蒙古馬是世界上古老的品種,也是優(yōu)秀的地方品種。通過冷凍精液人工授精技術(shù)可以加快蒙古馬提純復(fù)壯及提高本品種選育進程。由于農(nóng)業(yè)機械化的推進及國內(nèi)對馬繁殖技術(shù)關(guān)注度的下降,目前還沒有人對蒙古馬精子的冷凍保存方法進行過系統(tǒng)的研究,仍未探索到一種成熟有效并可推廣到生產(chǎn)實踐中的冷凍保存技術(shù)程序。為了研究出在實際生產(chǎn)中能夠推廣應(yīng)用的蒙古馬精液冷凍保存方法,進一步完善蒙古馬冷凍精液品質(zhì),本研究對蒙古馬精液冷凍程序及冷凍保護液配方的進行了優(yōu)化,同時,使用最優(yōu)冷凍保護液配方和冷凍保護程序?qū)γ晒篷R精液進行了冷凍,并開展了人工授精受胎率驗證試驗,其結(jié)果如下:（1）將蒙古馬精子置于不同滲透壓（30、50、100、200、240、300、360、420、480、550、600mOsm/kg）的鹽水溶液中孵育后,測定其前進運動精子百分比（PM）和精子質(zhì)膜完整率（MI）。結(jié)果顯示,蒙古馬精子滲透壓耐受范圍為200～400mOsm/kg,從此滲透壓再回到等滲狀態(tài)時,其活力是可以恢復(fù)的,而滲透壓超出這一范圍其活力恢復(fù)能力降低。2)比較了沉降離心法之不同離心力和離心時間（400 g,15 min;600 g,10 min;... 

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
引言
1 文獻綜述
    1.1 馬精液冷凍保存的研究進展
    1.2 馬精液冷凍保存中存在的問題
    1.3 AI在國內(nèi)外的使用狀況
    1.4 AI使用效率低下的原因
    1.5 馬精液冷凍保存損傷機制
        1.5.1 機械損傷
        1.5.2 氧化損傷
    1.6 影響馬精液冷凍保存質(zhì)量的因素
        1.6.1 外觀
        1.6.2 精液量
        1.6.3 精液密度
        1.6.4 精清
        1.6.5 離心
        1.6.6 滲透壓
        1.6.7 降溫速率
        1.6.8 平衡時間
        1.6.9 解凍程序
    1.7 馬精液冷凍保存液的主要成分
        1.7.1 冷凍保護劑
        1.7.2 卵黃
        1.7.3 糖類
        1.7.4 抗氧化劑
    1.8 馬精液品質(zhì)常用測定指標
        1.8.1 精子活率
        1.8.2 精子形態(tài)
        1.8.3 頂體完整率
        1.8.4 質(zhì)膜完整率
        1.8.5 線粒體膜電位
        1.8.6 抗氧化能力
2 蒙古馬細管精液冷凍程序的優(yōu)化研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 馬冷凍精液的制作
        2.1.4 試驗設(shè)計
        2.1.5 精子質(zhì)量評價
        2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 滲透壓對蒙古馬精液冷凍保存效果的影響
        2.2.2 不同離心方法去除精清對蒙古馬精液冷凍質(zhì)量及精子損失率的影響
        2.2.3 不同平衡時間對蒙古馬精液冷凍保存效果的影響
        2.2.4 不同降溫速率對蒙古馬精液冷凍保存效果的影響
    2.3 討論
        2.3.1 滲透壓對蒙古馬精液冷凍保存效果的影響
        2.3.2 不同離心方法去除精清對蒙古馬精液冷凍質(zhì)量及精子損失率的影響
        2.3.3 不同平衡時間對蒙古馬精液冷凍保存效果的影響
        2.3.4 不同降溫速率對蒙古馬精液冷凍保存效果的影響
    2.4 結(jié)論
3 冷凍保護液不同成分對蒙古馬細管精液冷凍效果的研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗動物的選擇
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 馬冷凍精液的制作
        3.1.4 試驗設(shè)計
        3.1.5 精子質(zhì)量評價
        3.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 不同濃度gly和DMF對馬精子冷凍效果的影響
        3.2.2 不同濃度卵黃、LDL對蒙古馬精子低溫保存及冷凍效果的影響
        3.2.3 不同糖類組合對馬精子低溫保存效果的影響
    3.3 討論
        3.3.1 不同濃度gly和DMF對馬精子冷凍效果的影響
        3.3.2 不同濃度卵黃、LDL對蒙古馬精子低溫保存及冷凍效果的影響
        3.3.3 不同糖類組合對馬精子低溫保存效果的影響
    3.4 結(jié)論
4 不同抗氧化劑對蒙古馬精液品質(zhì)的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗動物的選擇
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 馬冷凍精液的制作
        4.1.4 試驗設(shè)計
        4.1.5 精子質(zhì)量評價
        4.1.6 統(tǒng)計分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 不同抗氧化劑對冷凍-解凍后馬精子質(zhì)量的影響
        4.2.2 不同抗氧化劑對蒙古馬精液中抗氧化相關(guān)指標的影響
    4.3 討論
    4.4 結(jié)論
5 蒙古馬細管精液冷凍保護液的驗證
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗動物的選擇
        5.1.2 稀釋液的制備
        5.1.3 精液的采集
        5.1.4 精液的處理
        5.1.5 精液的冷凍及解凍
        5.1.6 試驗設(shè)計
        5.1.7 母馬的管理和人工授精
        5.1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 凍后活力均值
        5.2.2 受胎率驗證
    5.3 討論
        5.3.1 輸精方法對受胎率的影響
        5.3.2 不同種公馬精液對受胎率的影響
        5.3.3 不同精子活力對受胎率的影響
    5.4 小結(jié)
6 結(jié)論
7 研究創(chuàng)新點
致謝
附錄
作者簡介
參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Sperm pretreatment with glutathione improves IVF embryos development through increasing the viability and antioxidative capacity of sex-sorted and unsorted bull semen[J]. HU Ting-xi,ZHU Hua-bin,SUN Wei-jun,HAO Hai-sheng,ZHAO Xue-ming,DU Wei-hua,WANG Zong-li.  Journal of Integrative Agriculture. 2016(10)



本文編號：3683894