發(fā)布時(shí)間：2022-02-28 21:11

　　本研究旨在確定杜仲葉提取物中綠原酸的純化工藝，并通過(guò)指紋圖譜的建立對(duì)純化產(chǎn)品的質(zhì)量進(jìn)行控制，繼而考察其對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、白色葡萄球菌、乳房鏈球菌、停乳鏈球菌的體外抑菌效果，為下一步臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。試驗(yàn)所采用的純化方法是大孔吸附樹(shù)脂法，首先通過(guò)絮凝沉淀法來(lái)對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，然后再用高效液相色譜法建立純化綠原酸的指紋圖譜；抑菌試驗(yàn)主要采用濾紙片法和連續(xù)梯度稀釋法來(lái)觀察并確定其抑菌效果和最小抑菌濃度；綠原酸的含量測(cè)定采用紫外分光光度和高效液相色譜兩種方法。試驗(yàn)結(jié)果顯示：絮凝沉淀的最佳工藝條件為，10mL pH=5的樣品液中添加1%醋酸殼聚糖溶液1mL，在60℃的水浴中攪拌4min后，在4℃的環(huán)境中靜置4h，過(guò)濾得到澄明度較好的樣品溶液；NKA-Ⅱ樹(shù)脂吸附與解析效果最好，其最佳工藝條件為，樣品溶液pH=4，樣品稀釋倍數(shù)為6倍，上樣體積為3.5BV，上樣速度為2BV/h，洗脫劑為70%乙醇，洗脫速度為2BV/h，用量為2BV；純化綠原酸的抑菌試驗(yàn)效果為，6種細(xì)菌的抑菌環(huán)直徑分別為13.44、18.12、13.56、14.00、13.66、13.00mm，其中金黃色葡... 

【文章來(lái)源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 杜仲概述
        1.1.1 引言
        1.1.2 杜仲葉的化學(xué)成分
    1.2 綠原酸
        1.2.1 綠原酸的理化性質(zhì)
        1.2.2 綠原酸的生物活性
        1.2.3 分離純化方法
    1.3 指紋圖譜
        1.3.1 概述
        1.3.2 中藥指紋圖譜建立的意義和原則
        1.3.3 中藥指紋圖譜的分類(lèi)
    1.4 本研究的目的和意義
第二章 杜仲葉提取物中綠原酸絮凝沉淀工藝的建立
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)藥品及試劑
        2.1.2 試驗(yàn)儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 絮凝劑添加量的篩選
        2.2.2 絮凝溫度的篩選
        2.2.3 溶液攪拌時(shí)間對(duì)絮凝沉淀效果的影響
        2.2.4 pH 值對(duì)絮凝效果的影響
        2.2.5 絮凝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 絮凝劑添加量的篩選
        2.3.2 絮凝溫度的篩選
        2.3.3 溶液攪拌時(shí)間對(duì)絮凝沉淀效果的影響
        2.3.4 pH 值對(duì)絮凝效果的影響
        2.3.5 絮凝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.4 討論
        2.4.1 絮凝劑添加量的篩選
        2.4.2 絮凝溫度的篩選
        2.4.3 溶液攪拌時(shí)間對(duì)絮凝沉淀效果的影響
        2.4.4 pH 值對(duì)絮凝效果的影響
        2.4.5 絮凝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.5 小結(jié)
第三章 大孔吸附樹(shù)脂工藝的建立
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 試驗(yàn)藥品及試劑
        3.1.2 試驗(yàn)儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 紫外分光光度法建立綠原酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.2.2 大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理
        3.2.3 大孔吸附樹(shù)脂的篩選
        3.2.4 樹(shù)脂 NKA-Ⅱ、XDA-Ⅰ靜態(tài)吸附曲線的確定
        3.2.5 pH 值對(duì)吸附率的影響
        3.2.6 解析液的濃度對(duì)解析率的影響
        3.2.7 樣品液濃度對(duì)吸附率的影響
        3.2.8 樹(shù)脂上樣體積的確定
        3.2.9 解析溶液體積對(duì)解析率的影響
