為建立奶牛血清中油酸（OA）含量的免疫學(xué)檢測(cè)方法,將油酸用活潑酯法分別與牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）進(jìn)行偶聯(lián),制備人工抗原和包被原;利用薄層色譜法（TLC）和紅外光譜法鑒定人工抗原合成是否成功;用OA-BSA常規(guī)免疫6周齡雌性BALB/c小鼠,取小鼠脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,用間接ELISA篩選出陽(yáng)性細(xì)胞株,再用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆;采用小鼠體內(nèi)誘生法制備腹水,Hi Trap Protein G HP純化柱純化腹水,并對(duì)純化后的腹水用ELISA檢測(cè)抗體效價(jià),以及抗體亞型鑒定。結(jié)果表明,TLC監(jiān)測(cè)抗原合成過(guò)程中有新物質(zhì)生成,紅外圖譜顯示OA-BSA波譜形態(tài)與BSA相似且擁有OA的特征峰;小鼠血清抗體效價(jià)為1∶12 800,用ELISA方法篩選出1株細(xì)胞G-1,抗體亞型為Ig G1型。為建立油酸的免疫學(xué)檢測(cè)方法奠定了基礎(chǔ)。 

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.3 主要儀器
    1.4 油酸完全抗原的合成
    1.5 薄層色譜法（TLC）鑒定
    1.6 紅外光譜法鑒定
    1.7 小鼠免疫
    1.8 雜交瘤細(xì)胞的篩選和建株
    1.9 單克隆抗體的制備
    1.1 0 腹水的純化
    1.1 1 單克隆抗體亞型的鑒定
2 結(jié)果
    2.1 薄層色譜法鑒定
    2.2 紅外光譜法鑒定
    2.3 小鼠血清抗體效價(jià)的測(cè)定
    2.4 雜交瘤細(xì)胞的篩選和建株
    2.5 單克隆抗體亞型的鑒定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3654180