 狂犬病的診斷及防治
2 狂犬疫苗的種類
2.1 傳統(tǒng)弱毒活疫苗
2.2 基因工程疫苗
3 狂犬疫苗的研制方法
3.1 反向遺傳學(xué)在疫苗研制中的應(yīng)用
3.2 新型基因編輯技術(shù)在疫苗研制中的應(yīng)用
4 結(jié)語
參考文獻
第二章 試驗研究 狂犬病毒基因位點突變與細胞適應(yīng)性的相關(guān)性研究
前言
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 病料的采集及處理
2.2 狂犬病毒的分離與鑒定
2.3 狂犬病毒基因的擴增與測序
2.4 狂犬病毒的同源性分析
2.5 狂犬病毒在動物和細胞中的傳代與適應(yīng)
2.6 狂犬病毒弱化后的同源性分析
2.7 狂犬病毒弱化后基因突變的檢測
2.8 R83K和P367S重組病毒的拯救
3 討論
3.1 利用組織適應(yīng)毒研究狂犬病毒的細胞適應(yīng)性
3.2 CNIM1701和CNIM1702的同源性分析
3.3 狂犬病毒細胞適應(yīng)性與致病力的相關(guān)性
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞傳代培養(yǎng)法檢測狂犬病毒PV-2061株限度的研究[J]. 姚宇,張景海,李鶴,謝花. 醫(yī)藥前沿. 2017 (28)
[2]疫苗市場概況分析[J]. 李敏. 中國生物工程雜志. 2017(01)
[3]呼和浩特市地區(qū)奶?袢『腿袢〉脑\斷及病毒N基因的遺傳演化分析[J]. 王金玲,田曉靈,丁玉林,王文瑞. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2015(04)
[4]一顆致命的“子彈”——狂犬病[J]. 張弼. 農(nóng)家書屋. 2015(07)
[5]中國2012年狂犬病流行特征分析[J]. 周航,李昱,牟笛,殷文武,余宏杰. 中華流行病學(xué)雜志. 2015 (03)
[6]反向遺傳操作技術(shù)的發(fā)展及趨勢[J]. 唐雷,葛俊偉,韓雪,劉志鵬. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2014(03)
[7]藍舌病病毒反向遺傳操作系統(tǒng)的建立[J]. 楊濤,徐青元,孫恩成,馮瑜菲,李俊平,孫亮,孫晶,吳東來. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2014(02)
[8]加強流浪狗管理 有效預(yù)防狂犬病發(fā)生[J]. 容應(yīng)平. 畜牧與飼料科學(xué). 2013(11)
[9]犬咬傷患者的心理分析及護理[J]. 張愛珍,張英,盛振東. 中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)). 2012(27)
[10]狂犬病的實驗室診斷[J]. 姚真藍,黃國慶. 國外畜牧學(xué)(豬與禽). 2012(07)
博士論文
[1]狂犬病病毒誘導(dǎo)人和鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞自噬的研究[D]. 彭嬌嬌.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]野毒株狂犬病毒逃避樹突狀細胞識別的機制[D]. 楊洋.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]?袢〉牟《救蚪M序列分析及病理學(xué)研究[D]. 尹景峰.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]我國狂犬病流行毒株馴化及高效佐劑疫苗研究[D]. 劉曄.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2012
[5]狂犬病病毒BD06株生物學(xué)特性鑒定及反向遺傳系統(tǒng)的建立[D]. 潘鐵驪.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2011
[6]狂犬病病毒CTN株反向遺傳系統(tǒng)的建立[D]. 黃瑩.吉林大學(xué) 2009
碩士論文
[1]狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的研究[D]. 許永青.吉林大學(xué) 2017
[2]重組病毒rCVS-11-G免疫原的制備及其實驗免疫研究[D]. 張渭蛟.吉林大學(xué) 2016
[3]中國不同地域分布的狂犬病病毒種群及其流行進化特征研究[D]. 李木麗.桂林醫(yī)學(xué)院 2016
[4]2009-2012年內(nèi)蒙古地區(qū)狂犬病病毒分離與遺傳變異分析[D]. 周微微.東北林業(yè)大學(xué) 2016
[5]狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組及與N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定[D]. 涂忠忠.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2015
[6]狂犬病病毒M蛋白與細胞傳播性相關(guān)的功能位點分析[D]. 鐘一治.廣西大學(xué) 2015
[7]豬偽狂犬病毒GDHD-1株的分離鑒定與致病性研究[D]. 王鳳求.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[8]表達RV ERA株G蛋白重組新城疫病毒的構(gòu)建及免疫原性研究[D]. 馬良.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[9]2007年四川省狂犬病高發(fā)地區(qū)犬只帶毒率與發(fā)病關(guān)系的研究[D]. 王新偉.瀘州醫(yī)學(xué)院 2009
[10]狂犬病基因抗原的制備及抗體監(jiān)測ELISA方法的建立[D]. 羅明.吉林大學(xué) 2005
本文編號:3700493
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
縮略詞表 Abbreviations
