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鴨病毒性肝炎病毒PCR-ELISA檢測方法建立及VP1-IL-2融合基因的原核表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2022-10-03 16:57
  近幾年,由于鴨病毒性肝炎(DVH)傳播快、致病性強(qiáng)、血清型變異多,嚴(yán)重制約了養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展。目前,檢測該病最常用方法為聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。但這些方法存在著操作繁瑣,耗時(shí),敏感性低,準(zhǔn)確性差等不足。因此建立一種能夠應(yīng)用于檢測的DVH樣本快速、簡便、標(biāo)準(zhǔn)化的檢測技術(shù)迫在眉睫。 本世紀(jì)初就有人提出PCR-ELISA方法的研究。該方法結(jié)合了PCR和ELISA,并引入特異性探針,在有效的簡化了操作步驟的同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行定性、定量分析,大大提高了檢測結(jié)果的敏感性與特異性。PCR-ELISA技術(shù)在病毒分型,致病菌檢測,克隆鑒定及分子生物學(xué)研究等方面有其獨(dú)特的優(yōu)勢,如能將其應(yīng)用于檢測DVH,具有一定的研究意義及推廣價(jià)值。 世界范圍內(nèi)均有不同程度鴨病毒性肝炎疾病存在,目前本病還沒有特效治療藥物。隨著DHV的不斷變異以及DHV分子生物學(xué)與基因工程技術(shù)的迅猛發(fā)展,從安全性、高效性等方面來考慮,研究推廣基因工程疫苗將會(huì)有很好的前景。白細(xì)胞介素-2是眾所周知的具有免疫治療、免疫增強(qiáng)、免疫預(yù)防作用的細(xì)胞因子,迄今已有大量的實(shí)驗(yàn)報(bào)道,將IL-2應(yīng)用于治療動(dòng)物性疾病的報(bào)到中... 

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 鴨病毒性肝炎的研究進(jìn)展
        1.1 診斷方法
        1.2 疫苗防控
    第二章 PCR-ELISA 技術(shù)的研究進(jìn)展
        2.1 病毒檢測
        2.2 致病菌檢測
        2.3 寄生蟲檢測
    第三章 白細(xì)胞介素-2 的研究進(jìn)展
        3.1 IL-2 作為免疫佐劑
        3.2 IL-2 在疾病防治中的應(yīng)用
研究的目的與意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 鴨病毒性肝炎病毒培養(yǎng)及鑒定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 DHV PCR-ELISA 檢測方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 VP1-IL-2 融合基因的原核表達(dá)
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鴨病毒性肝炎的診斷與防治[J]. 孫麗霞,曹勇芳.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2013(04)
[2]Evaluation of PCR-ELISA as a tool for monitoring transmission of Wuchereria bancrofti in District of Gampaha,Sri Lanka[J]. Asha Dilrukshi Wijegunawardana,Nilmini Silva Gunawardane,Chanditha Hapuarachchi,Aresha Manamperi,Kithsiri Gunawardena,Wimaladharma Abeyewickrama.  Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2013(05)
[3]鴨病毒性肝炎診斷的研究進(jìn)展[J]. 劉艷萍,高云航,徐鳳宇,馬紅霞.  中國畜牧獸醫(yī). 2013(02)
[4]豬鏈球菌2型PCR-ELISA檢測方法的建立與優(yōu)化[J]. 方勤美,朱繼昌,池洪樹,林天龍.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(12)
[5]空腸彎曲桿菌PCR-ELISA檢測方法的建立[J]. 唐夢(mèng)君,周生,張小燕,唐修君,蒲俊華,高玉時(shí).  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(03)
[6]鴨病毒性肝炎的防治[J]. 陳曉明.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2012(02)
[7]禽流感病毒RT-PCR ELISA診斷方法的建立[J]. 楊少華,胡北俠,許傳田,顏士敢,張琳,黃艷艷,張秀美.  中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2012(02)
[8]豬白細(xì)胞介素2/6嵌合基因的融合表達(dá)及活性[J]. 閆若潛,馬文濤,吳志明,王東方,李桂喜,劉梅芬,張盼盼,黃清.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(01)
[9]PCR-EIA技術(shù)的研究進(jìn)展及應(yīng)用[J]. 張奇舒,修冰水,張賀秋,謝寶貴.  生物技術(shù)通訊. 2011(06)
[10]Ⅰ型鴨肝炎病毒間接ELISA方法的建立[J]. 孫鳳萍,高駿,胡建華,王勝昌,高誠.  上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(04)

博士論文
[1]鴨病毒性肝炎弱毒疫苗(A66株)的研制[D]. 張小飛.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]單核細(xì)胞增多性李斯特菌PCR和PCR-ELISA檢測方法的建立[D]. 譚炳乾.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]鴨白細(xì)胞介素2配體與受體alpha的研究[D]. 王金勇.浙江大學(xué) 2006

碩士論文
[1]Ⅰ型鴨肝炎病毒RNA聚合酶(RdRp)的基因克隆、表達(dá)及其亞細(xì)胞定位分析[D]. 王超.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]花生DGAT2基因的原核表達(dá)與亞細(xì)胞定位研究[D]. 李蘭.山東師范大學(xué) 2012
[3]牛傳染性鼻氣管炎病毒gD基因原核表達(dá)及間接ELISA檢測方法的建立[D]. 陳婷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[4]鴨疫里默氏桿菌OmpA與鴨IL-2融合基因的克隆與原核表達(dá)[D]. 劉佳麗.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]鴨肝炎病毒的分離鑒定及ELISA檢測抗原、抗體方法的建立[D]. 韓永俊.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào):3684459

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