為了闡明高溫環(huán)境下肉雞免疫機(jī)能下降的機(jī)制以及薄荷提取物的調(diào)節(jié)作用,本研究通過建立肉雞免疫抑制的熱應(yīng)激模型,以脾臟為研究對(duì)象,應(yīng)用iTRAQ定量蛋白組學(xué)技術(shù),分析熱應(yīng)激下肉雞脾臟總蛋白質(zhì)的變化規(guī)律,結(jié)合生物信息學(xué)方法,對(duì)熱應(yīng)激引起免疫抑制的分子機(jī)制進(jìn)行深入的研究,并研究薄荷提取物緩解熱應(yīng)激引起免疫抑制的機(jī)制。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1、肉雞免疫抑制的熱應(yīng)激模型構(gòu)建:96只28日齡的健康A(chǔ)A肉雞隨機(jī)分成兩組,分別為對(duì)照組21℃和熱應(yīng)激組31℃,每個(gè)組48只雞,每個(gè)組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只雞,相對(duì)濕度為60%,42日齡時(shí)試驗(yàn)結(jié)束,測(cè)定體核溫度、呼吸頻率和生產(chǎn)性能以及免疫機(jī)能。結(jié)果表明:熱應(yīng)激顯著增加了肉雞的體核溫度和呼吸頻率,顯著降低了脾臟重量和脾臟指數(shù),顯著升高了血漿IL-2,IFN-α,IL-1β,IL-6和TNF-α的含量,顯著降低了IFN-β的含量,導(dǎo)致免疫功能的下降,從而構(gòu)建了肉雞免疫抑制的熱應(yīng)激模型。2、基于iTRAQ的肉雞脾臟蛋白組學(xué)研究:42日齡時(shí),對(duì)照組21℃和熱應(yīng)激組31℃每個(gè)重復(fù)各取3只雞,進(jìn)行屠宰取脾臟樣品用于iTRAQ蛋白組學(xué)定量分析,利用基于質(zhì)譜的PRM技術(shù)和R... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

對(duì)照組和熱應(yīng)激組肉雞的脾臟重量和脾臟指數(shù)（A圖為脾臟重量，B圖為脾臟指數(shù)）

細(xì)胞因子含量（A 圖為 IL-2,B 圖為 IFN-α，C 圖為 IFN-β，D 圖為 IL-1β，E圖為 IL-6，F(xiàn) 圖為 TNF-α）nes in broilers of the heat stress and control groups: IL-2 (A), IFN-α (B), IFN-β (C),IL-1α(D), IL-6(E), and TNF-α(F).價(jià)肉雞熱應(yīng)激的重要指標(biāo)，關(guān)于環(huán)境高溫對(duì)肉雞體核溫度和呼吸頻恒溫動(dòng)物，成年家禽的體溫通常維持在41-42℃。多數(shù)研究表明，熱高，并且體核溫度隨著環(huán)境溫度的升高而升高(Berrong, et al, 1998 1999;Lacey, et al, 2000; Yanagi, et al, 2002)。在對(duì)肉雞熱應(yīng)激模型的構(gòu)激建模的指標(biāo)(Brown-Brandl, et al; 1997; Egbunike, 1979; 陶秀萍，在熱應(yīng)激的條件下，通過增加呼吸頻率，促進(jìn)增發(fā)散熱。隨著環(huán)境會(huì)顯著的升高(李靜等, 2005;Anderson, 1993; 陳燕等, 2013)。有研究3h，肉雞的呼吸頻率從30次/分鐘逐漸上升到200次/分鐘（Zhou, et al顯著增加了肉雞的呼吸頻率(鐘光等, 2018)。本研究發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激顯著吸頻率（P<0.05），與前人的研究結(jié)果一致，表明熱應(yīng)激模型已經(jīng)構(gòu)

3.1.2.7 質(zhì)量控制（QC）本實(shí)驗(yàn)利用的是Q-Exactive 質(zhì)譜儀，因此可以獲得高質(zhì)量的一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜圖譜，從而保證采集數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。從圖3.1可以看出我們鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠性，因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)鑒定到的肽段的質(zhì)量偏差是在10ppm以內(nèi)。從圖3.2可以看出，MS2的MASCOT 得分比較理想，由此可以看出MS的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)質(zhì)量比較高。圖3.3所示，被等量標(biāo)記后的熱應(yīng)激組和對(duì)照組樣品中大部分蛋白質(zhì)的豐度比值接近1。圖3.1 肽段離子的質(zhì)量偏差分布Figure3.1 Mass error distribution of peptide橫坐標(biāo)表示的是肽段離子理論質(zhì)荷比和質(zhì)譜測(cè)得質(zhì)荷比的質(zhì)量偏差，單位ppm即百萬分之一，是一個(gè)相對(duì)單位�？v坐標(biāo)為MASCOT肽段得分。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]環(huán)境高溫與飼糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)肉雞氮代謝和有害氣體生成的影響[D]. 陳燕.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[2]高溫環(huán)境下不同日糧代謝能和粗蛋白水平對(duì)肉雞氮沉積和氮排放的影響[D]. 殷瑞娟.河北工程大學(xué) 2013
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本文編號(hào)：3645093