脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）在飼料、飼料原料中的污染嚴(yán)重。DON可作用于免疫系統(tǒng),其能引起免疫細(xì)胞的氧化損傷。硒有著抗氧化的功能。本研究使用RNAi技術(shù)建立GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞,通過單獨/聯(lián)合添加脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）、亞硒酸鈉（Na₂SeO₃）,探究DON致GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞氧化損傷作用,Na₂SeO₃對DON致GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用進(jìn)而探究硒是否是通過硒蛋白GPx1拮抗DON毒性。方法:（1）GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞的建立:應(yīng)用RNAi、流式細(xì)胞術(shù)、qPCR和Western Blot技術(shù)建立GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞。（2）抗氧化指標(biāo)的檢測:試驗分為11組,分別為D1（DON 824 ng/mL）,D2（DON 412 ng/mL）,D3（DON206 ng/mL）,D4（DON 103 ng/mL）,S（Na₂SeO₃ 2μmol/L）,SD1（Na₂

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的毒性及其機制研究進(jìn)展
        1.1.1 DON的理化性質(zhì)
        1.1.2 DON的污染情況
        1.1.3 DON誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激及機制
        1.1.4 DON對脾臟的損傷
    1.2 硒的抗氧化作用
        1.2.1 微量元素硒的概述及硒的抗氧化作用
        1.2.2 硒蛋白GPx1的抗氧化作用
        1.2.3 添加硒對細(xì)胞或機體內(nèi)的硒蛋白GPx1的影響
    1.3 RNA干擾技術(shù)及其應(yīng)用
    1.4 研究目的意義
第二章 體外GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞的建立
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 豬脾臟淋巴細(xì)胞懸液制備
        2.2.2 GPx1敲低型豬脾淋巴細(xì)胞的建立
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 GPx1-siRNA在豬脾臟淋巴細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率
        2.3.2 GPx1mRNA相對表達(dá)量檢測
        2.3.3 GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞中GPx1蛋白的表達(dá)
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對豬脾臟淋巴細(xì)胞GPx1敲低模型抗氧化功能的影響
    3.1 試驗材料
        3.1.1 試驗?zāi)Ｐ?br>        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 主要試劑
    3.2 試驗方法
        3.2.1 樣品分組及處理
        3.2.2 檢測指標(biāo)及方法
    3.3 數(shù)據(jù)分析
    3.4 試驗結(jié)果
        3.4.1 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞H_2O_2含量的影響
        3.4.2 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞MDA含量的影響
        3.4.3 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞SOD活性的影響
        3.4.4 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞CAT活性的影響
        3.4.5 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞GSH含量的影響
        3.4.6 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞T-AOC的影響
        3.4.7 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞抑制羥自由基能力的影響
        3.4.8 DON及Na_2SeO_3單獨或聯(lián)合作用對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞ROS含量的影響
    3.5 討論
        3.5.1 敲低GPx1對豬脾臟淋巴細(xì)胞抗氧化功能的影響
        3.5.2 DON對GPx1敲低型淋巴細(xì)胞的氧化損傷及抗氧化功能的影響
        3.5.3 Na_2SeO_3對GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞自身氧化損傷的保護(hù)作用
        3.5.4 Na_2SeO_3對DON致GPx1敲低型豬脾臟淋巴細(xì)胞氧化損傷的抑制作用
    3.6 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3680260