        3.2.10 大孔吸附樹(shù)脂正交試驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 紫外分光光度法建立綠原酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.3.2 大孔吸附樹(shù)脂的篩選
        3.3.3 pH 值對(duì)吸附率的影響
        3.3.4 解析液的濃度對(duì)解析率的影響
        3.3.5 樣品液濃度對(duì)吸附率的影響
        3.3.6 樹(shù)脂上樣體積的確定
        3.3.7 解析溶液體積對(duì)解析率的影響
        3.3.8 大孔吸附樹(shù)脂正交試驗(yàn)
    3.4 討論
        3.4.1 大孔吸附樹(shù)脂的篩選
        3.4.2 pH 值對(duì)吸附率的影響
        3.4.3 解析液的濃度對(duì)解析率的影響
        3.4.4 樣品液濃度對(duì)吸附率的影響
        3.4.5 樹(shù)脂上樣體積的確定
    3.5 小結(jié)
第四章 杜仲葉綠原酸提取分離物抑菌效果的研究
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 試驗(yàn)藥品及試劑
        4.1.2 試驗(yàn)儀器
        4.1.3 試驗(yàn)菌株
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 高效液相法檢測(cè)綠原酸的含量
        4.2.2 紙片法測(cè)定杜仲葉綠原酸的抑菌作用
        4.2.3 杜仲葉綠原酸最低抑菌濃度的測(cè)定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 高效液相色譜法綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        4.3.2 紙片法測(cè)定杜仲葉綠原酸的抑菌效果
        4.3.3 杜仲葉綠原酸最低抑菌濃度測(cè)定
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 杜仲葉綠原酸分離純化物指紋圖譜的建立
    5.1 試驗(yàn)材料
        5.1.1 試驗(yàn)藥品及試劑
        5.1.2 試驗(yàn)儀器
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 色譜條件
        5.2.2 樣品溶液的制備
        5.2.3 對(duì)照品溶液的制備
        5.2.4 樣品的測(cè)定
        5.2.5 指紋圖譜及技術(shù)參數(shù)
        5.2.6 方法學(xué)考察
    5.3 結(jié)果及分析
        5.3.1 指紋圖譜共有峰的標(biāo)定
        5.3.2 樣品共有峰相對(duì)面積與非共有峰面積
        5.3.3 10 批杜仲葉綠原酸分離物樣品指紋圖譜的相似度
        5.3.4 方法學(xué)考察
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
第六章 結(jié)論
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]正交試驗(yàn)優(yōu)化大孔吸附樹(shù)脂分離純化杜仲綠原酸[J]. 熊碩,崔麗,劉仲華,張盛,肖文軍.  食品科學(xué). 2013(16)
[3]巨大型蒲公英綠原酸的分離純化及其抑菌實(shí)驗(yàn)研究[J]. 梁引庫(kù).  食品科技. 2013(06)
[4]大孔吸附樹(shù)脂研究進(jìn)展[J]. 彭青,李曉剛,劉亞明.  實(shí)用中醫(yī)藥雜志. 2013(05)
[5]中藥指紋圖譜的研究進(jìn)展[J]. 呂志祥.  求醫(yī)問(wèn)藥(下半月). 2013(03)
[6]超臨界流體萃取野菊花中綠原酸工藝研究[J]. 李繼睿,禹練英,楊孝輝,郭君.  食品研究與開(kāi)發(fā). 2012(09)
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[9]膜技術(shù)分離金銀花綠原酸提取液工藝研究[J]. 范遠(yuǎn)景,馬凌云,徐曉偉,張平,方桐輝,胡曉薇.  食品科學(xué). 2010(20)
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碩士論文
[1]中藥注射劑安全性評(píng)價(jià)體系的研究[D]. 衣冉.山東大學(xué) 2009
[2]微生物絮凝劑產(chǎn)生菌的培養(yǎng)基及其凈水性能和成分的研究[D]. 龍文芳.湖南大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3645588