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綿羊無漿體和牛無漿體實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2022-07-13 11:24
  無漿體(Anaplasma)是一類經(jīng)蜱傳播的專性細(xì)胞內(nèi)寄生菌,主要寄生于牛羊等反芻動(dòng)物的血細(xì)胞中,其引起的疾病被稱為無漿體病。已知的無漿體病原包括邊緣無漿體(A. marginale)、綿羊無漿體(A. ovis)、中央無漿體(A. centrale)、牛無漿體(A. bovis)、嗜吞噬細(xì)胞無漿體(A. phagocytophilum)和扁平無漿體(A. platys)。建立高效快速準(zhǔn)確的診斷方法,對(duì)于該病的防控具有重要作用。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、自動(dòng)化程度高、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),使其很快成為疾病檢測(cè)和診斷的熱點(diǎn)技術(shù)。目前,國內(nèi)外均未有檢測(cè)綿羊無漿體和牛無漿體實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法的報(bào)道。利用實(shí)驗(yàn)室保存的12株綿羊無漿體的gltA基因進(jìn)行克隆測(cè)序。然后根據(jù)獲得的綿羊無漿體和GenBank上其他相近病原體的gltA基因序列設(shè)計(jì)出針對(duì)綿羊無漿體的實(shí)時(shí)熒光定量引物和探針,建立了一種檢測(cè)綿羊無漿體的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。該方法特異性強(qiáng),與相近病原如邊緣無漿體、牛無漿體、嗜吞噬細(xì)胞無漿體、支原體、衣原體、螺旋體、巴貝斯蟲(新疆分離株)和呂氏泰... 

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 無漿體病研究進(jìn)展
    1.1 病原學(xué)
    1.2 主要表面蛋白
    1.3 流行病學(xué)
    1.4 診斷
    1.5 預(yù)防和控制
    1.6 本文的研究目的與意義
第2章 綿羊無漿體檸檬酸合酶(gltA)基因的克隆測(cè)序
    2.1 材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
第3章 綿羊無漿體實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法的建立
    3.1 材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
第4章 牛無漿體實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法的建立
    4.1 材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果與分析
    4.4 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):3659956

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