本研究以21日齡早期斷奶仔豬為試驗(yàn)對(duì)象，研究了Ala-Gln對(duì)仔豬體液免疫及腸黏膜細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié)作用，并以仔豬小腸上皮細(xì)胞（IPEC-1）為模型探討了Ala-Gln對(duì)仔豬小腸上皮細(xì)胞增殖與凋亡的調(diào)控機(jī)制。試驗(yàn)一：Ala-Gln對(duì)斷奶仔豬外周血細(xì)胞因子、免疫器官細(xì)胞因子及T淋巴細(xì)胞亞群的調(diào)節(jié)作用本試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用遺傳背景和體重相近（6.7±0.9kg）、21±2日齡斷奶的長(zhǎng)白×大白去勢(shì)仔豬100頭，按完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)分為4處理，每個(gè)處理設(shè)5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭仔豬。各處理仔豬飼糧為在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上分別添加0%、0.15%、0.30%和0.45%Ala-Gln。試驗(yàn)期為21d。于試驗(yàn)第7、14、21d從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1頭接近平均體重的仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血并屠宰。采集外周血液及免疫器官用于測(cè)定細(xì)胞因子含量和外周T淋巴細(xì)胞亞群分布表達(dá)以探討Ala-Gln對(duì)斷奶仔豬體液免疫的影響。結(jié)果顯示，（1）飼糧中添加0.15%、0.30%Ala-Gln提高了仔豬斷奶后第7d血液中ALB、TP、免疫球蛋白IgA、IgG的含量（P<0.05），降低了COR的含量（P<0.05）；0.... 

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 研究的目的與意義
    2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        2.1 仔豬的免疫機(jī)制
            2.1.1 仔豬腸道黏膜免疫
            2.1.2 腸道黏膜屏障功能
                2.1.2.1 分泌型免疫球蛋白 A
                2.1.2.2 小腸上皮細(xì)胞
        2.2 早期斷奶對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響
            2.2.1 早期斷奶對(duì)仔豬免疫系統(tǒng)發(fā)育的影響
            2.2.2 早期斷奶對(duì)仔豬腸道黏膜免疫的影響
            2.2.3 早期斷奶對(duì)仔豬體液免疫和細(xì)胞免疫的影響
        2.3 Gln 及其二肽對(duì)斷奶仔豬免疫機(jī)能影響的研究進(jìn)展
            2.3.1 Gln 及其二肽對(duì)斷奶仔豬血液中免疫分子的影響
            2.3.2 Gln 及其二肽對(duì)斷奶仔豬腸道免疫的影響
            2.3.3 Gln 及其二肽對(duì)斷奶仔豬細(xì)胞因子的影響
    3 技術(shù)路線
第二章 試驗(yàn)研究
    試驗(yàn)一 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬外周血細(xì)胞因子、免疫器官細(xì)胞因子及 T 淋巴細(xì)胞亞群的調(diào)節(jié)作用
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料
            1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和分組
            1.3 試驗(yàn)日糧
            1.4 飼養(yǎng)管理
            1.5 樣品采集及預(yù)處理
            1.6 測(cè)定指標(biāo)與方法
                1.6.1 血清生化指標(biāo)
                1.6.2 血清中免疫球蛋白
                1.6.3 血清中細(xì)胞因子
                1.6.4 免疫器官指數(shù)及其細(xì)胞因子
                    1.6.4.1 免疫器官指數(shù)
                    1.6.4.2 免疫器官細(xì)胞因子
                1.6.5 外周血 T 淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量
        2 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
        3 結(jié)果與分析
            3.1 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響
            3.2 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白的影響
            3.3 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬血清細(xì)胞因子的影響
            3.4 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬免疫器官指數(shù)及其細(xì)胞因子含量的影響
            3.5 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬外周血液 T 淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量的影響
        4 討論
            4.1 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響
            4.2 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白的影響
            4.3 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬血清和免疫器官細(xì)胞因子的影響
            4.4 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬外周血液 T 淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量的影響
    試驗(yàn)二 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜固有層 SIgA 漿細(xì)胞數(shù)量、SIgA 及黏膜中細(xì)胞因子含量的影響
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料
            1.2 試驗(yàn)分組及日糧
            1.3 樣品采集及預(yù)處理
            1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法
                1.4.1 小腸黏膜固有層 SIgA 漿細(xì)胞數(shù)量
                    1.4.1.1 常規(guī)切片操作
                    1.4.1.2 羊抗豬 SIgA 抗體
                    1.4.1.3 小腸 SIgA 漿細(xì)胞的數(shù)量
                1.4.2 小腸黏膜 SIgA 含量
                1.4.3 小腸黏膜細(xì)胞因子含量
        2 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
        3 結(jié)果與分析
            3.1 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬小腸固有層 SIgA 漿細(xì)胞數(shù)量的影響
            3.2 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬空腸黏膜中 SIgA 含量的影響
            3.3 飼糧不同水平的 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜細(xì)胞因子的影響
        4 討論
            4.1 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬小腸固有層 SIgA 漿細(xì)胞分布及 SIgA 分泌量的影響
            4.2 Ala-Gln 對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜中細(xì)胞因子的影響
    試驗(yàn)三 Ala-Gln 對(duì)仔豬小腸上皮細(xì)胞凋亡的影響
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑
            1.2 主要儀器設(shè)備
            1.3 試驗(yàn)方法
                1.3.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)液
                1.3.2 試驗(yàn)細(xì)胞
                1.3.3 細(xì)胞的培養(yǎng)
                1.3.4 IPEC-1 細(xì)胞凋亡率檢測(cè)
                1.3.5 Caspase-3 激活產(chǎn)物和 Bcl-2 的表達(dá)量測(cè)定
                    1.3.5.1 SDS-PAGE 緩沖液
                    1.3.5.2 膜蛋白的提取與處理
                    1.3.5.3 目的蛋白電泳及 Western-blot
        2 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
        3 結(jié)果與分析
            3.1 Ala-Gln 對(duì)仔豬小腸上皮細(xì)胞凋亡的影響
            3.2 Ala-Gln 對(duì)仔豬小腸上皮細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        4 討論
第三章 本研究的總體結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)及有待進(jìn)一步解決的問題
    1 總體結(jié)論
    2 創(chuàng)新點(diǎn)
    3 有待進(jìn)一步解決的問題
參考文獻(xiàn)
致謝
附圖


