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樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)重組HA-DC乳酸菌對H9N2型禽流感保護作用研究

發(fā)布時間:2022-02-28 20:56
  禽流感病毒感染呈世界范圍分布,給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,嚴(yán)重危害我國養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。H9N2亞型禽流感病毒(AIV)是當(dāng)今禽流感流行的主要型別之一,自我國有感染人事件以后,H9N2亞型流感病毒更引起了人們的關(guān)注。本研究以植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum NC8)作為遞呈抗原的活菌載體,以禽流感病毒主要免疫保護性抗原HA蛋白的基因片段為靶基因,并融合36bp大小的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)肽(DCpep),構(gòu)建了表達HA-DC的重組植物乳桿菌表達系統(tǒng),并對其免疫效果進行分析。依據(jù)目的基因和穿梭表達載體質(zhì)粒的特點,應(yīng)用primer5.0軟件進行引物設(shè)計。以pSIP409-HA質(zhì)粒作為模板,通過PCR擴增得到大約1701bp的HA基因,再經(jīng)過一次PCR擴增得到大約1737bp的HA-DC基因,與帶有粘性末端的pGEM-T Easy載體連接,得到pGEM-T-HA-DC。再將pGEM-T-HA-DC普通轉(zhuǎn)化入DH5a中,進行酶切、PCR鑒定和測序分析后與穿梭表達載體pSIP409連接,再進行酶切、PCR鑒定后電轉(zhuǎn)化入植物乳桿菌NC8中,得到重組菌L/pSIP409-HA-DC。在... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 禽流感研究進展
    第二章 乳酸菌作為口服疫苗傳遞載體的研究進展
    第三章 樹突狀細(xì)胞及誘導(dǎo)肽的研究進展
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 表達HA-DC重組乳酸菌的構(gòu)建
        1.1 材料和方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 PSIP409-HA-DC在乳酸菌中的表達
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 重組功能乳酸菌飼喂小鼠后免疫指標(biāo)檢測
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄
作者簡介
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
[1]H5N1亞型禽流感病毒NS1149位氨基酸對生物學(xué)功能的影響[D]. 王愛琴.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號:3645567

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