仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)的一類常見疾病,嚴(yán)重阻礙養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。引起仔豬腹瀉的病因復(fù)雜多樣,如非傳染性病因和傳染性病原感染等,其中以細(xì)菌和病毒感染較為常見,而且病原種類多,病情復(fù)雜,發(fā)病率高。為深入了解北京地區(qū)規(guī)�；i場仔豬腹瀉病原流行狀況,本研究對2010年8月至2013年12月期間采集的400份腹瀉樣本進(jìn)行病毒和細(xì)菌檢測,并進(jìn)一步對本實(shí)驗分離的大腸桿菌和輪狀病毒的生物學(xué)特性進(jìn)行研究： 從采集的400份仔豬腹瀉樣本中成功分離到132株細(xì)菌,經(jīng)生化特性檢測和16S rRNA基因序列分析,分屬于16個細(xì)菌種。相關(guān)病毒抗原PCR檢測結(jié)果顯示：豬流行性腹瀉病毒（PEDV）陽性樣本23份,豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）6份,豬輪狀病毒（RV）58份,總計87份。其中,RV陽性率最高,為66.7%。采用膠體金法對部分時段的輪狀病毒抗原調(diào)查結(jié)果顯示,仔豬RV感染陽性率為17.7%,且每年的12月和次年1月份感染率最高,可達(dá)40%。0～7日齡仔豬易感,感染率為30.6%。 用輪狀病毒抗原陽性病料接種Marc-145細(xì)胞,成功分離到一株輪狀病毒。在細(xì)胞培養(yǎng)中可引起細(xì)胞病變。采用抗輪狀病毒特異性血清進(jìn)... 

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

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Abstract
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圖表清單
第一章 引言
    1.1 文獻(xiàn)綜述
        1.1.1 規(guī)�；i場仔豬腹瀉的病原概述
        1.1.2 仔豬源大腸桿菌
        1.1.3 豬輪狀病毒
    1.2 本課題的研究內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.2.1 研究內(nèi)容
        1.2.2 技術(shù)路線
        1.2.3 論文選題的意義和目的
第二章 北京地區(qū)規(guī)模化豬場仔豬腹瀉相關(guān)病原調(diào)查
    2.1 試驗材料
        2.1.1 調(diào)查范圍
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 相關(guān)溶液的配制
        2.1.4 主要儀器
    2.2 試驗方法
        2.2.1 病例來源及檢測
        2.2.2 細(xì)菌學(xué)檢測
        2.2.3 病毒學(xué)檢測
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 細(xì)菌學(xué)檢測
        2.3.2 病毒學(xué)檢測
        2.3.3 混合感染檢測
    2.4 討論與分析
        2.4.1 細(xì)菌性仔豬腹瀉
        2.4.2 病毒性仔豬腹瀉
第三章 北京地區(qū)仔豬大腸桿菌生物學(xué)特性及其毒力因子檢測
    3.1 試驗材料
        3.1.1 分離毒株及參考毒株
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 相關(guān)溶液的配制
        3.1.4 主要儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 細(xì)菌分離及純化
        3.2.2 待檢菌株的生化鑒定
        3.2.3 大腸桿菌O血清型鑒定
        3.2.4 大腸桿菌主要毒力因子檢測
    3.3 試驗結(jié)果
        3.3.1 大腸桿菌的培養(yǎng)特性與形態(tài)特征
        3.3.2 大腸桿菌生化特性
        3.3.3 血清型鑒定
        3.3.4 毒力因子檢測
    3.4 討論與分析
        3.4.1 仔豬致病性大腸桿菌的血清型
        3.4.2 仔豬致病性大腸桿菌的毒力因子
第四章 仔豬腹瀉大腸桿菌全基因組測序及分析
    4.1 試驗材料
        4.1.1 分離毒株及參考毒株
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 相關(guān)溶液的配制
        4.1.4 主要儀器
    4.2 試驗方法
        4.2.1 細(xì)菌分離及純化
        4.2.2 細(xì)菌基因組提取
        4.2.3 細(xì)菌測序方法
        4.2.4 基因組序列拼接及質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)
        4.2.5 基因預(yù)測和注釋
        4.2.6 基因組多序列比對
        4.2.7 兩株細(xì)菌膜蛋白功能相關(guān)基因比較
    4.3 試驗結(jié)果
        4.3.1 基因組拼接結(jié)果統(tǒng)計
        4.3.2 兩株細(xì)菌比較特異基因分析
        4.3.3 兩株細(xì)菌ORF注釋及基因功能分析
        4.3.4 兩株細(xì)菌SNP和InDel分析
        4.3.5 基因組多序列比對分析
        4.3.6 兩株細(xì)菌膜蛋白基因分析
    4.4 討論與分析
第五章 北京地區(qū)豬輪狀病毒感染的流行病學(xué)調(diào)查
    5.1 試驗材料
        5.1.1 調(diào)查范圍
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 相關(guān)溶液的配制
        5.1.4 主要儀器
    5.2 試驗方法
        5.2.1 病例來源及檢測
        5.2.2 病豬的臨床癥狀
        5.2.3 病豬的病理變化觀察
        5.2.4 病豬的病理組織學(xué)觀察
    5.3 豬輪狀病毒感染的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果
        5.3.1 豬輪狀病毒感染的發(fā)病季節(jié)及發(fā)病日齡調(diào)查
        5.3.2 豬輪狀病毒感染的臨床癥狀
        5.3.3 豬輪狀病毒感染的病理變化
        5.3.4 豬輪狀病毒感染的病理組織學(xué)觀察
    5.4 討論與分析
第六章 北京地區(qū)豬輪狀病毒的分離、鑒定及致病性研究
    6.1 試驗材料
        6.1.1 細(xì)胞及病料來源
        6.1.2 主要試劑
        6.1.3 相關(guān)溶液的配制
        6.1.4 主要儀器
    6.2 試驗方法
        6.2.1 病料的采集
        6.2.2 病毒的分離培養(yǎng)
        6.2.3 病毒的鑒定
        6.2.4 對仔豬致病性試驗
    6.3 試驗結(jié)果
        6.3.1 輪狀病毒的分離
        6.3.2 輪狀病毒的鑒定
        6.3.3 輪狀病毒感染仔豬試驗
    6.4 討論與分析
        6.4.1 病料的采集時間
        6.4.2 胰酶濃度摸索
        6.4.3 細(xì)胞超薄切片電鏡觀察
        6.4.4 豬輪狀病毒基因序列測定與比對
第七章 總結(jié)
    7.1 結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄：菌株B中69個特有參與膜轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因序列
致謝
個人簡歷



本文編號：3689622