樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)重組HA-DC乳酸菌對H9N2型禽流感保護作用研究
發(fā)布時間:2022-02-28 20:56
禽流感病毒感染呈世界范圍分布,給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,嚴(yán)重危害我國養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。H9N2亞型禽流感病毒(AIV)是當(dāng)今禽流感流行的主要型別之一,自我國有感染人事件以后,H9N2亞型流感病毒更引起了人們的關(guān)注。本研究以植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum NC8)作為遞呈抗原的活菌載體,以禽流感病毒主要免疫保護性抗原HA蛋白的基因片段為靶基因,并融合36bp大小的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)肽(DCpep),構(gòu)建了表達HA-DC的重組植物乳桿菌表達系統(tǒng),并對其免疫效果進行分析。依據(jù)目的基因和穿梭表達載體質(zhì)粒的特點,應(yīng)用primer5.0軟件進行引物設(shè)計。以pSIP409-HA質(zhì)粒作為模板,通過PCR擴增得到大約1701bp的HA基因,再經(jīng)過一次PCR擴增得到大約1737bp的HA-DC基因,與帶有粘性末端的pGEM-T Easy載體連接,得到pGEM-T-HA-DC。再將pGEM-T-HA-DC普通轉(zhuǎn)化入DH5a中,進行酶切、PCR鑒定和測序分析后與穿梭表達載體pSIP409連接,再進行酶切、PCR鑒定后電轉(zhuǎn)化入植物乳桿菌NC8中,得到重組菌L/pSIP409-HA-DC。在...
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一篇 文獻綜述
第一章 禽流感研究進展
第二章 乳酸菌作為口服疫苗傳遞載體的研究進展
第三章 樹突狀細(xì)胞及誘導(dǎo)肽的研究進展
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 表達HA-DC重組乳酸菌的構(gòu)建
1.1 材料和方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
第二章 PSIP409-HA-DC在乳酸菌中的表達
2.1 材料與方法
2.2 結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 重組功能乳酸菌飼喂小鼠后免疫指標(biāo)檢測
3.1 材料與方法
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄
作者簡介
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬白細(xì)胞介素18成熟蛋白基因的克隆與表達[J]. 王春巖,劉莉,楊文濤,王美芳,石春衛(wèi),楊桂連,王春鳳. 中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2012(09)
[2]豬流感病毒研究進展[J]. 王宏魁,黃濤,蘇惠龍,曹三杰. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(12)
[3]H9N2禽流感病毒研究進展[J]. 魯健,田科雄. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué). 2011(02)
[4]牛乳中乳酸乳球菌nisRK基因的克隆與序列分析[J]. 郝鳳奇,王春鳳,楊桂連,葉麗萍,楊中娜. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2010(01)
[5]乳酸桿菌在樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗腫瘤免疫殺傷中的作用[J]. 逯彩虹,程建新,孫富國,王海波,趙素芬,田瑛,閆西紅,田學(xué)勤. 中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2009(08)
[6]綠色熒光蛋白標(biāo)記穿梭表達載體構(gòu)建及重組乳酸菌制備[J]. 陳曉雷,楊桂連,王春鳳. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2009(03)
[7]H1N1亞型豬流感病毒反向遺傳操作系統(tǒng)的建立及高產(chǎn)細(xì)胞型疫苗株的拯救[J]. 劉大飛,劉明,劉春國,楊濤,萬春和,陳浩,齊金龍,杜金玲,李洪濤,孫恩成,劉大程. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(05)
[8]腸道粘膜免疫系統(tǒng)抗原提呈細(xì)胞研究進展[J]. 周維英,張衛(wèi)軍,鄒全明. 免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[9]豬源A組輪狀病毒重組質(zhì)粒pW425et-Vp7在乳酸菌中的表達及免疫原性分析[J]. 胡靜濤,王春鳳. 微生物學(xué)報. 2008(11)
[10]H9N2亞型禽流感病毒對鴨免疫器官的組織學(xué)影響[J]. 李靜萍,蓋晉宏,魏鎖成,胡慶平. 西北民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2008(03)
博士論文
