背景:研究表明外泌體具有促進骨再生的能力,但從胎牛血清中提取的外泌體是否可以促進骨形成仍存在爭議。目的:觀察胎牛血清外泌體對成骨細胞增殖能力的影響,從而為臨床治療骨破壞提供新思路。方法:通過超速離心法從胎牛血清中提取外泌體,采用透射電子顯微鏡和Western blot法驗證外泌體是否提取成功;然后用10 mg/L胎牛血清外泌體干預(yù)成骨前體細胞MC3T3-E1,通過CCK-8實驗檢測外泌體對成骨細胞增殖能力的影響,Western blot檢測外泌體對成骨細胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白表達的影響。以不含外泌體的胎牛血清培養(yǎng)的MC3T3-E1細胞為對照組。結(jié)果與結(jié)論:①胎牛血清外泌體具有典型的脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),大小在30-150 nm之間,外泌體表面標(biāo)記因子CD81表達呈陽性,而微囊表面標(biāo)記物CD40表達呈陰性;②外泌體組的增殖能力明顯高于對照組,差異有顯著性意義（P <0.05）;外泌體組成骨標(biāo)志性因子骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白的表達水平明顯高于對照組,差異有顯著性意義（P <0.05）;③結(jié)果表明,胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起促進作用,可為臨床治療骨破壞提供新思路。 

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【文章目錄】：
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文題釋義：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗細胞
        1.3.2 實驗儀器和試劑
    1.4 實驗方法
        1.4.1 外泌體提取
        1.4.2 透射電子顯微鏡觀察
        1.4.3 細胞培養(yǎng)
        1.4.4 實驗分組
        1.4.5 Western blot檢測相關(guān)蛋白表達量
        1.4.6 CCK-8實驗
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 透射電子顯微鏡觀察外泌體結(jié)構(gòu)
    2.2 Western blot檢測外泌體標(biāo)記性因子CD81及CD40的表達
    2.3 CCK-8法檢測胎牛血清外泌體干預(yù)后成骨細胞的增殖情況
    2.4 Western blot檢測胎牛血清外泌體干預(yù)后成骨細胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白的表達水平
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]外源性外泌體在細胞凋亡中的調(diào)控作用[J]. 李欣,楊作成.  中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(02)
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