第一章 文獻綜述 狂犬病疫苗的研究進展
1 狂犬病毒的結(jié)構(gòu)
1.1 狂犬病毒基因組結(jié)構(gòu)及蛋白功能
1.2 狂犬病毒糖蛋白對免疫的影響
1.3 狂犬病毒的分型
1.4 狂犬病的診斷及防治
2 狂犬疫苗的種類
2.1 傳統(tǒng)弱毒活疫苗
2.2 基因工程疫苗
3 狂犬疫苗的研制方法
3.1 反向遺傳學(xué)在疫苗研制中的應(yīng)用
3.2 新型基因編輯技術(shù)在疫苗研制中的應(yīng)用
4 結(jié)語
參考文獻
第二章 試驗研究 狂犬病毒基因位點突變與細胞適應(yīng)性的相關(guān)性研究
前言
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 病料的采集及處理
2.2 狂犬病毒的分離與鑒定
2.3 狂犬病毒基因的擴增與測序
2.4 狂犬病毒的同源性分析
2.5 狂犬病毒在動物和細胞中的傳代與適應(yīng)
2.6 狂犬病毒弱化后的同源性分析
2.7 狂犬病毒弱化后基因突變的檢測
2.8 R83K和P367S重組病毒的拯救
3 討論
3.1 利用組織適應(yīng)毒研究狂犬病毒的細胞適應(yīng)性
3.2 CNIM1701和CNIM1702的同源性分析
3.3 狂犬病毒細胞適應(yīng)性與致病力的相關(guān)性
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞傳代培養(yǎng)法檢測狂犬病毒PV-2061株限度的研究[J]. 姚宇,張景海,李鶴,謝花. 醫(yī)藥前沿. 2017 (28)
[2]疫苗市場概況分析[J]. 李敏. 中國生物工程雜志. 2017(01)
[3]呼和浩特市地區(qū)奶?袢『腿袢〉脑\斷及病毒N基因的遺傳演化分析[J]. 王金玲,田曉靈,丁玉林,王文瑞. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2015(04)
[4]一顆致命的“子彈”——狂犬病[J]. 張弼. 農(nóng)家書屋. 2015(07)
[5]中國2012年狂犬病流行特征分析[J]. 周航,李昱,牟笛,殷文武,余宏杰. 中華流行病學(xué)雜志. 2015 (03)
[6]反向遺傳操作技術(shù)的發(fā)展及趨勢[J]. 唐雷,葛俊偉,韓雪,劉志鵬. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2014(03)
[7]藍舌病病毒反向遺傳操作系統(tǒng)的建立[J]. 楊濤,徐青元,孫恩成,馮瑜菲,李俊平,孫亮,孫晶,吳東來. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2014(02)
[8]加強流浪狗管理 有效預(yù)防狂犬病發(fā)生[J]. 容應(yīng)平. 畜牧與飼料科學(xué). 2013(11)
[9]犬咬傷患者的心理分析及護理[J]. 張愛珍,張英,盛振東. 中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)). 2012(27)
[10]狂犬病的實驗室診斷[J]. 姚真藍,黃國慶. 國外畜牧學(xué)(豬與禽). 2012(07)
博士論文
[1]狂犬病病毒誘導(dǎo)人和鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞自噬的研究[D]. 彭嬌嬌.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]野毒株狂犬病毒逃避樹突狀細胞識別的機制[D]. 楊洋.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]?袢〉牟《救蚪M序列分析及病理學(xué)研究[D]. 尹景峰.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]我國狂犬病流行毒株馴化及高效佐劑疫苗研究[D]. 劉曄.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2012
[5]狂犬病病毒BD06株生物學(xué)特性鑒定及反向遺傳系統(tǒng)的建立[D]. 潘鐵驪.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2011
[6]狂犬病病毒CTN株反向遺傳系統(tǒng)的建立[D]. 黃瑩.吉林大學(xué) 2009
碩士論文
[1]狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的研究[D]. 許永青.吉林大學(xué) 2017
[2]重組病毒rCVS-11-G免疫原的制備及其實驗免疫研究[D]. 張渭蛟.吉林大學(xué) 2016
[3]中國不同地域分布的狂犬病病毒種群及其流行進化特征研究[D]. 李木麗.桂林醫(yī)學(xué)院 2016
[4]2009-2012年內(nèi)蒙古地區(qū)狂犬病病毒分離與遺傳變異分析[D]. 周微微.東北林業(yè)大學(xué) 2016
[5]狂犬病病毒粒子的蛋白質(zhì)組及與N和P蛋白互作宿主蛋白的鑒定[D]. 涂忠忠.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2015
[6]狂犬病病毒M蛋白與細胞傳播性相關(guān)的功能位點分析[D]. 鐘一治.廣西大學(xué) 2015
[7]豬偽狂犬病毒GDHD-1株的分離鑒定與致病性研究[D]. 王鳳求.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[8]表達RV ERA株G蛋白重組新城疫病毒的構(gòu)建及免疫原性研究[D]. 馬良.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[9]2007年四川省狂犬病高發(fā)地區(qū)犬只帶毒率與發(fā)病關(guān)系的研究[D]. 王新偉.瀘州醫(yī)學(xué)院 2009
[10]狂犬病基因抗原的制備及抗體監(jiān)測ELISA方法的建立[D]. 羅明.吉林大學(xué) 2005
本文編號:3700493
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