[1]H9N2亞型禽流感病毒氣源性傳染的監(jiān)測及其分子機制的研究[D]. 呂靜.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]H9N2亞型禽流感病毒抗原變異及感染哺乳動物分子機制的研究[D]. 平繼輝.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]鵝細(xì)小病毒VP3基因與鵝白細(xì)胞介素-2基因分泌性融合表達載體的構(gòu)建及在乳酸桿菌中表達的研究[D]. 丁軻.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]不同源性禽流感病毒株的分離鑒定及其主要基因信息的研究[D]. 王偉利.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
碩士論文
[1]H5N1亞型禽流感病毒NS1149位氨基酸對生物學(xué)功能的影響[D]. 王愛琴.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號:3645567
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一篇 文獻綜述
第一章 禽流感研究進展
第二章 乳酸菌作為口服疫苗傳遞載體的研究進展
第三章 樹突狀細(xì)胞及誘導(dǎo)肽的研究進展
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 表達HA-DC重組乳酸菌的構(gòu)建
1.1 材料和方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
第二章 PSIP409-HA-DC在乳酸菌中的表達
2.1 材料與方法
2.2 結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 重組功能乳酸菌飼喂小鼠后免疫指標(biāo)檢測
3.1 材料與方法
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄
作者簡介
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬白細(xì)胞介素18成熟蛋白基因的克隆與表達[J]. 王春巖,劉莉,楊文濤,王美芳,石春衛(wèi),楊桂連,王春鳳. 中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2012(09)
[2]豬流感病毒研究進展[J]. 王宏魁,黃濤,蘇惠龍,曹三杰. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(12)
[3]H9N2禽流感病毒研究進展[J]. 魯健,田科雄. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué). 2011(02)
[4]牛乳中乳酸乳球菌nisRK基因的克隆與序列分析[J]. 郝鳳奇,王春鳳,楊桂連,葉麗萍,楊中娜. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2010(01)
[5]乳酸桿菌在樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗腫瘤免疫殺傷中的作用[J]. 逯彩虹,程建新,孫富國,王海波,趙素芬,田瑛,閆西紅,田學(xué)勤. 中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2009(08)
[6]綠色熒光蛋白標(biāo)記穿梭表達載體構(gòu)建及重組乳酸菌制備[J]. 陳曉雷,楊桂連,王春鳳. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2009(03)
[7]H1N1亞型豬流感病毒反向遺傳操作系統(tǒng)的建立及高產(chǎn)細(xì)胞型疫苗株的拯救[J]. 劉大飛,劉明,劉春國,楊濤,萬春和,陳浩,齊金龍,杜金玲,李洪濤,孫恩成,劉大程. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(05)
[8]腸道粘膜免疫系統(tǒng)抗原提呈細(xì)胞研究進展[J]. 周維英,張衛(wèi)軍,鄒全明. 免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[9]豬源A組輪狀病毒重組質(zhì)粒pW425et-Vp7在乳酸菌中的表達及免疫原性分析[J]. 胡靜濤,王春鳳. 微生物學(xué)報. 2008(11)
[10]H9N2亞型禽流感病毒對鴨免疫器官的組織學(xué)影響[J]. 李靜萍,蓋晉宏,魏鎖成,胡慶平. 西北民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2008(03)
博士論文
[1]H9N2亞型禽流感病毒氣源性傳染的監(jiān)測及其分子機制的研究[D]. 呂靜.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]H9N2亞型禽流感病毒抗原變異及感染哺乳動物分子機制的研究[D]. 平繼輝.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]鵝細(xì)小病毒VP3基因與鵝白細(xì)胞介素-2基因分泌性融合表達載體的構(gòu)建及在乳酸桿菌中表達的研究[D]. 丁軻.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]不同源性禽流感病毒株的分離鑒定及其主要基因信息的研究[D]. 王偉利.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
碩士論文
[1]H5N1亞型禽流感病毒NS1149位氨基酸對生物學(xué)功能的影響[D]. 王愛琴.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號:3645567
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/3645567.html
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