豬傳染性胃腸炎（Transmissible gastroenteritis of swine, TGE）是由傳染性胃腸炎病毒（transmissible gastroenteritis virus, TGEV）引起的一種急性的、高度接觸性的胃腸道傳染病。傳染性胃腸炎病毒屬于冠狀病毒科（Coronaviridae）冠狀病毒屬（Coronavirus）成員,主要引起病豬發(fā)熱、腹瀉、嘔吐、脫水等臨床癥狀。尤其是2周齡內(nèi)仔豬病死率可高達100%,造成巨大經(jīng)濟損失,而疫苗免疫接種是預防該病發(fā)生的最有效的方法。制備出穩(wěn)定、純凈、可靠、安全的毒種可為疫苗的研發(fā)奠定基礎。在本研究中,對本實驗室2012年分離保存并命名的豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）SC-T株種毒進行毒力測定、RT-PCR鑒定、熱穩(wěn)定試驗、pH3.0值穩(wěn)定試驗、氯仿敏感性試驗、病毒核酸類型鑒定試驗、純凈性檢測。PT-PCR鑒定結(jié)果表明：目的基因條帶大小和預期目的基因條帶大小相同,目的基因測序結(jié)果與TGEV基因序列相符。熱穩(wěn)定試驗、pH3.0值穩(wěn)定試驗、氯仿敏感性試驗表明：該種毒對高溫敏感,在50℃以下活性穩(wěn)定,隨著溫度升高病毒滴度降低,... 

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 文獻綜述
    1.1 豬傳染性胃腸炎病毒研究概述
        1.1.1 病原特征
        1.1.2 流行特征
        1.1.3 致病機理
        1.1.4 臨床癥狀
        1.1.5 病理變化
        1.1.6 診斷
        1.1.7 預防治療
        1.1.8 分子生物學特征
    1.2 豬傳染性胃腸炎病毒疫苗研究進展
        1.2.1 強毒疫苗
        1.2.2 滅活疫苗
        1.2.3 弱毒疫苗
        1.2.4 單位疫苗
        1.2.5 核酸疫苗
        1.2.6 重組活載體疫苗
        1.2.7 基因缺失疫苗
        1.2.8 轉(zhuǎn)基因植物疫苗
2 材料
    2.1 材料
        2.1.1 細胞
        2.1.2 生產(chǎn)毒種
        2.1.3 檢驗毒種
        2.1.4 抗體
        2.1.5 引物
        2.1.6 主要試劑
        2.1.7 主要儀器
        2.1.8 實驗動物
        2.1.9 cDNA材料
3 方法
    3.1 細胞的培養(yǎng)與保存
    3.2 細胞純凈檢測
        3.2.1 細胞無菌檢測
        3.2.2 細胞支原體污染檢測
    3.3 TGEV SC-T株在ST細胞上的增殖培養(yǎng)與細胞病變觀察
    3.4 種毒的鑒定
        3.4.1 種毒的毒力測定
        3.4.2 種毒的RT-PCR鑒定
        3.4.3 種毒的理化特性鑒定
        3.4.4 種毒的純凈檢測
    3.5 基礎種子批和生產(chǎn)種子批的建立
        3.5.1 毒種的繁殖
        3.5.2 毒種毒力測定
        3.5.3 種子批的建立
    3.6 基礎種子、生產(chǎn)種子的鑒定
        3.6.1 基礎種子、生產(chǎn)種子的毒力測定
        3.6.2 基礎種子、生產(chǎn)種子的純凈檢測
        3.6.3 免疫原性試驗
        3.6.4 毒種特異性鑒定
        3.6.5 安全性試驗
4 結(jié)果
    4.1 細胞的培養(yǎng)與保存的結(jié)果
    4.2 細胞純凈檢測結(jié)果
        4.2.1 細胞無菌檢測
        4.2.2 細胞支原體污染檢測結(jié)果
    4.3 TGEV SC-T株在ST細胞上的增殖培養(yǎng)與細胞病變觀察
    4.4 種毒的鑒定結(jié)果
        4.4.1 種毒的毒力測定結(jié)果
        4.4.2 種毒的RT-PCR鑒定
        4.4.3 種毒的理化特性鑒定結(jié)果
        4.4.4 種毒的純凈檢測結(jié)果
    4.5 基礎種子批和生產(chǎn)種子批的建立結(jié)果
        4.5.1 毒種的繁殖結(jié)果
        4.5.2 病毒毒力測定結(jié)果
        4.5.3 種子批的建立的結(jié)果
    4.6 基礎種子、生產(chǎn)種子的鑒定結(jié)果
        4.6.1 基礎種子、生產(chǎn)種子的毒力測定結(jié)果
        4.6.2 基礎種子、生產(chǎn)種子的純凈檢測結(jié)果
        4.6.3 免疫原性試驗結(jié)果
        4.6.4 毒種特異性鑒定結(jié)果
        4.6.5 安全性試驗結(jié)果
5. 討論
    5.1 TGEV SC-T株種毒的增殖特性
    5.2 TGEV SC-T株種毒的理化特性
    5.3 TGEV SC-T株種毒的純凈檢測
    5.4 TGEV SC-T株基礎種子批、生產(chǎn)種子批的建立與鑒定
        5.4.1 基礎種子批與生產(chǎn)種子批的建立
        5.4.2 基礎種子批與生產(chǎn)種子批的鑒定
6 結(jié)論
參考文獻
致謝
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【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3655517