為了解犬細小病毒病在上海地區(qū)各類犬中的流行與病毒遺傳變異情況,在全市范圍內(nèi)對流浪犬和家養(yǎng)犬進行了犬細小病毒的集中監(jiān)測。分別采集家養(yǎng)犬和流浪犬糞便樣品121份與675份,通過熒光定量PCR檢測病毒DNA,陽性率分別為9.10%和34.52%。將陽性病料處理后接種至貓腎傳代細胞（F81）,成功分離到4株犬細小病毒,對4株犬細小病毒的VP2基因測序,并結(jié)合GenBank中的相關(guān)序列進行遺傳演化分析,確定了這4株犬細小病毒分別屬于2c和2b亞型。選取了2c亞型犬細小病毒對其進行持續(xù)傳代,至其細胞病變與病毒增殖效率逐漸穩(wěn)定,將其純化后測定TCID₅₀,通過電鏡對病毒形態(tài)進行觀察。結(jié)果表明,純化后的病毒在電鏡下觀察呈現(xiàn)二十面體立體對稱,無囊膜,直徑20 nm左右,為典型細小病毒樣粒子,病毒滴度為10^7.0 TCID₅₀/mL。本研究結(jié)果為上海地區(qū)犬細小病毒病防控提供了依據(jù)。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病料采集與處理
    1.2 細胞系
    1.3 主要試劑
    1.4 犬細小病毒的檢測
        1.4.1 核酸提取
        1.4.2 熒光定量PCR
    1.5 病毒的分離與鑒定
        1.5.1 病毒的分離
        1.5.2 病毒的鑒定
    1.6 基因片段的cDNA克隆、鑒定和測序
    1.7 繪制系統(tǒng)發(fā)育樹
2 結(jié)果
    2.1 上海地區(qū)犬細小病毒病流行情況
    2.2 病毒分離和細胞病變
    2.3 病毒形態(tài)
    2.4 繪制系統(tǒng)發(fā)育樹以及氨基酸序列分析比較
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]淺述犬細小病毒病的臨床癥狀及防治[J]. 崔平,劉曉萌.  現(xiàn)代畜牧科技. 2018(11)
[2]犬細小病毒敦化株的分離與鑒定[J]. 任謂明,孫銘,葉明,趙丹.  中國獸醫(yī)雜志. 2017(09)
[3]犬細小病毒性腸炎的臨床癥狀、診斷與防控措施[J]. 孫豐蘭.  現(xiàn)代畜牧科技. 2017(04)
[4]犬細小病毒病的臨床癥狀和防治體會[J]. 李文莉.  畜禽業(yè). 2016(11)
[5]犬細小病毒SH14株的分離鑒定及其VP2基因的序列分析[J]. 唐井玉,李傳峰,戚偉強,賈仿闊,陳宗艷,王權(quán),王桂軍,劉光清.  中國獸醫(yī)科學. 2015(11)
[6]中國國內(nèi)首次檢測到犬細小病毒CPV-2c[J]. 張仁舟,楊松濤,馮昊,崔萇盛,夏咸柱.  中國病原生物學雜志. 2010(04)
[7]犬細小病毒病的病理學觀察[J]. 孫艷芳,扎西英派,辛國省,賈寧.  動物醫(yī)學進展. 2007(06)

碩士論文
[1]2014-2015年上海地區(qū)犬細小病毒分離鑒定及基因分型[D]. 唐井玉.安徽農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]犬細小病毒的分離鑒定及動物感染模型的建立[D]. 王珊.吉林大學 2012



本文編號：3677345