為同時快速篩查豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus, TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）以及豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV2）3種可致豬腹瀉的豬病病原,本研究基于微芯片技術(shù),針對3種病毒特異性基因分別建立微量實時熒光（RT-）PCR檢測體系,并將其組合在微芯片上。結(jié)果顯示,該方法可特異性檢出以上3種病毒核酸,但不能檢出本實驗室保存的其他5種豬病病毒核酸,而且相互之間無交叉反應(yīng);靈敏度試驗顯示TGEV和PEDV檢測靈敏度均可達到1TCID₅₀/0.1 mL,對于含PCV2全基因組質(zhì)粒,檢測極限為41 fg/μL。對237份送檢樣品的檢測結(jié)果顯示,PEDV和PCV2檢出率分別為0.8%和7.2%,但未檢出TGEV,與常規(guī)管式熒光（RT-）PCR檢測結(jié)果一致。該項技術(shù)可大大降低篩查的試劑成本,因為每個反應(yīng)池只需要1.2μL的（RT-）PCR試劑混合物,而且比傳統(tǒng)的實時（RT-）PCR系統(tǒng)的熱平衡和熱均勻... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 實驗材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 病毒核酸及被檢樣品
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要設(shè)備
    1.2 實驗方法
        1.2.1 引物的設(shè)計合成
        1.2.2 微芯片上樣檢測
        1.2.3 靈敏度試驗
        1.2.4 特異性試驗
        1.2.5 送檢樣品的檢測
2 實驗結(jié)果
    2.1 反應(yīng)體系優(yōu)化結(jié)果
    2.2 靈敏度試驗結(jié)果
    2.3 特異性試驗結(jié)果
    2.4 對送檢樣品的檢測結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬傳染性胃腸炎病毒與豬呼吸道冠狀病毒熒光RT-PCR鑒別檢測方法建立與應(yīng)用[J]. 王慧珊,高志強,王金寶,張鶴曉,喬彩霞,吳亞瓊,邢佑尚,朱淑芬.  中國動物檢疫. 2011(10)



本文編號：3698108