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黃連及其單體對(duì)S.suis生物被膜luxS基因及毒力因子的影響

發(fā)布時(shí)間:2022-10-29 18:01
  豬鏈球菌是引起豬包括腦膜炎、敗血癥、心內(nèi)膜炎、關(guān)節(jié)炎、肺炎等威脅生命疾病的重要病原。根據(jù)莢膜多糖抗原的不同,豬鏈球菌分為35個(gè)血清型(1-34,1/2),其中豬鏈球菌2型是最常見、毒力最強(qiáng)的血清型菌株。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為,豬鏈球菌在動(dòng)物體內(nèi)外可以形成生物被膜(biofilm,BF),生物被膜作為細(xì)菌的一種重要生存方式,受多種因素的影響和調(diào)節(jié)。其中,群體密度感應(yīng)(quorum sensing,QS)現(xiàn)象就是近年來發(fā)現(xiàn)的對(duì)生物被膜產(chǎn)生重要作用的影響因素之一。QS即細(xì)菌通過自身產(chǎn)生的信號(hào)分子進(jìn)行交流和協(xié)調(diào)群體行為的過程,與QS現(xiàn)象有關(guān)的種間QS信號(hào)系統(tǒng)由luxS基因編碼的AI-2信號(hào)分子介導(dǎo)完成。LuxS/AI-2不僅影響豬鏈球菌生物被膜的形成,而且影響細(xì)菌毒力因子的表達(dá)。干預(yù)豬鏈球菌的QS系統(tǒng)有可能成為未來研發(fā)抗微生物藥物的重要策略。 本試驗(yàn)通過建立豬鏈球菌體外生物被膜模型,應(yīng)用結(jié)晶紫染色、菌落計(jì)數(shù)、掃描電鏡等方法研究黃連水提物及單體鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀和鹽酸藥根堿對(duì)生物被膜形成的干預(yù)作用。結(jié)果表明亞MIC的鹽酸小檗堿與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),黃連水提物、鹽... 

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 細(xì)菌生物被膜的研究進(jìn)展
        1.1.1 細(xì)菌生物被膜的概況
        1.1.2 生物被膜的檢測(cè)方法
    1.2 QS系統(tǒng)與毒力基因的關(guān)系
        1.2.1 豬鏈球菌2型AI-2 luxS基因的研究進(jìn)展
        1.2.2 豬鏈球菌2型毒力基因的研究進(jìn)展
    1.3 黃連的研究進(jìn)展
        1.3.1 黃連的理化性質(zhì)
        1.3.2 黃連的藥理作用研究
    1.4 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        2.1.2 藥物及材料
    2.2 方法
        2.2.1 黃連水提物的制備
        2.2.2 黃連水提物及其單體最低抑菌濃度的測(cè)定
        2.2.3 豬鏈球菌生物被膜體外模型的建立
        2.2.4 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌生物被膜的體外干預(yù)作用
        2.2.5 豬鏈球菌生物被膜內(nèi)的活菌計(jì)數(shù)
        2.2.6 豬鏈球菌生物被膜形態(tài)的SEM檢測(cè)
        2.2.7 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌生物被膜信號(hào)分子和毒力基因的影響
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌的MIC
    3.2 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌生物被膜的干預(yù)作用
    3.3 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌生物被膜內(nèi)菌數(shù)的影響
    3.4 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌生物被膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響
    3.5 黃連水提物及其單體對(duì)luxS的影響
    3.6 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌毒力基因的影響
        3.6.1 黃連水提物及其單體對(duì)cps的影響
        3.6.2 黃連水提物及其單體對(duì)gdh的影響
        3.6.3 黃連水提物及其單體對(duì)fbps的影響
        3.6.4 黃連水提物及其單體對(duì)mrp的影響
        3.6.5 黃連水提物及其單體對(duì)ef的影響
        3.6.6 黃連水提物及其單體對(duì)sly的影響
        3.6.7 黃連水提物及其單體對(duì)gapdh的影響
4 討論
    4.1 黃連水提物及其單體對(duì)生物被膜的影響
    4.2 黃連水提物及其單體對(duì)luxS作用的探討
    4.3 黃連水提物及其單體對(duì)豬鏈球菌毒力因子作用的探討
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]禽致病性大腸桿菌安徽分離株luxS和pfs基因的克隆、表達(dá)與細(xì)胞外合成AI-2活性檢測(cè)[J]. 韓先干,白灝,劉蕾,陳文靜,丁鏟,胡青海,祁克宗,于圣青.  微生物學(xué)報(bào). 2012(09)
[3]魚腥草水提液對(duì)銅綠假單胞菌生物被膜的影響及與阿奇霉素的抗菌協(xié)同作用[J]. 程惠娟,汪長(zhǎng)中,汪海波,黃錦亮,顏真波.  時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2012(07)
[4]小檗堿苦參堿抗外陰陰道念珠菌病混合菌生物被膜形成作用研究[J]. 解光艷,汪長(zhǎng)中,朱玲玲,孫振新,張幸福,張海翔,程惠娟.  安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(02)
[5]鹽酸小檗堿影響表皮葡萄球菌形成生物被膜差異蛋白的篩選[J]. 廖璞,馬永鵬,吳清.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2011(15)
[6]細(xì)菌生物被膜鑒定方法的研究進(jìn)展[J]. 胡錦松,陳豪泰,張杰,劉永生,徐志文,朱玲,徐凱,年陽陽,古峰.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2010(11)
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[9]鹽酸小檗堿對(duì)表皮葡萄球菌生物被膜形成及相關(guān)基因表達(dá)的抑制作用[J]. 何敏,廖璞,尹一兵,左幟健.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(19)
[10]掃描電子顯微鏡在植物分類學(xué)中的應(yīng)用[J]. 唐曉山,陳燕.  哈爾濱職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(05)

博士論文
[1]豬鏈球菌2型LuxS/AI-2型密度感應(yīng)系統(tǒng)研究[D]. 韓先干.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008

碩士論文
[1]中藥影響表皮葡萄球菌形成生物被膜關(guān)鍵基因的機(jī)制研究[D]. 何敏.重慶醫(yī)科大學(xué) 2008



本文編號(hào):3698163

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