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]谷氨酰胺二肽調(diào)節(jié)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的研究進(jìn)展[J]. 余珊珊.  畜牧與飼料科學(xué). 2011(04)
[2]仔豬免疫系統(tǒng)的建立及早期斷奶對(duì)仔豬免疫功能的影響研究[J]. 陳靜,劉顯軍,邊連全,樸鐘云.  吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(01)
[3]丙氨酰谷氨酰胺二肽對(duì)早期斷奶仔豬抗氧化能力及腸道保護(hù)的研究[J]. 陳恒燦,馬黎,陳克嶙,譚麗勤,袁雪波,郭榮富.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(02)
[4]丙氨酰谷氨酰胺二肽對(duì)哺乳仔豬生長(zhǎng)性能、小腸形態(tài)學(xué)和血清生化指標(biāo)的影響[J]. 袁雪波,馬黎,陳克嶙,譚麗勤,陳恒燦,郭榮富.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2011(01)
[5]丙氨酰-谷氨酰胺雙肽對(duì)外科危重患者術(shù)后免疫功能的臨床研究[J]. 葉吉云,黃潔,田大廣,張捷.  昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(06)
[6]丙氨酰谷氨酰胺對(duì)胃腸道腫瘤患者術(shù)后營(yíng)養(yǎng)及免疫功能的影響[J]. 揭志剛,李偉,李正榮,劉逸,謝小平.  中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版). 2010(02)
[7]不同日齡斷奶應(yīng)激對(duì)仔豬血液生化和免疫指標(biāo)的影響[J]. 冷靜,朱仁俊.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(04)
[8]腸道黏膜免疫屏障及其菌群與機(jī)體健康關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 李偉,陳慶森.  食品科學(xué). 2008(10)
[9]早期丙氨酰谷氨酰胺強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)對(duì)危重病患者熱休克蛋白及炎癥因子表達(dá)的影響[J]. 張錚,秦海東,倪海濱,徐英,吳海榮.  江蘇醫(yī)藥. 2008(02)
[10]谷氨酰胺二肽對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)、免疫、抗氧化力和小腸粘膜形態(tài)的影響[J]. 席鵬彬,林映才,蔣宗勇,鄭春田,朱選.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2007(02)

博士論文
[1]屎腸球菌EF1對(duì)仔豬小腸黏膜屏障功能的影響[D]. 黃怡.浙江大學(xué) 2012
[2]早期斷奶仔豬腸上皮細(xì)胞氧化與損傷及二氫楊梅素對(duì)其調(diào)控作用[D]. 楊家軍.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[3]谷氨酰胺對(duì)早期斷奶仔豬腸道營(yíng)養(yǎng)與免疫功能影響機(jī)理的研究[D]. 劉濤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002

碩士論文
[1]Ala-Gln對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜屏障功能和吸收功能的調(diào)控作用[D]. 鄧宸璽.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



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